不同制备方法对生白芍和炒白芍中多糖含量及多糖元素含量的影响

杨 军

河南中医学院第一附属医院药学部，河南 郑州 450000

白芍药物属于毛茛科芍药的一种植物，其也被称之为百花芍药，在中国有着非常悠久的历史，闻名中外，白芍根部可以入药。其产地包括内蒙古、山西、河南以及吉林等地。其性凉、味道酸苦，畏寒，对阴虚发热、胸部疼痛、崩漏以及四肢痉挛起到良好的治疗效果，可以起到平肝止痛以及敛阴收汗之功效［1］。其中对其采取炮制的方法各种各样，其中包括有土制、酒制以及炒制等。根据相关临床报道表明，不同制备方法对白芍当中的药苷含量的影响非常明显［2］，可是却没有相关临床报道证实，不同制备方法对白芍当中多糖含量以和理化性质所带来的影响［3］。针对这一情况，本文笔者对白芍当中质量的相关指标成分采用多糖，分别采用不同制备方法来制备多糖，对炒白芍与生白芍当中多糖含量和理化性质进行分析研究，仅供相关人员参考。

1 材料和仪器

1.1 材料 白芍药材选自安徽省毫州市，经河南中医学院第一附属医院药学部重点实验室中药师鉴定的Pall干燥根。采取不同制备方法处理以后，通过粉碎机进行粉碎［4］，经过八十目筛以后放入干燥器当中进行储存。

1.2 试剂 Glc(标准品葡萄糖)、GlcA(葡萄糖醛酸)、Gla(半乳糖)、Man(甘露糖)、Xyl(木糖)、Rha(鼠李糖)、Ara(阿拉伯糖)。乙醇属于工业级，水属于蒸馏水，苯酚、丙酮、间羟联苯、硫酸等相关试剂全部为分析纯。

1.3 仪器 HP 6890气相色谱仪 (产地:昆山市赛特科学仪器有限公司);CARIO－ERBA元素自动分析仪 (产地:南京第四分析仪器有限公司);754分光光度计 (产地:上海济成分析仪器有限公司);BS21S精密电子天平 (产地:上海平轩科学仪器有限公司);LG－5真空冷冻干燥机 (产地:厦门上兴机械工业有限公司);RE52－86A型真空旋转蒸发仪 (产地:上海普渡生化科技有限公司);Labofuge 400R型冷冻离心机 (产地:北京诺克奥基因工程技术有限公司)。

2 制作方法和结果

2.1 炮制品的制备 生白芍:采取原始材料，将其杂质和毛须彻底去除干净，之后干燥和粉碎，过八十目筛，作为备用［5］。炒白芍:取白芍片放到锅当中，采取文火进行加热，一直炒到表面呈现微黄色取出以及放凉，之后粉碎，过八十目筛，作为备用［3］。

2.2 两种不同制备方法制备白芍粗多糖 ① 水提－乙醇沉淀:分别采取炒白芍以及生白芍各100g。按照1∶10的投料分别加入到蒸馏水常温浸泡24h之后对其进行过滤，提出其药液经过真空旋转蒸发仪浓缩至250ml，之后在往浓缩液当中加入6倍的乙醇 (95%)，使乙醇含量高达80%，室内温度静置沉淀多糖，离心，将上清液去除，之后采用蒸馏水溶解进行沉淀以及抽取滤液，滤液采取截留分子量1 000的透析膜在正常温度流水透析，使寡糖 (小分子)等相关杂质完全去除。透析液通过降低压力浓缩以后采取真空冷冻干燥，分别获得BSEP－S(生白芍多糖)以及BSFP－C(炒白芍多糖)。②水提－丙酮沉淀:制备方法处理采取六倍浓缩液的丙酮替代六倍浓缩液的乙醇 (95%)以外，剩余制备方法和水提－乙醇沉淀相一致，最终分别取得BSEP－S(生白芍多糖)以及BSFP－C(炒白芍多糖)。多糖得出率 (%):多糖质量/药材质量×100%。由表1可以显示，水提－乙醇沉淀制备的生白芍多糖和炒白芍多糖的多糖得率全部明显高于水提－乙醇沉淀方法制备的生白芍多糖和炒白芍多糖。③苯酚－硫酸方法 (中性糖含量测定):以标准品葡萄糖当做单糖标准品，对白芍多糖的含量采取苯酚－硫酸方法进行测定，具体结果详见表1。④间羟联苯－四硼酸钠硫酸法 (糖醛酸含量测定):采取葡萄糖醛酸当做糖醛酸标准品，对白芍多糖的糖醛酸含量采用间羟联苯－四硼酸钠硫酸方法进行测定［5－6］，具体情况详见表1。⑤元素分析:白芍多糖样品经过1050C烘干一直到恒中，采取CARIO－ERBA元素自动分析仪对C、N以及H元素进行分析，结果详见表2。⑥蛋白质含量测定:其含量能够利用含氮量进行换算，则采用元素自动分析仪对样品当中N元素含量进行测定，之后×6.25的系数就能够得出其蛋白质含量。本文白芍多糖的元素都没有检测出N元素，这就说明，白芍多糖当中的含氮量明显低于仪器当中的检测限制，也就是说在0.3%以下，具体情况详见表2。因此，蛋白质含量在0.30%乘以6.25以下［6－7］。

表1 白芍多糖得率、糖醛酸含量以及中性糖含量分析 (%)

2.3 样品糖含量试验 采取BSEP－S和BSEP－C样品4份，依法测定含量，添加芍药苷对照品0.1mg，白芍多糖得率如表1所示，表明本方法的加样回收率以芍药苷加入量计符合要求［7］。

2.4 白芍多糖元素含量测定 分别取BSEP－S和BSEP－C试品溶液20 μl进样，测定芍药苷的峰面积，进行白芍多糖的元素分析，标准曲线计算出芍药苷的含量。白芍多糖的元素分析结果见表2。

表2 白芍多糖的元素分析 (%)

3 讨论

不同制备多糖的方法结果显示:水提－丙酮沉淀来制备白芍多糖的产量以及含量明显高于水提－乙醇沉淀制备方法。白芍制备前后的结果显示，生白芍多糖产率明显高于炒白芍。

根据多糖含量测定结果能够发现，水提－乙醇沉淀制备方法和水提－丙酮沉淀制备方法，白芍被炒制以后的多糖得率全部要比生白芍的得率低，这也许是由于白芍多糖属于水溶性多糖，在清炒期间导致白芍直接碰触过低，造成受到温度过高，导致多糖出现降解，从而对多糖含量造成一定影响［8］。除此之外，这两种制备方法所得到的白芍多糖的产率发现，水提－丙酮沉淀的产量以及含量明显要比水提－乙醇沉淀高，这是由于多糖具有溶水性特点，因此，水溶性多糖通常在丙酮或者酒精当中的沉淀析出，不过丙酮极性要比酒精小，因此，多糖在丙酮当中的溶解程度更多，其产量以及含量更高，对中药炮制作用以及原理起到至关重要的作用。

［1］王小蓉．略论白芍的炮制及功用［J］．传统医药，2006，16(16):56．

［2］张红飞，杨中林，尹丽华．醋炙白芍的炮制工艺研究［J］．中成药，2005，27(3):291－293．

［3］国家药典委员会．中华人民共和国药典 (一部)［S］．北京:化学工业出版社，2005．附录20．

［4］张丽萍，杨春清，赵永华，等．安徽白芍规范化种植加工技术研究及SOP的制定［J］．世界科学技术－中医药现代化，2004，6(3):63－72．

［5］俞明义．中药饮片质量与临床疗效［J］．浙江中西医结合杂志，2005，15(4):255－256．

［6］库赫炎，赵惠东，唐力英，等．白芍饮片质量研究［J］．中国中药杂志，2006，31(13):1070－1071．

［7］王巧，刘荣霞，郭洪祝，等．加工炮制对白芍化学成分的影响［J］．中国中药杂志，2006，31(17):1418－1421．

［8］程芳，郭玫，张艳明，等．不同炮制品白芍中芍药苷的比较［J］．中国民族民间医药2010年 (03期)9－10．