CTP-5对食用菌种植基质的消毒种植试验

张繁荣，胡志辉，周世力，孙齐英，许国权，王兆霖

（江汉大学生命科学学院，湖北武汉430056）

CTP-5对食用菌种植基质的消毒种植试验

张繁荣，胡志辉，周世力，孙齐英，许国权，王兆霖

（江汉大学生命科学学院，湖北武汉430056）

试验选取CTP-5和多菌灵两种消毒剂，设计了0～20 000mg/L 7种浓度梯度组，对食用菌培养料进行处理后接种平菇菌种进行培养，通过观察食用菌菌丝的生长情况以及杂菌的生长情况，以研究CTP-5消毒灭菌效果。结果表明：CTP-5和多菌灵两种药剂处理培养料都具有明显的防污染效果，CTP-5和多菌灵的有效消毒灭菌浓度分别是10 000mg/L、8 000mg/L。但药物处理组与高温灭菌组对照比较，其菌丝生长较慢，CTP-5与多菌灵处理组比较，消毒效果和菌丝生长差异不明显。CTP-5是无毒无残留的新型消毒剂，可代替多菌灵在食用菌培养料中进行辅助消毒，防治污染。

食用菌；CTP-5；多菌灵；消毒灭菌；棉籽壳培养料

随着食用菌种植的发展，人们对食用菌的质量要求越来越高，更偏向于追求无公害的绿色食品。消毒剂要向高效、低毒、无公害方向发展。就目前来看，现在的消毒剂还存在很多不足之处。夏志兰等［1］采用食用菌专用消毒剂与甲醛，对食用菌的几种杂菌和病菌进行了室内平板熏蒸测定和菇房消毒比较试验。结果表明：专用消毒剂杀菌力比甲醛强，它对常见的食用菌杂菌和病菌具有很强的杀灭作用；使用量少，熏蒸时间短，灭菌效果高；试验使用剂量2 g/m3，经熏蒸半小时灭菌效果达100%；使用方便，无强烈的刺激异味，成本也比甲醛低。广谱、高效、低毒及无交互抗性是发展新型消毒剂的必然趋势，由于目前杀菌剂的品种作用机制比较单一，病原菌的繁殖速度较快，抗性也产生较快。因此，必须提高杀菌剂的合成和筛选效率［2］。为减少高效氧化性消毒剂毒副作用和抗药菌出现，应避免长期使用同一种消毒剂，而要以不同消毒剂搭配（或交叉）使用［3］。生物技术是当今发展最快的一种技术领域，生物农药的研究也正逐渐趋向成熟，这些因素使得生物农药的发展越来越迅速，其在农药中所占比重将会越来越大。人们在追求高效的同时，也开始研究环保、健康、绿色的消毒剂来取代化学试剂。在将来，生物消毒剂必将成为消毒剂中不可或缺的组成部分［4-6］。本研究通过一种新型环保型消毒剂CTP-5对食用菌种植基质的消毒种植试验观察，来检测这种消毒剂的消毒效果。试验选用棉籽壳作为主要培养料，棉籽壳所含营养比较全面，吸水性强，透气性好，便于发菌、出菇。探索一种绿色环保的新型食用菌培养料的化学消毒灭菌剂是发展食用菌产业的一种有益尝试，为此我们试验了CTP-5消毒剂对食用菌培养料的消毒灭菌效果。

1 材料与方法

1.1 材料

材料：棉籽壳、石灰、平菇菌种（苏平，引自华中农业大学）、CTP-5（深圳三星实业有限公司）、多菌灵。

仪器：高温蒸汽灭菌锅、无菌操作台、培养箱、电子天平。

食用菌培养料配方：棉籽壳500 g+石灰5 g。

CTP-5药剂的制备：称取20 g CTP-5，加入1 000m L蒸馏水搅拌均匀，配置成浓度20 000.0 mg/L药剂，取500mL加蒸馏水至1 000m L，配置成浓度10 000.0mg/L药剂，按此方法依次稀释制备浓度为10.0、50.0、100.0、1 000.0mg/L药剂。

多菌灵药剂的制备：称取8 g多菌灵加入1 000m L蒸馏水搅拌均匀，配置成8 g/L药剂，用配置CTP-5的方法依次稀释制备4、2 g/L多菌灵药剂。

1.2 培养料的处理

培养料处理方法如表1所示，A1～A6为CTP-5处理组，B1～B3为多菌灵处理组，CK1为高温灭菌空白对照组，CK2为空白对照组。平菇菌丝生长阶段最适宜的培养料含水量为60%～65%，即料水比1：（1.2～1.4）（w/v）。将配置的药剂分别与培养料混合拌料均匀，拌好后放置48 h，等消毒剂挥发后装袋，将CK1处理组的培养料装袋后放入高温蒸汽灭菌锅，常压100℃灭菌8 h，将CK1处理组的培养料直接加自来水700m L，拌料均匀，拌好后放置48 h后装袋。将各处理后装袋的培养料在无菌操作室内进行接种约10 g。将接种后的培养料放入恒温培养箱内，在25℃下培养。

表1 培养基的处理方法Tab.1 The differentm ethodsof dealing w ith the cu ltu rem ed ium

1.3 结果观察与测定

每5 d定期观察培养袋内培养物的污染情况并作记录，同时观察菌丝生长细弱。每10 d测定菌丝的生长速度。测定菌丝生长速度具体方法是测定菌丝向培养袋底部移动生长的距离。每次测定时在菌丝生长的最前沿划线。记录菌丝长满培养袋天数。

2 结果与分析

2.1 培养料不同处理方法的防杂效果与菌丝成长情况测定

不同处理组的杂菌污染情况如表2所示，其中CK1高温灭菌组消毒灭菌彻底，至30 d时仍未生长杂菌，CK2为空白对照组，出现杂菌最早，第15天即开始出现杂菌，CTP-5的10～1 000mg/L处理组在25 d出现肉眼可见的杂菌，至培养第30 d时，低浓度处理组全部培养袋均出现了肉眼可见的杂菌，但A4处理组仅1袋出现杂菌，出现杂菌呈现处理浓度梯度差异，CTP-5浓度越高，出现杂菌的天数愈迟，杂菌的袋数越少。浓度为10 000 mg/L以上的A5和A6处理组至培养的第30 d还未出现杂菌。多菌灵浓度为2 000～4 000 mg/L的B1和B2处理组，也在第25 d出现了杂菌，多菌灵浓度为8 000mg/L的B3处理组至30 d仍未出现杂菌。从表2分析可以看出，CTP-5的有效消毒灭菌浓度为1 000～10 000mg/L之间，与多菌灵的消毒灭菌有效浓度8 000mg/L相当或略低。

表2 不同处理组的杂菌污染情况Tab.2 The living contam inants in the different treatm ent group

2.2 菌丝生长速度

不同处理后的培养料，接种平菇菌种，在20～25℃温度下培养，培养3 d画起始线，第13天画第一次生长终止线，并测定生长距离，第23天画第二次生长终止线，并测定生长距离，第33天画第二次生长终止线并测量菌丝生长距离，各次所测得的生长距离按平行试验作算术平均处理。记录见表3。

各处理组的菌丝生长速度如表3所示，接种第10天（初期），各处理组菌丝10 d生长仅为2.3～2.8 cm，而高温灭菌的对照组（CK1）则达到了5.1 cm，无论是CTP-5或多菌灵的处理都抑制了食用菌菌丝的生长，CTP-5处理组菌丝生长略慢于多菌灵处理组，药物处理组菌丝生长略快于空白对照组CK2。接种第23天（中期），各处理组菌丝生长速度趋于缓慢，仅为1.1～2.3 cm，而空白对照CK2组菌丝生长速度不减，第17天则长满了全袋，各药物处理组以CTP-5浓度为1 000 mg/L的A4组的菌丝生长最好，达到了2.3 cm，但仍落后高温灭菌的对照组CK1对照组，药物处理组菌丝生长略快于空白对照组CK2。接种第33天（后期），未经药物和高温处理的空白组CK2和CTP-5的A1、A2以及多菌灵的B3处理组的菌丝生长完全停止，A4组菌丝仍以2.1cm/10 d的速度缓慢生长。A5、A6、B1、B2则生长更缓慢。因此无论是CTP-5或多菌灵的处理都抑制了食用菌菌丝的生长，CTP-5处理组菌丝生长略慢于多菌灵处理组，药物处理组菌丝生长略快于空白对照组CK2。

表3 菌丝生长速度Tab.3 The different grow th rate ofm ycelium /cm

2.3 不同处理组培养料菌丝满袋的时间

不同处理后的培养料，接种平菇菌种，在20～25℃温度下培养，观测菌丝生长情况（能否长满袋，长满袋所需时间），结果见表4。

表4 各处理组菌丝满袋的时间Tab.4 Daysofm ushroom m ycelium grow th to whole bag/d

各处理组菌丝满袋的时间见表4，高温蒸汽灭菌的空白对照组在第17天就长满了全袋。而空白对照组和各药物处理组至第33天时还仍未长满全袋，但至第33天时，CK2、A1、A2及B3等处理组停止生长，A4、A5、A6、B1、B2仍在缓慢生长。

3 讨论

CTP-5和多菌灵两种药剂处理培养料都具有明显的防污染效果，CTP-5浓度为0～100 mg/L的处理组，各培养袋均出现杂菌，CTP-5浓度达到1 000mg/L时，只在菌袋底部出现很少的杂菌，浓度达到10 000mg/L以上的处理组，肉眼不能分辨杂菌生长。平菇的菌丝在所有的处理组培养料中均能生长，但其菌丝生长与高压高温灭菌对照组比较，菌丝细弱，生长速度缓慢。CTP-5 10.0、50.0、100.0mg/L处理组菌丝生长初期生长较浓密，生长速度较快，但到23 d生长极为缓慢，至33 d CTP-5 10.0、50.0mg/L处理组菌丝完全停止生长。CTP-5 1 000.0 mg/L处理组，菌丝生长在所有处理组中速度最快，但比高温蒸汽组慢。以CTP-5 10 000.0～20 000 mg/L处理组菌丝较快，但不及CTP-5 1 000.0mg/L处理组。多菌灵2 g/L处理组，菌丝生长速度较快，但出现了肉眼可见的杂菌，多菌灵4 g/L处理组菌丝生长比多菌灵2 g/L处理组稍慢，但没有出现肉眼可见的杂菌，多菌灵4 g/L处理组虽然没有出现肉眼可见的杂菌，但菌丝生长最慢，且后期停止生长。综上所述，CTP-5和多菌灵都有一定的消毒效果，但不能单独用于食用菌培养料的消毒灭菌，只能作为培养料消毒灭菌的辅助性药物。

CTP-5与多菌灵的消毒灭菌效果相差没有明显的区别，与考虑到CTP-5是一种新型的绿色环保消毒剂，在消毒灭菌过程中，只产生氧气、二氧化碳和水，无污染，无残留，相比农药多菌灵防霉剂有诸多优点，CTP-5是替代多菌灵的消毒药剂。CTP-5虽然不能对食用菌培养料进行彻底灭菌，但从药物消毒试验和本次的培养料种值试验来看，均显示了较好的消毒效果，可作为消毒剂在食用菌培养料进行辅助消毒灭菌。

［1］夏志兰，姜性坚，刘明月，等.食用菌专用消毒剂对杂茵杀伤力的测定［J］.河南科技大学学报：农学版，2003，23（3）：18-20.

［2］古一雯，李临生，罗琥捷.消毒剂研究新发展［J］.中国消毒学杂志，2008，25（1）：72.

［3］陆婉英，黄青山，励俊.生物消毒剂研究发展[J].中国消毒学杂志,2003，20(3):231.

［4］康占海，蒲丽，吴学民.新型杀菌剂的应用现状及发展展望［J］.西北农林科技大学学报：自然科学版，2005，33（增刊）：233-236.

［5］PAMELA G.An dffective biofungicide with novelmodes ofaction［J］.Pestiside outlook，2002，18（1）：77-80.

［6］RICHARD J.Formulating new options［J］.American FruitGrower，2000，120（5）：11-14.

Planting Experim ents of CTP-5 Disinfection to M ushroom G row ing Substrate

ZHANG Fan-rong，HU Zhi-hui，ZHOU Shi-li，SUN Qi-ying，XUGuo-quan，WANG Zhao-lin
（Schoolof Life Science，Jianghan University，Wuhan 43056，Hubei，China）

Chooses two disinfectant，CTP-5 and carbendazim designs seven concentration gra⁃dient between 0～20 000 mg/L，after mushroom culture material handling，Inoculatesmush-room strains and cultures.Researches the sterilizing effect of CTP-5 by observing the growth of mush-room mycelium and the growth ofbacteria.The results show thatCTP-5 and carbendazim both have obvious disinfection effect tomushroom culturematerial，the valid disinfection concentration of CTP-5 and carbendazim are respectively 10 000mg/L and 8 000mg/L.compared with high temper⁃ature sterilization group，the growth ofmushroom mycelium is slower in medicone group.Compared with carbendazim group，the difference of disinfection effect and mycelium growth is not obvious in CTP-5 group.CTP-5 is a kind of new disinfectantwhich is innoxious and noresidue，can substitute for carbendazim to complementary disinfection and pollution prevention inmushroom culturemateri⁃al.

mushroom；CTP-5；carbendazim；disinfection；cotton seed hulls culturemedium

S646

A

1673-0143（2014）01-0068-04

（责任编辑：陈旷）

2013-12-23

武汉市科学计划项目（201220837304-2）

张繁荣（1963—），男，副教授，研究方向：生物学。