规模化猪场猪瘟免疫效果评估及综合防治措施

张 栋 李云岗 兰邹然 胡丽萍 马慧玲 楚遵锋（山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南 250022）

规模化猪场猪瘟免疫效果评估及综合防治措施

张 栋 李云岗 兰邹然 胡丽萍 马慧玲 楚遵锋（山东省动物疫病预防与控制中心 山东 济南 250022）

为摸清部分规模养猪场的健康情况和猪瘟抗体水平，利用IDEXX公司的猪瘟抗体检测试剂盒，对2014年1～6月份山东省8个规模化猪场2580份免疫血清进行了抗体水平检测，结果显示抗体阳性率为39.2%～94.7%不等，说明所监测的山东部分地区猪瘟免疫水平参差不齐，部分猪场免疫效果较差，未达到良好的保护率。结合猪瘟免疫效果评估结果，探讨猪瘟综合防治措施。

规模化猪场 猪瘟 抗体 防治措施

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病，临床主要以高热稽留、皮肤和黏膜出现大量出血点为特征[1]，是严重危害全球养猪业的重要传染病，且是我国中长期动物疫病控制规划中计划要消灭的重大动物疫病之一[2]，该病流行广泛，发病率和死亡率高。但是随着我国强制免疫政策的持续推进，近年来，猪瘟在我国的流行规律已经发生了较大变化，由过去的大规模流行逐渐转变为无规律性的散发和小规模的地方性流行，且持续性感染病例报道较常见。

猪瘟抗体水平的高低直接反映了猪群免疫接种效果，同时也反映出猪群免疫系统的健康程度以及饲养管理情况，是猪群抵抗猪瘟病毒入侵的关键因素。而目前猪瘟危害又严重制约着规模化猪场的发展，因此猪瘟免疫效果评估在规模化猪场的应用具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清 2014年1月～6月来自山东省不同地区8个猪场的共2580份血清，这些猪群临床上均表现正常，无明显发病症状。

1.1.2 试剂 猪瘟抗体检测ELISA试剂盒，购自IDEXX公司。

1.2 方法

1.2.1 猪瘟抗体的检测 在使用前，所有的试剂盒组分都必须平衡到室温(18～25℃)。试剂应通过轻轻漩涡，旋转混合均匀。（1）分别将50µl样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。（2）分别将50µl的阳性对照加入到相应的对照孔中，注意不同对照的吸头需要更换。（3）分别将50µl的被检样品加入到剩下的检测孔中，注意每个样本都使用不同吸头。（4）轻弹微量反应板或用振荡器震荡，将反应板中的溶液混匀。（5）在室温下(18～25℃)孵育2h或过夜孵育12～18h。无论选择哪种孵育方式，都要将微量反应板用封条封闭或于湿箱中室温孵育，避免液体挥发。（6）用300µl左右的洗涤液洗涤每个板孔3次。在每1次洗涤后，甩去每个板孔中的液体，在最后一次甩掉后，在吸水材料上用力扣板，吸去剩余的液体。在加入下一个试剂前，避免孔壁变干。（7）加入100µl辣根过氧化物酶标记(HRPO)的抗猪瘟病毒的酶标抗体(即取即用)加入反应孔中，用封条封闭或湿盒中室温下孵育30min。（8）重复步骤6。（9）每个反应空中加入100µl的底物溶液到反应孔中，并于避光、室温条件下放置10min。加完第一孔后即可计时。（10）在每个反应孔中加入100µl的终止液终止反应。加终止液的顺序同步骤9，与底物的加入顺序相同。（11）在450nm处测定样本以及对照的吸光度值，也可用双波长(450nm和650nm)测定样本以及对照的吸光度值，空气调零。

1.2.2 计算与判断 计算样本和对照的平均吸光度值(计算方法如下）。阴性对照平均值：NCX=(NC1 A450+NC2 A450)/2；阳性对照平均值：PCX=(PC1 A450 +PC2 A450)/2；样本的计算：Blocking%=(NCX-sample A450)/ NCX×100%。只有阴性对照的平均OD450大于0.500，阳性对照的阻断率大于50%，该检测结果才能有效。若实验不成立，有可能是实验操作失误造成，应重读说明书，再操作一次。如果被检样品的阻断率大于或等于40%，该样品可判为阳性(有CSFV抗体存在)；如果被检样本的阻断率小于或等于30%，该样本可判为阴性(无CSFV抗体存在)；如果被检样本的阻断率在30%～40%之间，该样本可判为可疑，应在数日后再对该动物进行重测。

2 结果与分析

2.1 结果

8个规模猪场的猪瘟抗体检测结果和2014年1～6月份每月所检测的猪瘟抗体结果见表1和表2。

2.2 分析

从表1、表2可以看出，山东省不同地区的8个免疫猪场中在猪瘟弱毒苗免疫之后的抗体水平参差不齐，其中抗体阳性率最高的为94.7%，最低的仅为39.2%；同时，从每个月份所检测的猪瘟抗体结果来看，阳性率最高的为80.5%，最低的为50.1%，说明山东地区猪瘟免疫抗体水平不一致，部分免疫猪群免疫效果较差，猪群存在免疫失败现象，需要引起重视，做好猪场猪瘟免疫程序的调整和猪瘟疫苗的补免工作。

表1 8个规模猪场的猪瘟抗体检测结果

表2 2014年1～6月份每月所检猪瘟抗体结果

通过本次猪瘟监测，可以看出山东部分地区猪群猪瘟免疫状况参差不齐，部分猪场猪瘟免疫水平较低，存在猪瘟免疫失败现象，因此，猪瘟仍然是当前需要重点防范的猪传染病，加强种猪场监管和监测力度[3]尤为重要，在种猪调运时应重视猪瘟的检疫监测，防止猪瘟带毒猪和免疫水平低下的猪只外调，有效控制猪瘟病毒的传播和猪瘟疫情的发生，养猪场应对猪瘟免疫效果定期进行评估，根据免疫抗体的实际水平，确定免疫时间，以实现科学免疫[4]。

3 综合防治措施

3.1 加强猪场饲养管理

猪场管理要尽量做到科学化、规范化，及时清粪，搞好猪舍环境卫生，定期消毒，最大限度地减少病原微生物对猪场的污染，防止疫病的扩大传播。同时应降低各种应激因素对猪群的影响，以避免应激给猪瘟的发生带来有利条件。

3.2 实行“全进全出”的饲养制度

猪场要坚持采用“自繁自养、全进全出”的原则，同时要避免不同日龄和不同生长阶段的猪只混群饲养，以减少交叉感染和持续性感染的发生[5]。

3.3 做好免疫程序，加强疫病监测

制定科学、合理的免疫程序，是猪场预防疾病最基本也是最重要的手段。同时要加强对猪瘟抗原抗体的监测，以了解猪瘟群体的免疫水平高低和抗体水平的整齐度，进而评估疫苗的免疫效果和辅助诊断。检出CSFV阳性猪(带猪瘟病毒猪)，应立即淘汰，清圈消毒，最大限度地降低环境中的猪瘟病毒对猪群的潜在威胁。

3.4 保健预防性投药

有选择性地使用对免疫有促进作用的药物或添加剂(黄芪多糖粉剂、荆防败毒散等)，提高猪群的非特异性抗病力。

3.5 猪场疫病净化

加强以种公、母猪及后备种猪为主的净化措施，及时淘汰带毒种猪，铲除持续感染的根源，建立健康种群，繁育健康后代[6]。

3.6 疾病要早发现，早防治

加强对其他疫病的协同防制，如确诊有其他疫病存在，则还需同时采取其他疫病的综合防制措施。

3.7 建立健全生物安全体系

建立兽医卫生防疫与消毒制度，严格控制传染源，病死猪及产出的死胎、胎衣等，应深埋做无害化处理[7]。

[1] 陈溥言, 王川庆. 兽医传染病学(第5版)[M]. 北京∶ 中国农业出版社, 2006∶ 210-216.

[2] Barbara E. straw. 猪病学(第9版)[M]. 赵德明等, 译. 北京∶ 中国农业大学出版社, 2008∶ 325-331.

[3] 谢移权, 李进锋. 规模化猪场猪瘟抗体水平监测的应用[J]. 中国畜禽种业[J]. 2011(4)∶ 21-22.

[4] 苏晨, 李香, 赵仙苗等. 陕西省重大动物疫病秋防免疫抗体的检测与分析[J]. 畜禽业. 2011(4)∶ 24-25.

[5] 万遂如. 对猪瘟危害的再认识与防控对策[J]. 养猪. 2008(1)∶ 41-44.

[6] 张宗军, 杨瑛, 孙伟. 慢型及非典型猪瘟污染猪场的净化方法[J].畜牧与兽医, 2003(3)∶ 30-31.

[7] 侯明权. 完善防治措施, 有效控制猪瘟[J]. 生猪产销信息. 2011(2)∶58.

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1007-1733(2014)11-0011-02

2014–08–04）