紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量

姚玉兰，李芳，郑一敏，胥秀英，傅善权

(重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆 400054)

紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量

姚玉兰，李芳，郑一敏，胥秀英，傅善权

(重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆 400054)

为了测定北虫草片剂中腺苷的含量，采用紫外分光光度法进行了腺苷含量的测定。结果表明:腺苷线性范围为0.004～0.012 g/L，r=0.999 7，回收率为100.94%(n=5)，RSD= 1.12%。该方法操作简单、快速，线性关系良好，可用于北虫草制剂的质量控制。

北虫草;腺苷;紫外分光光度法

北虫草(Cordyceps militaris L.Link.)又称北冬虫夏草，俗称蛹虫草，是冬虫夏草的一种。冬虫夏草具有显著的药用价值。受生长条件的限制，天然虫草产量有限，野生资源被过度采掘，产量逐年减少，远远不能满足人们生活的需要。目前，人工培育的北虫草子实体可作为冬虫夏草的替代品，在医药、食品、保健等领域应用越来越广泛［1］。腺苷是北冬虫夏草生物体的主要活性成分，参与人体代谢和生理调节，具有降低血压、减慢心律、抑制血小板聚集等药理活性［2］。紫外分光光度法常用于中成药或中药提取物的分析，尤其是在有效部位群的含量分析测定中具有独特的优势［3-4］。本文采用紫外分光光度法进行虫草片剂中腺苷含量的测定，为北虫草及其制剂质量控制提供了实验依据。

1 仪器与试药

TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);电子天平;SB-50D超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)。

乙醇为95%分析纯;三蒸水为实验室自制;腺苷购自国药集团化学试剂有限公司，批号为F 20080125;虫草片剂为实验室自制。

2 实验方法

2.1 溶液配制

对照品溶液配制:精密称取腺苷标准品25 mg置于25 mL量瓶中，加95%的乙醇定容至刻度，摇匀，制成浓度为1 mg/mL的对照品溶液，备用。

供试品溶液配制:取实验室自制的虫草片20片，粉碎，精密称取样品粉末25 mg置于25 mL量瓶中，加95%的乙醇定容至刻度，超声5 min，制成1 mg/mL的溶液，备用。

2.2 吸收波长的选择

分别取上述样品和对照品溶液稀释液一定量，在100～400 nm范围内扫描，随行做阴性样品，结果见图1～3。由图1～3可知:阴性样品没用干扰，虫草片剂的紫外吸收峰与腺苷一致，均在200 nm和260 nm有吸收。考虑到200 nm溶剂干扰较大，故以260 nm作为检验波长。

图1 阴性样品扫描图谱

图2 腺苷对照品扫描图谱

图3 虫草片剂扫描图谱

2.3 线性关系考察

分别精密量取不同量的本文2.1节中的对照品溶液稀释定容成0.004，0.005，0.006，0.007，0.008，0.010，0.012 mg/mL，摇匀。按紫外分光光度法［4］在260 nm波长处进行检测。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，测得标准曲线为Abs= 51.911 62C+0.033 14，r=0.999 7，表明在0.004～0.012 mg/mL范围内腺苷浓度与吸收度呈良好的线性关系。

2.4 精密度实验

取浓度为0.008 mg/mL对照品溶液，按上述测定方法连续测5次，计算RSD为0.09%。结果表明仪器精密度良好。

2.5 溶液的稳定性实验

分别取同一份样品，按上述腺苷含量测定项下放置不同时间，在一定间隔内分别测定吸光度，计算RSD为1.4%。结果表明，样品在100 min内稳定性好。

2.6 重复性实验

分别取同一批样品6份，按本文2.1节的方法制备成样品溶液，测定腺苷吸收度，计算RSD为1.9%。结果表明:测定方法重复性好。

2.7 回收率实验

称取一定量虫草片剂细粉，按对照品与样品量为1∶1加入对照品，按本文2.1节样品溶液制备方法制备5份供试液，测定，计算回收率为100.94%(n=5)，RSD=1.12%。实验结果见表1。

表1 腺苷回收率实验结果(μg，n=5)

2.8 样品含量测定

按本文2.1节制备供试品溶液3批，分别测定吸收度，计算含量。结果表明(见表2)片剂含量稳定。

表2 样品含量测定结果(n=3)

3 结束语

北冬虫夏草近年来越来越受到国内外各界的关注，可用于食品、药品、保健品的生产。人们通常食用的方法为炖汤。本项目将北冬虫夏草进行超微化处理，再做成片剂，携带、储存、使用都较方便。腺苷是北冬虫夏草的主要有效成分之一。本文采用紫外分光光度法测定其含量，方法简单、快速、准确、重复性好，且成本低，可作为常规的质量检测手段。

［1］袁延强，刘可春，韩利文，等.HPLC法测定北虫草中的虫草素含量［J］.中国食物与营养，2010(6):61.

［2］卢钢，孙军，孙立伟，等.微波萃取HPLC测定北冬虫夏草中腺苷的新方法研究［J］.吉林医学院学报，2010，31(3):128.

［3］吕凜，陶宁萍.紫外分光光度法检测桔皮中总黄酮含量的方法研究［J］.现代食品科技，2009，25(2):217.

［4］吉昌群.紫外分光光度法测定白子草中总黄酮含量［J］.海峡药学，2009，21(3):66.

［5］国家药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京:化学工业出版社，2010，附录IVA.

(责任编辑 何杰玲)

Determination of Adenosine from Cordyceps Militaris(L.)Link.
with UV Spectrophotometry

YAO Yu-lan，LI Fang，ZHENG Yi-min，XU Xiu-ying，FU Shan-quan

(College of Pharmaceutical and Biological Engineering，
Chongqing University of Technology，Chongqing 400054，China)

A rapid detection method of Adenosine in Cordyceps militaris(L.)Link.with UV spectrophotometry was established.The result show that the adenosine linear range is 0.004～0.012 g/L (r=0.9997)and recovery rate is 100.94%(n=5)，RSD=1.12%.The method is simple，fast and has a good linear relationship.The method is easy to determine the content of Cordyceps militaris (L.)Link.

Cordyceps militaris(L.)Link;adenosine;UV spectrophotometry

Q525

A

1674-8425(2014)06-0078-03

10.3969/j.issn.1674-8425(z).2014.06.015

2013-08-19

姚玉兰(1991—)，女，上海奉贤人，主要从事天然药物研究;通讯作者郑一敏(1963—)，男，四川广安人，硕士，研究员，主要从事天然药物研究与开发。

姚玉兰，李芳，郑一敏，等.紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量［J］.重庆理工大学学报:自然科学版，2014(6):78-80.

format:YAO Yu-lan，LI Fang，ZHENG Yi-min，et al.Determination of Adenosine from Cordyceps Militaris(L.) Link.with UV Spectrophotometry［J］.Journal of Chongqing University of Technology:Natural Science，2014 (6):78-80.