圆叶唇柱苣苔的组织快繁和离体保存研究初探

江 南，何 俊，周 庄∗，鲁元学，管开云，郁文彬

（1.浙江省亚热带作物研究所，浙江温州 3252005；2.中国科学院昆明植物研究所，云南昆明 650201）

圆叶唇柱苣苔的组织快繁和离体保存研究初探

江 南1，何 俊2，周 庄1∗，鲁元学2，管开云2，郁文彬2

（1.浙江省亚热带作物研究所，浙江温州 3252005；2.中国科学院昆明植物研究所，云南昆明 650201）

云南特有圆叶唇柱苣苔Henckeliadielsii（Borza）D.J.Middleton＆Mich.Möller具有较高观赏价值，适宜岩石造景和庭院盆栽。研究比较8种不同培养基对外植体增殖和生根的影响，结果表明，培养基1／2MS＋NAA0.2mg·L－1＋6-BA2.0mg·L－1的增殖效果最好，可作为圆叶唇柱苣苔组织快繁的培养基；不添加激素的MS培养均不发生增殖，生根效果均较好，其中1／10MS可作为圆叶唇柱苣苔的离体保存培养基。

圆叶唇柱苣苔；组织培养；离体保存

苦苣苔科（Gesneriaceae）为主要分布于热带和亚热带地区的大科，包括约150属3500种植物［1］。我国苦苣苔科植物资源较为丰富，中国植物志英文版（FloraofChina）中记载有56属442种［2］。根据最新的统计分析表明，国产苦苣苔科植物缩减至40属，中国分布的物种增加到542种，其中中国特有属有9属，特有种476种，云南、广西、贵州及其邻近的喀斯特地区是我国苦苣苔科植物的分布和特有中心［3］。

苦苣苔科植物花色丰富、花型优美，植株和叶形态变化多样，具有多重观赏价值。国外的园艺学家早已认识到苦苣苔科植物的观赏价值，已开发利用非洲堇属（SaintpauliaH.Wendl.）、好望苣苔属（StreptocarpusLindl.）、欧洲苣苔属（Ramonda Rich.）、芒毛苣苔属（AeschynanthusJack）等种类，并培育出许多优良品种，同时在国内一些城市也被广泛栽培。虽然我国苦苣苔科植物资源丰富，但仅有芒毛苣苔属、半朔苣苔属（HemiboeaC.B. Clarke）和汉克丽亚花属（HenckeliaSpreng.）的少数种类被利用。

圆叶唇柱苣苔Henckeliadielsii（Borza）D.J. Middleton＆Mich.Möller是多年生草本，为云南特有种，主要生长在滇中和南部地区海拔1900～3000m的山地岩石荫庇处。其叶基生，莲座状，花朵硕大，花冠可达4～5.5cm，上唇白色，下唇蓝紫色，极为特殊，具有较高观赏价值，适于岩石造景和庭院盆栽［4］。为了更好地开发和利用圆叶唇柱苣苔，保存其种质资源，本研究比较了8种不同培养基对外植体增殖和生根的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

研究材料由中国西南种质资源库植物离体库提供，本研究选取带2片叶的芽为外植体。每瓶培养基中接种5个消毒的外植体，每种处理10瓶。

1.2 方法

培养条件设定为培养温度（25±2）℃，光照强度为20μmol·m－2·s－1，光照时间为12h·d－1。

研究以MS［5］为基本培养基，并添加0.56%琼脂和2%蔗糖，pH值为5.8。培养基配置分为添加激素和不添加激素2大类8种类型，其中不添加激素培养基设4个梯度，添加激素设4种不同溶度组合（表1）。

接种后，每日观察外植体的生长状况，并记录外植体污染和死亡情况。培养2周后，统计污染率和死亡率；培养4周后，统计诱导率、生根和增殖率。增殖率／%＝增殖数总和／接种数×100。利用SPSS软件采样独立样本t检验分析不同培养基处理间的外植体增殖率的差异。

2 结果与分析

2.1 无激素MS培养基

表1显示，在未添加激素的MS培养基中，圆叶唇柱苣苔均有根生成，且生长状况良好，不过外植体在4周内未发生增殖。相比而言，圆叶唇柱苣苔在浓度高的培养基1和4的根较浓度低的培养基2和3要粗壮，培养基2的根最细。

表1 外植体在不同培养基中的诱导率、增长率和生根率

2.2 添加激素的MS培养基

添加激素的4种培养基基质均为1／2M培养基。培养基5只添加0.5mg·L－1的NAA，圆叶唇柱苣苔增殖比率均值达到1∶4.92，且有根生成，培养基1和4中根的生长状况差别不大。表1表明，在培养基5的基础上，培养基6增加1.0mg· L－1的6-BA，圆叶唇柱苣苔平均增殖比率均值增加到1∶6.58，明显高于培养基5（t＝5.59，P＜0.01），但添加6-BA使根的生长被抑制。培养基7和8均添加0.2mg·L－1的NAA，而添加6-BA设定梯度，浓度高的培养基8的平均增殖率较浓度低的培养基7明显要高（t＝13.96，P＜0.01）。

3 小结与讨论

研究中未发现外植体污染，可能因为在接种前外植体和接种工具消毒完全，且外植体是幼嫩的茎尖，携带病菌的几率较低。在未添加激素的4个梯度的MS培养基中，圆叶唇柱苣苔均能较好地生长，且有根生成。从种质资源保存的角度来说，培养基2即可满足保存的要求。

研究表明，圆叶唇柱苣苔4周内在4种基本培养基和只添加NAA的培养基中均有根生长，而添加6-BA的其他3种培养基根的生长被抑制。值得注意的是，只添加NAA的培养基5具有较高的增殖率，与同时添加低浓度NAA和6-BA的增殖率较为接近，但提高6-BA的浓度会明显增加增殖率。在培养基8中，每个叶腋均长出新芽，部分叶片上亦分化出新芽，因此，培养基8可作为圆叶唇柱苣苔的增殖培养基。

［1］ KubitzkiK，KadereitJW.Thefamiliesandgeneraofvascular plants.Vol.7.Floweringplants.Dicotyledons.Lamiales（exceptAcanthaceae，includingAvicenniaceae）［M］.Berlin／Heidelberg：Springer，2004：63－158.

［2］ WuZY，RavenPH.FloraofChina（Vol.18）［M］.Beijing＆St.Louis：SciencePress＆MissouriBotanicGarden，1998：244－401.

［3］ 韦毅刚，钟树华，文和群.广西苦苣苔科植物区系和生态特点的研究［J］．云南植物研究，2004，26（2）：173－182.

［4］ 温放，张启翔，王越.广西唇柱苣苔属和小花苣苔属植物的观赏性状评价与筛选［J］．园艺学报，2008，35（3）：239－250.

［5］ MurashigeT，SkoogF.Arevisedmediumforrapidgrowthand bioassayswithtobaccotissuecultures［J］．Physiologia Plantarum，1962，15（3）：473－497.

（责任编辑：张瑞麟）

S637

A

0528-9017（2014）08-1192-02

文献著录格式：江南，何俊，周庄，等.圆叶唇柱苣苔的组织快繁和离体保存研究初探［J］.浙江农业科学，2014（8）：1192－1193.

2014-04-09

温州市科技计划项目（N20100061）

江 南（1981－），女，助理研究员，博士，主要从事植物系统与演化研究工作。E-mail：jiangnan＠mail.kib.ac.cn。

周 庄，高级工程师。E-mail：zhuangchow＠126.com。