不同剂量精氨酸对孕鼠子宫肥大细胞的影响

李秀富，朱锋钊，高俊波，梁世岩，邓书湛

（贵州省铜仁职业技术学院，贵州 铜仁 554300）

肥大细胞（MC）是体内一种重要的免疫细胞，在人类及动物某些速发变态反应性疾病、肿瘤性疾病中发挥着重要作用。MC被激活后通过脱颗粒或转颗粒作用释放肝素、组胺、白三烯、五羟色胺等生物活性物质。白三烯、组胺和五羟色胺具有扩张毛细血管、增强通透性和收缩平滑肌等作用，肝素具有抗凝血作用。精氨酸（Arg）具有重要的营养、代谢和免疫功能，能在一氧化氮合成酶和鸟氨酸解旋酶作用下分别生成NO和多胺。大量研究表明，Arg在改善胎盘血液循环，缓解宫内发育迟缓方面有良好的效果。本试验通过在日粮中添加不同剂量的Arg，分析其对胎鼠数和子宫肥大细胞（MC）数量的影响，为科研和生产提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物及饲料。昆明系小白鼠scxk（黔）2002-0001和饲料，均购自贵阳医学院实验动物中心。

精氨酸（Arg），纯度≥99.8%，购自北京某生物技术有限公司。

1.1.2 主要试剂及药品。甲苯胺蓝（TB），Sigma T3260；盐酸、乙醇、氯仿、氢氧化钠、二甲苯、柠檬酸钠、柠檬酸三钠等常规试剂。

1.1.3 主要仪器。TP1020自动组织脱水处理机，德国产；Mias图像采集系统，四川大学计算机系图像图形研究所研发；RM2125旋转式切片机，德国产。

1.2 试验方法 将40只雌小白鼠（体重为35.0±3.0 g）随机分为4组：对照组（饲喂基础日粮），0.25%Arg组、0.5%Arg组和1.0%Arg组（基础日粮中分别加入 2.50、5、10 g·kg-1Arg，拌饲），每组 10 只，分笼饲养，饲养环境一致，食物和水自由摄取。预饲1周后，按雌雄比例2∶1配种。当晚将雄鼠放进雌鼠笼内，次日早晨检查雌鼠，若有阴道栓的判定为怀孕第1d。妊娠到第15 d时禁食24h，然后处死妊娠小鼠，计数胎鼠，再取孕鼠子宫组织经Carnoy′s液固定，甲苯胺蓝染色镜检，观察并计数MC。

1.3 数据处理 各组试验数据以平均数±标准误（MEAN±SEM）表示，用SPSS13.0软件中One-way ANOVA进行统计分析。

2 结果

2.1 精氨酸对胎鼠宫内生长的影响 由表1可见，0.5%Arg组的胎鼠数极显著高于对照组、0.25%Arg组和 1.0%Arg组（P<0.01），对照组、0.25%Arg、1.0%Arg组间的胎鼠数差异不显著（P>0.05)。

2.2 精氨酸对孕鼠子宫MC数量的影响 孕鼠子宫组织经Carnoy′s液固定，TB染色后镜检，发现MC主要分布于肌层近血管处，外膜中较少，内膜内极少，胞体大小、形态不一，着染紫红色，胞质颗粒清晰（详见图 1～图4）。由表2可见，0.25%Arg和0.5%Arg组的子宫MC数量较对照组显著减少（P<0.05）；1.0%Arg组的子宫MC数量较对照组极显著减少（P<0.01）。1.0%Arg组的子宫MC数量比0.25%Arg和0.5%Arg组显著减少（P<0.05)。

表1 精氨酸对小白鼠胎鼠数的影响

图1 对照组子宫MC镜检结果，10×10

图2 0.25%Arg组子宫MC镜检结果，10×10

图3 0.50%Arg组子宫MC镜检结果，10×10

图4 1.0%Arg组子宫MC镜检结果，10×10

表2 精氨酸对妊娠小白鼠子宫MC数量的影响

3 讨论

本试验结果显示，0.5%Arg组的胎鼠数极显著高于对照组、0.25%Arg组和1.0%Arg组，而且0.25%Arg组较对照组和1.0%Arg组都偏高。说明Arg在不同动物日粮中的添加量必须适中，在生产上使用时必须找准最佳添加剂量，这与王喜波（2007）等、谢小利（2008）等的报道一致。大量研究表明，子宫MC在性周期中呈规律性波动，啮齿类动物在胚胎着床前MC数量达到一个高峰，在着床期内数目减少。Nakaura等报道MC还可能与卵泡的破裂即排卵有关。本试验中，子宫中MC主要分布在肌层近血管处，小血管和微血管周围分布较多，浆膜和黏膜层很少，细胞形态、大小不一，胞浆内充满紫红色的粗大颗粒，紧密地围绕在细胞核周围；在MC数量上，0.25%Arg和0.5%Arg组较对照组显著减少（P<0.05）；1.0%Arg组较对照组极显著减少（P<0.01）；1.0%Arg组比0.25%Arg和0.5%Arg组显著减少（P<0.05）。这说明在妊娠期间添加适量Arg可能对妊娠小鼠调节子宫组织MC脱颗粒反应，减少MC在子宫中的分布，维持子宫内环境相对稳定等有重要作用。

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