重组腺病毒介导的高抵抗素血症对自发性高血压大鼠血压的影响*

张 卫 曾 卓 韩 彬 王 蔚

(1. 广东药学院附属第一医院心内科，广东 广州 510080； 2. 广东药学院临床医学院，广东 广州 510080)

抵抗素是2001年由Steppan 首次报道由单核细胞分泌的富含半胱氨酸的炎性细胞因子，有研究表明，抵抗素与肥胖、糖尿病、胰岛素抵抗有密切相关[1]。但对抵抗素与高血压的相关关系报道甚少。本研究对重组腺病毒介导后自发性高血压大鼠血清抵抗素与血压水平的相关关系进行探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

10周龄shr,spf级高血压大鼠36只，雄性，体重(220±15)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。大鼠均在中山大学实验动物中心SPF级实验环境下笼养。

1.2 方法

将36只10周龄高血压大鼠(雄性)，随机平均分成病毒组及空白对照组(n=18)。其中病毒组经尾静脉注射载有抵抗素基因的重组腺病毒(上海吉凯基因化学技术有限公司提供)1x10PFu/mouse(用生理盐水稀释至0.3 ml)后随机平均分成第一周组、第四周组、第八周组3组(每组n=6)；而空白对照组则连续经尾静脉注射等体积生理盐水后也随机平均分为第一周组、第四周组、第八周组3组(每组n=6)。

1.2.1采用无创尾动脉仪测血压 首先开启大鼠尾动脉血压计(安徽正华仪器公司)预热约20分钟后进行压力信号校正调零。根据大鼠体重将其装入固定盒内固定后放入动物固定架, 大鼠尾部通过加压套插入至接近尾根部,此时鼠尾应该穿过脉搏传感器插入尾部加热器中的加热管内, 使鼠尾刚好处于脉搏传感器的“脉搏信号传感片”上方, 并调节鼠尾压迫片使传感片紧贴鼠尾下方的尾动脉,待大鼠脉搏稳定后用橡皮球充气加压至脉搏完全消失后继续加压20 mmHg左右，然后缓慢放气减压至脉搏信号恢复起始水平，从记录系统中读取收缩压、舒张压。一般连续测量三次，取平均值。

1.2.2测定血清抵抗素 采集清晨空腹12 h以上的大鼠静脉血2～3 ml，按试剂盒说明离心后取血清储存在-70 ℃冰箱中待检测抵抗素水平用。大鼠抵抗素(Resistin)ELISA检测试剂盒 (上海朗顿生物科技有限公司提供),采用竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)法，试剂的配置及操作均按照说明书进行。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 各组高血压大鼠的收缩压、舒张压及血清中抵抗素水平的比较(见表1)。

表1 各组大鼠的血压及血清抵抗素的比较

注：*与对照组比较，P<0.05；※与对照组比较，P<0.05；#与对照组比较，P<0.05。

2.2 高血压大鼠血清中抵抗素水平与收缩压的相关性 相关系数r=0.639，P=0.000，两者呈正相关。(见图1)

2.3 高血压大鼠血清中抵抗素水平与舒张压的相关性 相关系数r=0.613， P=0.000，两者呈正相关。(见图2)

图1 抵抗素与收缩压的相关性分析

图2 抵抗素与舒张压的相关性分析

3 讨 论

高血压病是心血管内科常见疾病，易导致心、脑、肾、眼底等靶器官损害。由于其发病病因及机制涉及到遗传和环境相互作用，目前对高血压病的发病机制仍未明确[2]。而抵抗素是存在于血浆中的一种脂肪组织特异性激素，与肥胖、胰岛素抵抗等有密切相关性，提示其可能与高血压病的发生、发展有密切关系。因此，本研究通过重组腺病毒介导的高抵抗素血症的自发性高血压大鼠模型，来探讨抵抗素与血压水平的相关关系。

本研究显示，腺病毒介导的高胰岛素血症的自发性高血压组的的收缩压及舒张压水平高于对照组，以第一周及第四周有统计学差异，其中以第四周血压升高为更明显(P<0.05)；病毒组的血清抵抗素水平较对照组升高，以第一周及第四周有统计学差异，其中以第四周升高幅度明显(P<0.05)；抵抗素与收缩压(r=0.639,P=0.000)，舒张压(r=0.613,P=0.000)均呈正相关，提示血清中抵抗素可促进自发性高血压大鼠的血压升高。提示与报道一致[3]。其可能的机制是抵抗素不仅与胰岛素抵抗密切相关[4-6]，还可能激活了NF-кB信号通路，诱导血管内皮细胞激活，通过促进内皮素-1、内皮细胞黏附分子-1、基质金属蛋白酶和单核细胞趋化因子1的表达导致血管内皮细胞功能失调[7，8]。其次抵抗素还可以激活细胞外信号调节激酶和磷酯酰肌醇-3激酶通路促进血管平滑肌细胞增殖和迁移，使血管内膜增厚、硬化，管壁阻力增加，从而参与高血压的发生、发展[9，10]。

综上所述，本研究结果表明自发性高血压大鼠的血清抵抗素升高可促进收缩压、舒张压的升高，并且血清中抵抗素的水平与收缩压、舒张压呈正相关关系，提示抵抗素在高血压病的发生、发展起一定的作用。因研究样本量较小，有待进一步扩大样本量进行前瞻性的研究证实。

[1] Kotanik,Adachi S,Tsuzaki K， et al. The association between resisti high-density lipprotein cholesterol and arotid atherosclerosis in eldly women with hypertension[J]. Int J cardiol,2010,141(2):193-194.

[2] 廖新学,王礼春,李欣.高血压基础与临床[M].北京：人民军医出版社,2011,14-22.

[3] 曾龙欢,朱冰波,范利,等.老年男性血清抵抗素水平与高血压的关系[J].中华老年心脑血管病杂志，2014,4(16)：349-352.

[4] Mabrouk R,Ghareeb H,Shehab A， et al. Serum visfatin resistin and IL-8 in A group of Egyptian obese diabetic and non diabetic individuals[J].Egypt J Immanol,2013,20(1):1-11.

[5] Baker JF,Morale M, Qatunani M， et al.Resistin levels in lupus and associations with disease-specific measures,insulin resistin and coronary calcification[J]. Rhaumatol,2011, 38 (11):2369-2375.

[6] Seki G,Yamada H. insulin resistance obesity , hypertension and renal sodium transport[J]. Int hypertens,2011,391-762.

[7] Knshigama A,Sakoda H,Oue N， et al. Resistin like moleculeβis abundantly expressed infoam cellsand is involved in atherosclerosis developmemt[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2013,33: 1986-1993.

[8] Yaseen F,Jaled A,Aftab J,et al. Circulating levels of resistin, IL-6 and lipid profile in eldly patients with ischemic heart disease with and without diabetes[J].Biomarlc Med,2012,6:97-102.

[9] 付景云,宋滇平,李红.等.2型糖尿病患者血清抵抗素水平与高血压相关性研究[J].山东医药,2012,52(28):80-82.

[10] 王小洁,彭清,陈梅,等.血清抵抗素水平与高血压的相关性[J].临床心血管病杂志,2010,26(6):418-420.