芦根与生姜对癌症放、化疗的减毒增效作用*

胡 静 王海伦 张 辉 李增智 岳 旺 张继国

(1.沧州中西医结合医院， 河北 沧州 061001； 2.泰山医学院，山东 泰安 271016)

癌症目前已成为人类面临的一大杀手，药物治疗虽有一定的疗效，但化疗后可引起严重恶心、呕吐等胃肠道反应。频繁的呕吐可导致消化液大量丢失，水、电解质、酸碱平衡紊乱，严重影响病人的生存质量，不仅会影响到疗效，甚至使病人难以忍受而中断治疗。现临床常用的止吐药包括NKl和5-HT3受体拮抗剂、激素等，价格昂贵，使用范围窄且毒副反应大[1-2]，临床多需联合用药，且未见抗癌增效作用，因此期待天然减毒增效药物的研制。

姜辣素是从姜(zingiber)中提取的活性成份[3]，前文[4]已观察到姜辣素可对抗抗癌药顺铂所致呕吐，并抑制肠道嗜铬细胞释放致吐因子5-HT和P物质，姜辣素作用于化疗呕吐最相关的NK1和5-HT3等受体，为多靶点、天然低毒止吐药。芦根(Rhizoma phragmites)为单子叶植物禾本科芦苇(phragmites communistrin)的地下根茎的新鲜或干燥根茎。归肺经、胃经，能生津、止吐、利尿、退黄疸和解毒，对维持体液平衡，清除体内毒物起一定作用[5-6]。本实验证明了姜与芦根组合物对癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有较好的疗效并能同时起到辅助抑制肿瘤的效果。

1 材料与方法

1.1实验动物 (1)昆明种小鼠，体重(20±2) g，由青岛市药检所实验动物中心提供。实验前自由进食饮水，24 h自然光照射。(2)健康成年水貂，体重1.3～1.8 kg，雄性，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每只动物单独置于75 cm×50 cm×50 cm的铁笼中，24 h自然光照射，实验前自由进食饮水。

1.2主要试剂 (1)芦根，由青岛众生大药房购买。生姜，购于山东平度，由泰山医学院技术室鉴定为姜科植物姜的块茎。(2)顺铂(cisplatin)，山东齐鲁制药厂生产，批号：903005CE，20 mg/支。(3)盐酸昂丹司琼注射液，奥赛康制药，批号：090102，2 ml:4 mg。(4)环磷酰胺，江苏恒瑞医药制药股份有限公司产品。

1.3实验方法

1.3.1姜芦组合物治疗呕吐作用的药效学研究 将水貂随机分为4组，每组6只，A组为顺铂模型对照组，B组为昂丹司琼阳性药物组，C组为姜辣素，D组为本发明的姜芦组合物(芦根提取物、姜辣素按24∶1比例混合)。A组给予生理盐水预处理；B组给予昂丹司琼7.5 mg·kg-1预处理；C组给予以姜辣素10 g·kg-1(相当于含生药量)ig预处理；D组给予本发明的姜芦组合物10 g·kg-1(相当于含生药量)ig预处理，各组均在给药30 min给予顺铂7.5 mg·kg-1ip。观察水貂在给药后6 h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期，干呕及呕吐次数。

1.3.2姜芦组合物抗肿瘤作用的药效学研究 对小鼠S180肉瘤生长的抑制实验：采用传代5～7天，生长良好的乳白色腹水，以适量无菌生理盐水稀释成瘤细胞悬液，细胞数为107/ml，每组12只，每鼠右腋窝皮下接种0.2 ml(含瘤细胞2×106个)。接种次日随机分组，实验组将本发明的姜芦组合物分为(200，100 mg/ml)2个剂量组，每鼠灌胃0.5 ml；阴性对照组给予0.5 ml蒸馏水；阳性药物组给予环磷酰胺20 mg·kg-1·d-1，连续给药10天。常规饲养，饮水，食物不限。停药次日，小鼠全部脱颈处死，取皮下实体瘤瘤块，称重，按下列公式计算肿瘤抑制率(%)：肿瘤抑制率=[对照组平均瘤重(C)-实验组平均瘤重(T)]/对照组平均瘤重(C)。对小鼠肝癌H22生长的抑制实验：分组、剂量、给药方式、实验时间与S180肉瘤株相同。(3)对小鼠艾氏腹水瘤(实体瘤)的抑制实验：分组、剂量、给药方式、实验时间与S180肉瘤株相同。

2 结 果

2.1姜芦组合物治疗呕吐作用的药效学研究 与对照组比较，各治疗组均能明显减轻干呕及呕吐次数并延长呕吐潜伏期(P<0.01)。姜辣素组、姜辣素与芦根提取物配伍组，生姜芦根水煎浓缩提取物组，及姜芦组合物能够显著降低致呕率。其中生姜芦根水煎浓缩提取物组与昂丹司琼组相同；而姜芦组合物组致呕率低于昂丹司琼组。结果见表1。

表1 姜芦组合物对顺铂(7.5 mg/kg-1,ip)致吐的影响

注：a相当于含生当量，与对照组比较cP<0.01。

2.2姜芦组合物抗肿瘤作用的药效学研究 本姜芦组合物2个剂量组对S180、H22、EAC与阴性对照组比较，均有不同程度抑制作用，尤其以高剂量组对肿瘤的抑制率最高，如表2～4。

表2 姜芦组合物胶囊剂对S180小鼠的肿瘤抑制作用

注：与对照组比较，cP<0.01。

表3 姜芦组合胶囊剂对H22小鼠的肿瘤抑制作用

注：与对照组相比，bP<0.01。

表4 姜芦组合物胶囊剂对EAC小鼠的肿瘤抑制作用

注：与对照组相比，cP<0.01。

3 讨 论

目前北美产的雪貂(ferret)[7]被公认为是较理想的呕吐动物模型，因为雪貂的呕吐行为与人类极为相似[8]，也有恶心、干呕和呕吐的特征行为，目前雪貂在国外已被广泛应用于呕吐的研究，本研究采用岳旺等[9]成功首创的新型水貂呕吐模型，其呕吐行为与人类相似，而且其免疫组化结果与雪貂的测定结果一致，对顺铂等致吐剂的反应良好[10]，最重要的一点是水貂价格便宜，降低了研究成本。雌性水貂周期性分泌雌性激素，雌性激素对呕吐反应有影响。因此，本研究选用雄性水貂来验证组合物的抗呕吐作用。

肿瘤化疗性恶心与呕吐(chemotherapy-induced nausea and vomiting，CINV)是肿瘤患者在化疗过程中最常见的严重不良反应。CINV的发生机制非常复杂，主要是细胞毒性药物或化疗药物和其在体内的代谢产物产生的刺激，通过5-HT3受体、多巴胺受体、组胺受体、毒蕈碱受体等一系列受体起作用，并将信号传递到呕吐中枢引发呕吐。目前使用的化疗药物中顺铂所致的恶心呕吐反应最为严重，达90%～100%[11]，所以本实验采用顺铂作为致呕药物。根据呕吐反射发生机制，临床常用止吐剂为5-HT3受体阻滞剂(昂丹司琼等)，对急性化疗呕吐虽有效率可达85%，但仅作用于单一受体，具有眩晕、头痛、便秘及消化不良等不良反应，且其价格昂贵。

姜辣素(gingerols)[12]是生姜中具有抗呕吐活性的主要特有的辛辣活性成分，姜辣素可对抗无机及有机毒物硫酸铜和顺铂所致呕吐，并抑制肠道嗜铬细胞释放致吐因子5-HT3和P物质，姜辣素作用于化疗呕吐相关的NK1和5-HT3受体，为多靶点、天然低毒止呕药物。

芦根多糖是芦根(Rhizoma phragmites)中天然活性成分，在鲜芦根中含量2.6%～3%,由于其结构和性质的特殊(分子中阿拉伯糖是左旋糖，较少见)，抗氧化性很强，具有清除生物体内自由基的作用和增强肝细胞抗损伤能力，降低损伤组肝脏内毒物的含量[5]。本文经实验已确定了二者发挥抗呕吐作用的最佳比例，并申报国家新药发明专利(CN201210121145.8)。

S180,H22，EAC是研究药物抗肿瘤作用的常用动物模型。本实验观察了芦根与生姜组合物对三种常见癌模型的作用。姜抗癌止吐作用已有报道，但芦根研究较少，已有文献报道了其抗癌作用[5]。本实验研究结果表明姜芦组合物具有抗癌止吐作用，这为创制天然、低毒、多靶点的抗癌止吐药提供了实验基础。

[1] 王梅子，许建衡.化疗止吐药的研究进展[J] .汕头大学医学院学报，2008，21(2)：123-125.

[2] 何舒.化疗止吐药的研究进展[J].国外医学:药学分册, 2003, 30(6):333-337.

[3] 王耀霞，杨志宏.姜辣素在2种呕吐动物模型中止呕作用机制的探讨[J].沈阳药科大学学报，2009，26(2)：134-137.

[4] 牟群芳，罗宜人.小半夏汤对水貂呕吐模型作用机制的研究[J].神经药理学报，2012，1(3)：23-26.

[5] 张国升,凡明月,彭代银，等.芦根多糖对四氯化碳小鼠肝损伤的保护作用[J].中国药理学通报,2002,18(3):354-355.

[6] 晁若瑜,杨靖亚,蔡晓晔,等.芦根多糖的分离纯化和体外抗肿瘤研究[J].食品工业科技，2011，12：284-286.

[7] Ueno S, Matsuke N, Saito H. Suncus merinos: a new experimental model in emesis research[J]. Life Sci, 1987, 41: 513-518.

[8] Fozard JR. Neuronal 5-HT receptors in the periphery[J]. Neuropharmacol, 1984, 23: 1473-1486.

[9] 岳旺,张芳,王蕾,等.一种新型呕吐动物模型-水貂 [J].药学学报, 2003, 8(2): 89-91.

[10] Endo T, Minami M, Nakayasu M, et al. Effects of granisetron and vagotomy on c-fos mRNA expression in the rat medulla obiongata as assessed by in situ hybridization[J]. Biomed Res, 2004, 25: 229-235.

[11] 石丽娟，王德山.中医药治疗肿瘤化疗所致呕吐的研究进展[J].辽宁中医杂志,1998，25(3)：143-144.

[12] 聂克.呕吐动物模型的研究进展及评价[J].中国药理学通报，2007,23(4)：555-557.