HBV感染相关性慢性肝病中IL-18的表达及临床意义研究

刘元豪

（荆门市第一人民医院感染疾病科，湖北 荆门 448000）

HBV感染相关性慢性肝病中IL-18的表达及临床意义研究

刘元豪

（荆门市第一人民医院感染疾病科，湖北 荆门 448000）

目的 分析不同疾病发展阶段慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染患者的外周血IL-18表达以及其临床意义。方法 收集HBV感染相关性慢性乙肝病患者共58例作为观察组，并选择同期在我院门诊体检的健康人58例作为对照组，检测并对比分析两组的外周血IL-18以及血清中的HBV DNA含量。结果 HBV感染患者的血清IL-18显著更高（P＜0.05）；肝硬化与肝癌之间无显著差异（P＞0.05）；低水平HBV DNA感患者的血清IL-18水平较中、高水平的HBV DNA患者显著更低（P＜0.05）；血清IL-18水平与HBV DNA、ALT呈正相关（P＜0.05）。结论 HBV感染相关性慢性肝病IL-18的表达参与了HBV感染以后的免疫应答，在感染HBV直至发展成为肝癌的整个过程中具有一定的作用，且其表达水平与HBV DNA水平以及肝功能的损伤程度相关。

慢性病毒性乙型肝炎；乙肝肝硬化；IL-18；原发性肝细胞癌

病毒性乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒（HBV）所引起的传染性疾病，严重威胁着人类的健康。据相关资料显示，HBV感染可导致肝硬化、肝癌等[1]。本研究对不同疾病发展阶段慢性HBV感染患者的外周血IL-18的表达以及其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2011年1月至2012年12月期间，我院收治的HBV感染相关性慢性肝病患者58例，其中，20例慢性乙型肝炎，19例乙型肝炎肝硬化，19例肝癌。均无其他病毒及寄生虫感染，无严重心、脑、肺等脏器病变，参与本研究前未接受任何放疗、化疗、手术及免疫治疗。同时选择同期于我院接受治疗的HBsAb（+）健康成年人58名作为对照组。

1.2 方法

所有研究对象均于清晨空腹采集静脉血6 mL，并于温室下自然凝固2 h，并离心分装，于-20 ℃储存备用。①检测IL-18：采用ELISA（夹心酶联免疫吸附法）以全自动酶标仪（北京华安麦科生物技术有限公司 提供，型号RT6000）监测IL-18，配套试剂盒产自武汉博士的生物工程有限公司。②定量测定HBV DNA：以荧光定量PRC分析仪（由上海精谱科技有限公司提供）监测HBV DNA，配套试剂产自上海科华生物工程有限公司，具体操作步骤为：分别取待测血清及样品处理液各100 μL，离心13000 g×10 min，取上清液，并加入样品处理液B 25 μL与之混合，并离心2000 g×10 s，并于100 ℃下干浴10 min，然后再离心13000 g×10 min，取上清液备用。配置好待扩增样品，并将其分装于PCR反应管中，各28 μL，并计入2 μL待用样本，密封后放入PCR扩增仪中扩增。UNG酶反应在50 ℃循环2 min、预变性于90℃腺下2 min循环1次；于94 ℃下变性循环10 s，40次；最后，退火、延伸以及检测荧光均于60 ℃下循环30 s，40次。③检测ALT及胆红素：采用全自动生化仪进行检测，配套试剂盒产自上海执诚生物技术有限公司。

1.4 统计学分析

2 结 果

2.1 不同阶段HBV感染与IL-18之间的关系

慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌和正常对照组的血清IL-18分别为（1383.8±375.9）、（937.7±357.8）、（889.5±440.7）、（468.1 ±200.3）pg/mL，慢性乙型肝炎患者较正常对照组明显更高，且显著高于肝硬化及肝癌患者，P＜均0.05。肝硬化与肝癌之间无显著差异（P＞0.05）。

2.2 IL-18与HBV DNA的复制水平之间的关系

根据患者的HBV DNA水平分组，（1-10）×103copy/mL、（1.0001～10）×104copy/mL和＞106分为A、B、C三组，A组显著高于B、C两组（P＜0.05），而B、C组之间无显著差异（P＞0.05）。经线性分析，HBV DNA的复制水平与血清IL-18之间为正相关关系（P＜0.05）。

表1 细胞HBV DNA的复制水平与血清IL-18之间的关系

2.3 IL-18与ALT之间的关系

经线性相关性分析，IL-18与ALT之间呈显著正相关（P＜0.05）。详见表2。

表2 IL-18与ALT之间的关系

3 讨 论

IL-18具有免疫调节功能，主要是由单核巨噬细胞、B细胞、Th1细胞等分泌，可有效促进Th1细胞的增殖及其免疫应答，还可促进炎性因子以及趋化性因子的产生[2]。IL-18基因所修饰的肿瘤疫苗可促进肿瘤的清除，可上调NK细胞以及T细胞的表达，进而促进Th1细胞的毒性作用，可促进HBV的清除，但可能加剧肝细胞损伤。而如果患者的Th1细胞受到抑制，则其细胞免疫功能无法被有效激活，不利于机体的抗肿瘤反应，导致肿瘤细胞生存和发展[3]。

本研究结果显示，HBV DNA中高水平患者的血清IL-18水平较低水平者显著更高，且HBV DNA与血清IL-18水平之间呈正相关。提示病毒的复制水平越高，患者的血清IL-18的表达水平也随之增加，可促进HBV的清除，但容易造成肝细胞损伤。且IL-18与ALT水平之间存在显著线性相关，提示血清IL-18越高，患者的肝细胞损伤程度越重。当IL-18的表达降低时，Th1细胞因子的分泌明显减少，此时，细胞的免疫功能无法被有效激活，不利于机体的抗肿瘤免疫反应[4]。IL-18主要是通过肝脏进行代谢的，随同胆汁一起排至肠道中，肝细胞的损伤越严重，肝脏对于IL-18的处理能力就越低，且其炎性坏死物还可导致通道堵塞而引起IL-18的排泄功能降低，进而加重体内的蓄积。从HBV感染发展至肝癌过程是多种因素共同作用的结果，作用机制较为复杂。正常人的血清IL-18的表达较稳定，而当感染HBV以后，血清IL-18的水平将发生变化[5，6]。IL-18细胞因子是导致HBV感染以后病情发展的重要因素，可清除HBV病毒，但可导致肝细胞损伤，通过监测患者的血清IL-18水平可了解患者的机体免疫状态，为治疗提供依据。

[1] 张笑添.IL-8基因多态性及血清水平与慢性HBV感染结局的相关研究[D].太原:山西医科大学,2011.

[2] 宋文慧.亮氨酸氨基肽酶在HBV慢性肝病鉴别诊断中的意义[J].实验与检验医学,2008,26(1):13-14.

[3] 胡蓉,刘文群,陈晓红等.赣州地区303例慢性肝病患者HBV基因型别检测及意义[J].山东医药,2011,51(31):79-80.

[4] Migita K,Sawakami-Kobayashi K,Maeda Y,et al.Interleukin-18 promoter polymerphisms and the disease progression of Hepatitis B virus-related liver disease[J].Translat Res,2009,153(2):91-96.

[5] Lemmers A,Gustot T,Durnez A,et al.An inhibitor of interleukin-6 trans-signalling,sgp130,contributes to impaired acute phase response in human chronic liver disease.[J].Clin Exper Immunol,2009,156(3):518-527.

[6] 张文坚,万克青,龚环宇等.IL-18与HBV感染及拉米夫定治疗的相关性[J].中国现代医学杂志,2008,18(7):952-955.

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：1671-8194（2014）06-0133-02