高致病性猪蓝耳病、圆环病毒病疫苗对猪瘟疫苗免疫效果的影响试验

朱华贤，陈建祥，厉金炳，何夏潮，袁金钱，董国良，王友杉，徐小燕，黄镇华，王鑫炎，史丽娜

(1.绍兴市上虞区畜牧兽医技术推广中心，浙江上虞312300; 2.上虞区丰惠畜牧兽医站)

高致病性猪蓝耳病(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性传染病，以妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、早产、产弱仔等繁殖障碍和呼吸困难、高死亡率为特征。该病传播速度快，仔猪发病率可达100%，死亡率可达35%以上，母猪流产可达35%，中大猪感染率、死亡率较高。PRRSV主要在粘膜、肺局部巨噬细胞(PAM)和单核细胞中复制，由于PRRSV 复制期间PAM 破坏造成的免疫抑制，可能是PRRS 流行猪场呼吸道疾病增加、生产性能降低和免疫失败的主要原因［1－2］。

猪圆环病毒病(PCV2)是由PCV2 感染引起的一种免疫抑制性疾病。据邢刚等(2014)［3］报道，周继勇等曾利用IFA 方法对浙江省内的2039份血清样本进行检测，发现猪群普遍存在PCV2 感染;李晓成(2013)［4］曾于2013年进行PCV2 流行病学调查。结果表明，国内PCV2 感染率为21.74%，华东地区为31.7%。主要临床表现为仔猪断奶后多系统衰竭综合征;12 周龄以上猪则主要表现为皮炎和肾病综合征，间质性肺炎、先天性震颤及繁殖障碍等。

近年来，我国养猪业普遍应用PRRS、PCV2 疫苗免疫，对缓解临床症状、控制二种疫病的疫情不失为主要应对措施之一［5］。但PRRS 弱毒疫苗干扰猪瘟免疫抗体和如何使用PCV2 疫苗仍存在较多争议。本试验的目的旨在探讨PRRS、PCV2 疫苗对猪瘟疫苗免疫效果的影响，为临床防控提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试疫苗 PRRS 疫苗(JXA1－R 株)由山东省某公司提供，生产批号1211027－1，猪瘟耐热保护剂活疫苗(兔源)由山西省某公司提供，生产批号2112069，PCV2 灭活疫苗由浙江省某公司提供，生产批号20130202。CSF 抗体、PRRS 抗体、PCV2 抗体检测委托浙江省农科院畜牧兽医研究所测定。

1.2 试验方法 试验在上虞区某规模猪场进行。选择日龄相近的断奶仔猪(平均35日龄)40 头，随机分为四组，每组10 头，分对照组、PRRS 疫苗组(简称蓝耳组)、PCV2 疫苗组(简称圆环组)、PRRS+PCV2 疫苗组(简称蓝+圆组)。预试期7 d。免疫程序和剂量详见表1。

表1 免疫程序设计

1.3 饲养管理 按猪场常规饲养管理日程操作，专人负责饲养。保育猪日粮:玉米60%、6401 料精40%;生长猪日粮:玉米65%、豆粕27%、麸皮4%、4312 料精4%。全程记录耗料、健康状况。

2 结果与分析

2.1 PCV2、PRRS 疫苗对供试猪生长速度的影响

详见表2。

表2 PCV2、PRRS 疫苗对供试猪生长速度的影响

由表2可见，经86 d 试验(35 d－121 d)，以圆环组增重最高，对照组最低，但经F 检验，各组间差异不显著(P ＞0.05)。

2.2 PCV2、PRRS 疫苗对供试猪采食量及料重比的影响 详见表3。

表3 PCV2、PRRS 疫苗对供试猪采食量及料重比的影响

由表3可见，经86 d 试验，环圆组总耗料563.5 kg，净增重305.5 kg，料重比为1.845∶1，其次为蓝+圆组，料重比为2.007∶1，但经F 检验，各组间差异不显著(P ＞0.05)。

2.3 PCV2、PRRS 疫苗的免疫效果

2.3.1 PCV2 疫苗的免疫效果 详见表4。

表4 PCV2 疫苗的免疫效果观察

根据ELISA 检测方法，临界值≥0.4 为阳性、初始第一次采血即PCV2 疫苗免疫前，PCV2 抗体检测S/P 值均≥0.4，提示该场圆环病毒为严重污染场。第二次采血，即PCV2 疫苗免疫后第35 d，PCV2 抗体虽然有较高的阳性率，但不管是PCV2 疫苗注射组还是未注射组均呈下降趋势。第三次采血，即PCV2 疫苗免疫后第86 d，对照、圆环二组S/P 值继续呈下降趋势，而蓝耳、蓝+圆组呈明显上升趋势，蓝+圆组有8 猪上升，蓝耳组有6 猪上升。出现上述情况，或与野毒感染、蓝耳病弱毒疫苗等因素有关。

2.3.2 PRRS 疫苗的免疫效果 详见表5。

表5 PRRS 疫苗的免疫效果观察

根据ELISA 检测方法，临界值≧0.4 为阳性，初始第一次采血，各组只有部分猪PRRS 抗体超过临界值，可能与母源抗体有关。第二次采血，对照、圆环二组继续呈下降趋势，而蓝耳、蓝+圆组上升趋势明显，阳性率100%。第三次采血，对照、圆环二组继续呈下降趋势，而蓝耳、蓝+圆组仍继续保持较高抗体滴度，阳性率达100%。

2.4 PCV2、PRRS 疫苗对猪瘟疫苗免疫效果的影响详见表6、表7。

表6 PCV2、PRRS 疫苗对猪瘟免疫效果的影响

表7 第二次采血猪瘟抗体检测分析(LSR 法)

从阳性率观察，第一次采血猪瘟抗体各组阳性率为0%。第二次对照、圆环组阳性率均为20%，蓝耳、蓝+ 圆组均为0%。第三次均到达较高水平。从个体抗体曲线走向分析，各组基本呈上升趋势。方差分析结果，第一、三次采血猪瘟抗体各组差异不显著，第二次差异显著，其中圆环组、对照组与蓝耳组、蓝+圆组相比，差异显著(P ＜0.05);圆环组与对照组、蓝耳组与蓝+圆组差异不显著(P ＞0.05)。

3 小结与讨论

3.1 经本次试验，各组从生产性能分析，虽然圆环组生长速度最快，耗料最多，饲料报酬最高，但经方差分析，各组差异不显著(P ＞0.05)。

3.2 PRRS 疫苗在本次试验中，表明免疫效果良好，在PRRS 疫苗免疫后第28 d、74 d，蓝耳、蓝+圆组血清中均有较高PRRS 抗体。另外，PRRS 弱毒活疫苗或许能增加圆环病毒病野毒株的感染几率，但应进一步验证探讨。

3.3 一般认为，PRRS 弱毒活疫苗免疫1 周后才能使用猪瘟疫苗，本次试验认为PRRS 弱毒活疫苗对猪瘟疫苗免疫有较大干扰作用，干扰时间应该大于7 d。因此，在使用PRRS 疫苗和其他疫病疫苗时要严格控制免疫接种的间隔时间，间隔7 d 是不够的。本次试验PCV2 灭活苗对猪瘟弱毒活疫苗免疫抗体未见抑制作用。

［1］陈玉华.高致病性猪蓝耳病灭活疫苗和弱毒疫苗的免疫效果试验［J］.浙江畜牧兽医，2014(1):4－6.

［2］文利新，丁小波，罗维.猪高致病性蓝耳病的发病特点及其防治技术［J］.湖南农业科学，2008，4:153－154.

［3］刑刚，邱小伙，阮系真，等.两种PCV2 抗体ELISA 检测试剂盒检测效果比较［J］.浙江畜牧兽医，2014(1):1－3.

［4］李晓.在浙江省猪病高峰论坛会议上的报告［R］.2013.11.

［5］陈庆新，高绍彬，叶菊香，等.杭州地区猪Ⅱ型圆环病毒抗体的血清学调查［J］.中国兽医科技，2003，33:26－28.