娄晋宁：做研究要锲而不舍

朱文赫

应用干细胞技术治疗糖尿病的研究，娄晋宁带领他的团队已经经历了将近7年多的漫长历程。

近4年来，娄晋宁领导的团队已经实施了26例胰岛移植治疗糖尿病研究。

他的团队从事的干细胞治疗糖尿病的研究可以说是当今医学界最前沿、最热门、最受瞩目的研究领域之一。由于理论体系的不完善，技术手段的局限性等诸多未解难题以及伦理道德方面的争议，使得干细胞的研究一直处于既让人无限期待，又被人不断质疑的纠结之中。

谁都知道创新之路的漫长和曲折，探索就会有失败，失败就会有收获。只有怀着内心梦想的人才可能持之以恒，锲而不舍。

做应用研究比做理论研究更难

娄晋宁的手机更像是一本常年随身的病历夹，往来的许多短信包含大量临床患者反馈的信息资料。

一个多月前，他们刚刚进行了国际首例人胚胎胰腺干细胞分化胰岛移植治疗1型糖尿病的临床研究。作为这个项目的主要负责人，娄晋宁需要及时了解每例患者的血糖、胰岛素用量以及患者其他指标的变化情况，以便在以后的研究中不断改进技术方法。

干细胞是体内存在的一类具有自我更新的能力，又有分化成为其他组织细胞潜能的特殊细胞可以用来制备各种功能细胞并应用于疾病的治疗。干细胞的研究也因此在全世界范围内如火如荼。

目前，有两类疾病应用干细胞治疗可能有效，一是神经损伤，二是糖尿病。因为，干细胞可以分化成为神经细胞和胰岛细胞，并且神经细胞和胰岛细胞移植证实能够有效治疗这些疾病。由此，干细胞研究被认为最有可能在这两个领域取得突破。

1978年进入大学学习前，娄晋宁已经有7年的临床医疗工作经验，经过5年医学院本科和3年中国医学科学院的研究生学习，奠定了他基础医学和临床医学的工作基础。在瑞士留学的10年间，娄晋宁先后从事了脑型疟疾，多发性硬化，移植免疫排斥、缺血-再灌注损伤和胰岛移植治疗糖尿病等方面的研究。由于具有基础研究和临床医疗两方面的工作经验，娄晋宁更热衷于将基础研究的结果与临床应用相结合。但他也深知“做基础研究的人不容易，要把基础研究转化成临床应用更不容易”。

娄晋宁和他的团队一直承担国家“十一五”计划和“十二五”计划干细胞技术治疗糖尿病的研究课题。研究主要采用人胚胎胰腺组织来源的干细胞，通过体外扩增和定向诱导分化制备成胰岛内分泌细胞，并将这些细胞诱导成为胰岛样结构。

在体外证实这些分化的胰岛能够对葡萄糖刺激产生胰岛素释放后，它们先后在糖尿病小鼠模型和糖尿病大鼠模型都获得了满意的治疗效果。之后，他们进一步应用胰腺全切除手术制备了恒河猴糖尿病模型，并将人胚胎胰腺干细胞分化胰岛分别移植到恒河猴的肝脏和肾包膜下。经过10只恒河猴，长达近4年的有效性和安全性的评价，课题组证实，人胚胎胰腺干细胞分化胰岛治疗糖尿病在恒河猴有效并且安全。

实验研究的成功并不意味临床应用的开始。在干细胞技术治疗糖尿病临床应用前必须解决一系列的技术问题 如：采用多大胚胎的干细胞？干细胞体外扩增到多少数量？如何筛选分化后的功能胰岛？如何评价分化胰岛的安全性？干细胞分化胰岛移植到什么部位？移植多少胰岛数量？移植后进行哪些指标监控？等等。除此之外，还要申请通过医学伦理委员会的审批以及病人签署知情同意书。这些问题的解决都涉及主管部门、基础研究团队，临床研究团队和病人之间的密切合作和沟通。

近来的研究表明，来自人胚胎早期的干细胞系具有分化效率低和成瘤性高的缺陷，而来自成年人体的干细胞往往存在增殖能力低下的缺陷。而人胚胎组织来源的干细胞既具有很强的自我更新能力，有具有较好的分化潜能，并且我国学者曾经进行了近1000例的临床实验，证明用人胚胎胰腺组织移植治疗糖尿病有效。因此，娄晋宁团队决定采用人胚胎胰腺组织来源的干细胞进行这项研究，并通过医学伦理委员会审批和患者签署胚胎组织进行同意书解决了所涉及的医学伦理问题。

娄晋宁团队首先证实，来源于3个月内的人胚胎胰腺组织的干细胞，具有体外增殖能力较强，分化后成熟度较高的双重优点，并且在细胞移植后不发生免疫排斥反应。

此后，娄晋宁团队分别解决了这种干细胞的体外扩增、定向诱导分化和形成胰岛样结构三个技术难题，使一个人胚胎胰腺来源的干细胞可以在体外扩增到10个亿细胞，并且诱导分化后胰岛数量可以达到50万当量，胰岛素分泌功能相当于正常胰岛的50%。这些干细胞技术在数量和质量上的突破为临床应用奠定了基础。

基本的素质是锲而不舍

目前，干细胞的临床应用仅限于自体干细胞治疗，国内用此类干细胞治疗的疾病已达30种之多。自体干细胞移植的最大好处是安全，但多数治疗可能无效或短时间有效，并且相关的作用机制也没有搞清楚。

不同于自体干细胞移植，1型糖尿病的发病机制是自身免疫所导致的胰岛细胞破坏，并且临床研究研究证实采用胰岛细胞移植能够有效治疗1型糖尿病。因此，采用干细胞体外扩增和定向诱导分化技术所制备的胰岛移植，其治疗的机制就是胰岛细胞的替代治疗。到目前为止，采用这种干细胞技术治疗糖尿病在国际上还未见文献报道。

娄晋宁寄希望以基础研究学者要求的逻辑性以及临床研究者要求的精密性、完备性来控制研发节奏，回归医学临床治疗研发的理性轨道。

“其方法就是把自己的研究‘做实了”。

据娄晋宁介绍，首例干细胞分化胰岛移植经过医学伦理委员会的审批，由患者签署了知情同意书，并接受免费治疗。移植所采用的干细胞经过功能筛选来自3个不同的胚胎，经过30天的体外扩增和定向诱导分化，培养的细胞达到140个培养瓶，诱导分化后的胰岛达到50万当量。目前，移植后的初步结果显示，干细胞分化胰岛移植后患者的血糖控制改善，胰岛素用量减少，进一步结果有待组织活检的证实。

干细胞移植是前沿研究，在研究的初始阶段，每一个探索都可能存在缺陷，任何技术和方法都有一个从不完善逐步到完善的过程。娄晋宁认为，对于发生率和死亡率高、又缺乏特异有效治疗手段的疾病，应当在确保安全性的前提下鼓励和支持探索创新。

科研的创新性意味着曲高和寡，大多时候，研究者只能独享孤独，也只有本着对知识和生命敬畏的人，才懂得如何沿着科学的路径登攀。而要做到这一点，娄晋宁觉得，最基本的素质是锲而不舍。

娄晋宁，国家卫生计生委中日友好临床医学研究所所长，中国医学科学院、中国协和医科大学和北京大学医学部博士生导师。教授。主要从事胰岛移植治疗糖尿病，干细胞技术治疗糖尿病和生物人工肝等方面的研究。主持国家自然科学基金重点课题，国家“973”计划和国家“863”计划等研究课题。主要研究工作：1.胰岛移植治疗2型糖尿病；2.干细胞技术治疗糖尿病：应用人胚胎胰腺组织来源的干细胞，通过体外扩增和定向诱导分化技术，大规模地制备干细胞分化的胰岛，并应用于糖尿病大鼠和糖尿病恒河猴的治疗。3.生物人工肝治疗急性肝功能衰竭：通过大规模微载体培养永生化人肝细胞，建立新型生物灌流反应器，建立了一种新型的生物人工肝支持系统。endprint