红龙镇痛片提取工艺的改进

2014-05-23李怀平

中国当代医药 2014年1期

姬涛李怀平王朔

山东阿如拉药物研究开发有限公司，济南 250101

红龙镇痛片为藏医古验方，由龙骨、印度獐牙菜、红花等十五味药组成，具有醒脑开窍、通络止痛的功效，原方收载于云丹嘉措的《藏医临床札记》，一百多年的临床应用证明，其对偏头痛、血管性头痛效果良好。对该药品原工艺中小部分药材进行提取，大部分药材直接粉碎入药，有效成分释放缓慢，同时因为原药材细粉入药，也影响到卫生学不合格的问题。本实验根据配方中药材所含化学成分的理化性质，选用不同的溶剂进行分开提取，保证药材中的药效成分能够被充分的提取出来。本研究将红龙镇痛片制剂前工艺分为以下3个部分。①醇提部分：印度獐牙菜、红花、金腰草、川西小黄菊、马尿泡、波棱瓜子6味药；②水提部分：铁棒锤、唐古特乌头、珍珠母、龙骨、泉华、石花、短穗兔耳草7味药；③粉碎部分：安息香、熊胆粉2味药。本研究着重对醇提两部分进行了工艺研究，采用正交试验，优选了最佳提取工艺。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

1.1.1 仪器 KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；高效液相色谱仪：日立L-2100泵，日立L-2400检测器；岛津AUW220D电子天平；HH-4数显恒温水浴锅（常州荣冠试验分析仪器厂）。

1.1.2 试药药材由青海金珂藏药股份有限公司提供；獐牙菜苦苷对照品（0785-200303）由中国食品药品检定研究院提供；水为纯化水，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

1.2 方法

本品原标准中以獐牙菜苦苷含量为含量测定项，因此本试验以獐牙菜苦苷提取率作为指标之一，进行了醇提工艺的考察。

1.2.1 色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）为流动相；检测波长235 nm；进样量 5 μl；流速 1 ml/min，柱温室温[1]。

1.2.2 对照品溶液的制备取獐牙菜苦苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，摇匀，即得。

1.2.3 药材溶液的制备取印度獐牙菜药材细粉约0.5 g，精密称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.2.4 供试品溶液的制备取实验制得样品细粉约1.0 g，精密称定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超声处理40 min，取出，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.2.5 醇浓度筛选取印度獐牙菜20.1 g、红花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黄菊20.1 g、马尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味药材混合共计72.6 g，共取4份，分别加入8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次 2 h，滤过，滤液浓缩干燥，研细，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，计算提取率。

1.2.6 正交试验为进一步优选醇提最佳工艺，选定加醇量、提取时间和提取次数作为考察的三个因素，各取三个水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率为指标综合评分。正交试验设计见表1。

表1 醇提正交试验设计表

实验室中的提取时间是由提取次数确定，提取时间由前往后依次进行。

称取印度獐牙菜等6味药材混合共计72.6 g，共取9份，按正交表顺序进行工艺试验，按“1.2.4”项下制备供试品溶液，测定獐牙菜苦苷含量，计算提取率。

2 结果

2.1 不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较

不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较具体结果见表2。结果表明，醇浓度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75%乙醇和95%乙醇的提取效果差异较小，为保证药物中有效成分能最大限度的提取出来，同时也能够节约生产成本，确定采用浓度为75%乙醇进行提取。

表2 不同浓度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比较

2.2 醇提正交试验

醇提正交试验直观分析具体见表3，醇提正交试验方差分析具体见表4。由方差分析结果看，三个因素对提取效果影响的作用次序为C>A>B，其中C因素对结果有显著性影响，即提取次数影响最大，加醇量次之，提取时间影响最小，再结合直观分析结果，确定醇提的最佳工艺参数为A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。