HIE患儿外周血淋巴细胞免疫分型、免疫球蛋白水平变化及意义

夏 涛，李 璐，邬 薇，吴伟玲，焦泽霖

(南京医科大学第二附属医院，南京210003)

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是指围生期缺氧窒息导致的脑缺氧缺血性损害，可产生智能低下、脑瘫等神经系统后遗症，给家庭和社会带来沉重负担［1］。HIE的病理生理机制非常复杂，脑血流减少、自由基损伤、细胞内钙超载、脑细胞能量代谢衰竭等多种发病机制交互作用共同导致HIE的发生［2］。研究发现，淋巴细胞、免疫球蛋白等参与了HIE的炎症反应过程［2，3］。2010 年1 月 ～2012 年12 月，我们观察了HIE患儿外周血淋巴细胞免疫分型和血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA的变化，探讨细胞免疫和体液免疫在新生儿HIE发病中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取同期收治的足月HIE患儿60例为HIE组。均符合中华医学会儿科学分会新生儿学组2005年修订的HIE诊断标准［4］。其中男37例、女23例。胎龄37～42周，出生体质量2 500～4 000 g。HIE轻度32例，中重度28例。另随机选取同期健康足月新生儿30例作为对照组。其中男19例、女11例，胎龄37～42周，出生体质量2 500～4 000 g。所有新生儿排除感染性疾病、溶血性疾病、先天畸形等，母亲均无自身免疫性疾病及其他可能影响新生儿免疫功能的疾病，新生儿住院期间均未使用任何影响免疫功能的药物，新生儿家长均签署知情同意书。两组新生儿性别构成、胎龄、出生体质量相比差异均无统计学意义。

1.2 淋巴细胞免疫分型及外周血免疫球蛋白水平检测 两组新生儿于出生24 h内分别取外周血2 mL，采用流式细胞仪检测淋巴细胞免疫分型和NK细胞比例，采用免疫浊度法测定血清IgG、IgM及IgA。操作按试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。计量资料用±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD法。计数资料比较采用χ2检验。均采用双侧检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.2 IgG、IgM及 IgA水平 HIE组患儿外周血IgM、IgA水平低于对照组(P均＜0.01)，且中重度患儿外周血IgM、IgA水平均低于轻度患儿和对照组(P 均 ＜0.05)。见表2。

3 讨论

神经系统和免疫系统对机体内环境稳定起重要的调节作用，当机体受到内外环境的应激后，免疫系统可以通过细胞因子对神经系统发挥调节作用［5］。近年研究发现，细胞免疫和体液免疫参与HIE发病过程，免疫紊乱是HIE发病的重要原因之一。

本研究结果显示，HIE患儿T淋巴细胞亚群分布有变化，主要表现为CD+3、CD+4细胞水平降低，但差异无统计学意义，这与Wang等［6］研究结果相一致。而刘艳萍等［7］研究发现 HIE患儿 CD3+、CD4+、CD8+细胞比例较正常新生儿均明显减少，且重度HIE患儿下降更明显，CD4+/CD8+值下降。上述研究结果的不一致，可能与样本的选择及样本量的大小有关。此外，本研究也发现不同临床分型的HIE患者病情严重程度与T细胞亚群数量异常的严重程度并不平行，可能更决定于T细胞亚群功能异常。

表1 两组患儿外周血淋巴细胞免疫分型比较(±s)

表1 两组患儿外周血淋巴细胞免疫分型比较(±s)

组别 n CD+3(%) CD+4(%) CD+8(%) CD+4/CD+8 NK细胞(%) B淋巴细胞(%)HIE 组 60 67.30 ±10.16 39.41 ±10.77 23.52 ±8.85 1.98 ±1.23 10.84 ±6.14 20.40 ±10.33轻度 32 67.71 ± 9.56 39.01 ±10.61 23.89 ±8.16 1.95 ±1.37 10.81 ±5.22 19.94 ±10.71中、重度 28 66.83 ±10.97 39.87 ±11.12 23.10 ±9.72 2.01 ±1.07 10.87 ±7.16 20.92 ±10.05对照组 30 68.07 ±11.50 41.28 ±12.43 23.34 ±7.21 1.99 ±1.02 11.23 ±6.33 19.35 ± 7.44

表2 两组患儿外周血IgG、IgM及IgA 水平比较(g/L，±s)

表2 两组患儿外周血IgG、IgM及IgA 水平比较(g/L，±s)

注:与对照组比较，*P ＜0.01;与 HIE 组轻度者比较，#P ＜0.05

组别 n IgG IgM IgA HIE 组 60 10.47 ±3.69 0.77 ±0.36* 0.79 ±0.41*轻度 32 11.03 ±4.14 0.81 ±0.35 0.87 ±0.48中、重度 28 9.84 ±3.07 0.71 ±0.37﹟ 0.70 ±0.29﹟对照组30 11.41 ±3.10 1.61 ±0.60 1.32 ±0.81

NK细胞参与T淋巴细胞与B淋巴细胞的调节，是细胞免疫中的非特异性成分，具有激活和增强重要的抗原递呈细胞树突状细胞的功能。研究发现，HIE患儿的NK细胞活性明显低于正常新生儿，而且与病情程度相关［8，9］。CD19是 B淋巴细胞膜表面标志，B淋巴细胞主要介导体液免疫［10］。本研究结果显示，与对照组相比HIE患儿CD+19细胞比例增高，但差异无统计学意义，可能与本研究样本量小有关。

IgA、IgM不能通过胎盘，因此新生儿体内的IgA、IgM不是由母体获得的，而是在出生后由肠道微生物等抗原刺激，迅速由新生儿免疫系统合成［2］。IgM是分子量最大的Ig，是初次体液免疫应答中最早出现的抗体［5］。在抗感染早期，IgM作用较IgA更为重要［11］。本研究结果显示，HIE患儿外周血IgM、IgA低于对照组，且病情越严重，IgM、IgA水平越低，提示IgM、IgA水平可以作为HIE早期诊断标志物之一，同时还可评估HIE的严重程度，指导临床治疗。总之，新生儿HIE的发生、发展是多因素参与的复杂过程，可能既受到细胞免疫的影响，也有体液免疫的作用，并且两者相互关联，血清免疫球蛋白可以作为HIE早期诊断、评价脑损伤程度及预后的参考指标。

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