新产业化学发光检测PSA的性能评价

李军良，齐曦明，刘洪伟

（1.秦皇岛市第一医院检验科，河北秦皇岛066000；2.秦皇岛市第一医院中心实验室；3.秦皇岛市第一医院急诊科）

新产业化学发光检测PSA的性能评价

李军良＊，齐曦明，刘洪伟

（1.秦皇岛市第一医院检验科，河北秦皇岛066000；2.秦皇岛市第一医院中心实验室；3.秦皇岛市第一医院急诊科）

前列腺癌是老年男性常见的恶性肿瘤，在欧美男性中发病率和死亡率分别高居第一、二位的癌症。我国前列腺癌发病率较低，但近年来呈明显迅速上升的趋势。前列腺特异性抗原（Prostate－specific antigen，PSA）筛查是目前被广泛接受的前列腺癌常规筛检项目。在人群中进行PSA筛查的目的是及早发现前列腺癌，在提高前列腺癌诊断率的同时降低死亡率。前列腺特异性抗原（PSA）的检测是前列腺癌早期筛查和病程监测的主要指标［1］。目前国内检测tPSA的方法有化学发光微粒测定法（CMIA）、电化学发光免疫测定法（ECLIA）、化学发光免疫分析法等。本实验针对目前国产与进口化学发光检测PSA，选择罗氏电化学发光法作为比对试剂，验证新产业化学发光法测定PSA的临床应用的可行性及检测结果的可靠性，进一步了解该试剂盒能否用于临床。

1 材料与方法

1.1 研究对象 收集秦皇岛市第一医院门诊，病房患者标本共124例。

1.2 标本收集 秦皇岛市第一医院住院患者和门诊受检者，真空采血管采集静脉血4ml，3000r／min离心10min，分离出血清作前列腺特异性抗原检测，剩余血清－20℃冻存，以备重复测定。

1.3 仪器与试剂 （1）比对实验方法：①设备：德国罗氏诊断公司Elecsys e601电化学发光检测系统；②试剂：仪器原装配套TPSA试剂，试剂批号171687。方法学是电化学发光免疫测定法（ECLIA），检测范围0.010～100.00ng／ml.（2）评价实验方法：①设备：新产业Maglumi 2000Plus全自动化学发光测定仪；②试剂：仪器原装配套TPSA试剂，试剂批号27130905。评价方法的方法学是化学发光免疫分析法，检测范围0.01～400ng／ml。

1.4 方法 ①计算各项检测指标：以罗氏PSA试剂盒为参比试剂盒，cut－off值为4ng／ml，计算新产业PSA试剂盒相对敏感度、相对特异性、总体符合率和Kappa一致性检验。②相关性及偏倚分析：以罗氏PSA试剂盒作为参比试剂，评估新产业PSA试剂盒的检测结果。两种方法学检测结果绘制散点图，回归分析用一元直线回归分析，偏倚分析用Bland－Altman法。

1.5 统计学分析 采用SPSS19.0统计分析方法P＜0.05表示具有统计学意义。应用Kappa检验判定两种试剂盒间检测结果的一致性，以Kappa值＞0.75表示两者一致性较好。一元直线回归分析计算相关系数（R2），R2＞0.95表示相关性良好。Bland－Atlman法中如绝大多数差值位于一致性界限（¯x±1.96sd）之间，则可认为两种测量结果的差异是可接受的。

2 结果

2.1 相对敏感度、相对特异性、总体符合率结果

新产业PSA试剂盒的相对敏感度为98.64%，相对特异性为92%，与罗氏PSA试剂盒测定结果的总体符合率为95.96%，Kappa值为0.915，两者一致性很好，新产业PSA与罗氏PSA比对结果见表1。

表1 新产业PSA与罗氏PSA 比对结果

2.2 相关性及偏倚分析 剔除9份检测结果超限样本，共选取115份样本，在两种试剂共同的检测范围0～100ng／ml中进行相关性验证。罗氏PSA均值为11.86ng／ml，范围为0～94.05ng／ml；新产业PSA均值为12.71ng／ml，范围为0～91ng／ml。绘制散点图（图1），一元线性相关性分析显示，新产业PSA试剂测定值与罗氏PSA试剂的测定值呈正相关，回归方程Y＝0.306＋1.046 X R2＝0.969 P＜0.05。Bland－Altman分析显示新产业PSA试剂盒与罗氏PSA试剂盒测定值的平均偏倚为－0.8486ng／ml，一致性界限－7.679～5.982ng／ml，除7组数据位于差值外，绝大多数差值都位于一致性界限内，说明两种方法具有较好的一致性（图2）。

图1 两种试验盒测得PSA浓度散点图

图2 两种试验盒测定PSA浓度Bland－Altman图

3 讨论

前列腺特异性抗原成为1992年被FDA批准［2］以来最常用的筛查前列腺癌的肿瘤标志物。其在前列腺癌的早期诊断和治疗监测有了广泛的研究，参考上限4.0ng／ml已被临床广泛接受。PSA是一种由前列腺上皮细胞产生的糖蛋白，相对分子量为30000～34000道尔顿，由含有240个氨基酸的多肽链组成，是一种丝氨酸蛋白酶，具有类似胰蛋白酶和糜蛋白酶的酶活性［3］。目前，我国前列腺癌发病率呈快速上升趋势，彭鹏等［4］研究发现2008年我国前列腺癌新发病例为33 802例，占男性所有恶性肿瘤发病例数的2.1%，居第8位；2008年中国15岁以上成年人前列腺癌5年患病例数为75 535例，占男性所有恶性肿瘤5年患病例数的3.5%，居第7位。韩苏军等［5］调查发现2008年，中国男性前列腺癌死亡率为4.07／10万，0～74岁前列腺癌累积死亡率为0.18%。占中国男性恶性肿瘤死亡构成的1.78%。城市男性前列腺癌死亡率（4.69／10万）约为农村（1.75／10万）的2.7倍。王鑫等［6］在北京50岁以上体检人群中发现随着年龄的增长，PSA水平异常者的比例明显增加，由50～59岁的23例（2.7%）升高至80～89岁的21例（12.8%）。因此筛查PSA具有重要的临床意义。

进口罗氏PSA试剂盒较早上市且已广泛应用于临床，可以溯源［7］到世界卫生组织（WHO）96／670，故以其作为参比试剂对国产新产业试剂进行了相关性、一致性分析。新产业PSA试剂盒与罗氏PSA试剂盒的相对敏感度为98.64%，相对特异性为92%，与罗氏PSA试剂盒测定结果的总体符合率为95.96%，Kappa值为0.915，两者一致性很好。两种试剂相对敏感度、相对特异性和总体符合率都较理想；新产业试剂盒PSA浓度与罗氏试剂盒呈正相关，回归方程Y＝0.306＋1.046X（R2＝0.969，P＜0.05）。本研究发现，除7组数据位于差值外，Bland－Altman偏倚分析显示，绝大多数差值都位于－7.679～5.982ng／ml的一致性界限内，说明两种方法具有较好的一致性，由此说明新产业PSA试剂盒与罗氏PSA试剂盒一致性良好。评价方法新产业化学发光检测PSA与比对方法罗氏电化学发光总体间的符合情况良好。国产新产业化学发光仪器、PSA试剂相对进口化学发光价格便宜，利于临床推广，PSA在两个仪器上相关性好，能够满足临床需要。

［1］Armbruster DA.Prostate－specific antigen：biochemistry，analytical methods，and clinical application［J］.Clinical chemistry，1993，39（2）：181.

［2］Charatan FB.FDA approves test for prostatic cancer［J］.BMJ，1994，309（6955）：628.

［3］Henttu P，Vihko P.Prostate－specific antigen and human glandular kallikrein：two kallikreins of the human prostate［J］.Annals of medicine，1994，26（3）：157.

［4］彭 鹏，龚杨明，鲍萍萍，等.中国2008年前列腺癌发病，死亡和患病情况的估计及预测［J］.中华流行病学杂志，2012，33（10）：1056.

［5］韩苏军，张思维，陈万青，等.中国前列腺癌死亡现状及流行趋势分析［J］.中华泌尿外科杂志，2012，33（011）：836.

［6］王 鑫，刘 明，李 萍，等.北京地区50岁以上体检人群前列腺特异性抗原筛查结果分析［J］.中华泌尿外科杂志，2013，34（006）：462.

［7］Rafferty B，Rigsby P，Rose M，et al.Reference reagents for prostate－specific antigen（PSA）：establishment of the first international standards for free PSA and PSA（90：10）［J］.Clinical chemistry，2000，46（9）：1310.

李军良（1979－）河北省秦皇岛市，本科，主要从事免疫学检验。

2013－06－12）

1007－4287（2014）07－1186－02

＊通讯作者