高效液相色谱法测定复方桔梗麻黄碱糖浆中盐酸麻黄碱的含量

张晓燕，孙 雪

(1.河北省衡水市哈励逊国际和平医院药学部，河北 衡水 053000；2.河北省衡水市食品药品检验检测中心，河北 衡水 053000)

复方桔梗麻黄碱糖浆收载于《国家药品标准地标升国标》第七册，主治咳嗽、多痰，也可用于喘息性支气管炎引起的咳嗽。其主要成分有盐酸麻黄碱、远志流浸膏、紫菀流浸膏、桔梗流浸膏、氯化铵、芳香醑等，其中盐酸麻黄碱为麻黄中主要有效成分。原标准中未设含量测定项，为更好地控制药品的质量，对复方桔梗麻黄碱糖浆中盐酸麻黄碱的含量测定方法进行了研究。经方法学考察及阴性对照试验，结果试验中其他组分对盐酸麻黄碱的测定无干扰，表明该方法简单、准确、可靠、重复性好、专属性强，可作为复方桔梗麻黄碱糖浆的质量控制标准。

1 仪器与试药

AG135型电子天平；PB20型标准酸度计；UV-2401 PC型紫外分光光度计；Agilent 1100型高效液相色谱仪。盐酸麻黄碱对照品(中国食品药品检定研究院，批号为171241-201007，供含量测定用)；复方桔梗麻黄碱糖浆(河北美图制药有限责任公司，批号分别为120302，120407，121205)；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:迪马公司生产的 C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)；流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(10∶90∶0.1)[1]；柱温:30 ℃；流速:1.0 mL/min；检测波长:207 nm；进样量:20 μL。

2.2 溶液制备

精密称取盐酸麻黄碱对照品14.72 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置50 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。

精密量取供试品20 mL，置分液漏斗中，加水10 mL，摇匀，用乙醚液提取 3 次(30，30，30 mL)，合并乙醚液，水浴(50 ℃)蒸干，用10 mL甲醇溶解并转移至50 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，再精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液[2]。取按处方比例并以相同工艺制备的不含盐酸麻黄碱的阴性对照品，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验:在拟订色谱条件下，分别精密吸取2.2项下3种溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。见图1。

线性关系考察:精密称取盐酸麻黄碱对照品14.72 mg，置100 mL容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取 1.0，2.0，3.0，5.0，10.0，20.0 mL，置 50 mL 容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，各取20 μL依法进样，按拟订色谱条件测定，以峰面积(Y)为纵坐标、对照品进样量(X)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=7.71×102X+1.018，r=0.999 8(n=6)。结果表明，盐酸麻黄碱进样量在0.060 0～1.500 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

图1 高效液相色谱图

精密度试验:取同一对照品溶液，按拟订色谱条件依法重复进样5次，按盐酸麻黄碱的峰面积计算。结果的 RSD为0.2%(n=5)，表明仪器精密度良好。

重复性试验:取同一批(批号为120302)样品6份，按2.2项下供试品溶液制备方法，平行制备6份，依法进样测定含量。结果的 RSD为0.6%(n=6)，表明该方法重复性良好。

稳定性试验:将同一供试品溶液于室温下放置 0，2，4，6，8，12 h测定，按盐酸麻黄碱的峰面积计算。结果的 RSD为1.2%(n=6)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

加样回收试验:精密量取供试品20 mL，精密加盐酸麻黄碱对照品适量，按供试品溶液制备方法制备待测溶液，按拟订色谱条件进样测定，并计算回收率。结果见表1。

表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定[3-5]

取3批样品，分别按2.2项下方法制备供试品溶液，按拟订色谱条件依法进样测定，用外标法计算样品中麻黄碱的含量。结果批号为120302，120407，121205的复方桔梗麻黄碱糖浆中每1mL含盐酸麻黄碱 0.35，0.35，0.36mg。

3 讨论

本试验中曾采用了多种流动相，先后用了甲醇-水、甲醇-0.1%磷酸、乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺，经试验比较，以乙腈-0.1%磷酸溶液-三乙胺(10∶90∶0.1)作为流动相，盐酸麻黄碱的峰形好，分离度好，保留时间适中。试验中采用了多种试剂对样品中的麻黄碱进行提取，先后用石油醚、正丁醇、乙醚进行提取，结果表明用乙醚提取完全，并且色谱图的峰形好。用紫外分光光度计测得供试品溶液中的盐酸麻黄碱在207 nm波长处吸收最佳。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:777.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:587.

[3]蔡俊安.高效液相色谱法测定伤风停胶囊中盐酸麻黄碱含量[J].中国药业，2010，19(10):39.

[4]魏 萍.高效液相色谱法测定定喘止咳胶囊中盐酸麻黄碱含量[J].中国药业，2012，21(9):28.

[5]董嘉德，戴德雄，宋 莹.HPLC法测定克咳软胶囊中盐酸麻黄碱[J].中草药，2009，40(12):1 915-1 917.