高效液相色谱法测定七味槟榔散中桂皮醛含量

2014-05-04

中国药业 2014年18期

(青海省海西州食品药品检验所，青海德令哈 817000)

七味槟榔散是根据传统藏药处方生产的藏药制剂，由槟榔、肉桂、干姜、石榴等7味中药组方，具有温肾益肾的功效，用于治疗肾脏疾病。其收载于藏药部颁标准[1]中，原标准无含量测定项。七味槟榔散主要成分为生物碱，其中槟榔碱的提取过程复杂，难以应用到实验室检验中，而方中肉桂的主要成分为桂皮醛，其性质稳定，是质量控制常用的目标物[2-3]。目前，七味槟榔散含量测定方法尚无文献报道。本研究中采用高效液相色谱(HPLC)法测定肉桂中桂皮醛的含量[3]，以控制七味槟榔散的含量。试验结果表明，该方法精密度、稳定性和重复性均能满足要求，对七味槟榔散的质量控制具有重要意义和应用价值。

1 仪器与试药

Agilent 1260型组合式全自动高效液相色谱仪，包括Agilent G1315B DAD型检测器、Agilent G1311C ALS型自动进样器及配套的化学工作站；赛多利斯sartorius BS124S型电子天平、赛多利斯sartorius CP225D型电子天平。桂皮醛对照品(中国食品药品检定研究院，批号为110710-201016，含量为98.6%)；样品3批(青海省海西州蒙藏医医院制剂中心提供，批号分别为20120508，20120621，20120711)；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

精密取桂皮醛对照品适量，加甲醇制成每1 mL含10 μg的溶液，即得对照品溶液。取本品适量混匀，精密称取0.2 g，置100 mL容量瓶中，加甲醇适量超声20 min，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。按处方配制缺桂皮的阴性样品，按供试品溶液制备方法操作，即得阴性对照品溶液。

2.2 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱:Agilent C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)；流动相:乙腈-水(30∶70)；流速:1.0 mL/min；检测波长:290 nm；进样量:10 μL。分别取对照品溶液和供试品溶液，按拟订色谱条件进样分析，结果分离效果较好，按桂皮醛峰计算理论板数在24 000以上。色谱图见图1。

2.3 方法学考察

干扰试验:取2.1项下3种溶液10 μL，注入高效液相色谱仪。阴性对照品溶液色谱中，在与对照品出峰相应保留时间处未出现峰，可见辅料对主成分测定无干扰，说明方法具有专属性，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密吸取对照品溶液 2，4，8，10，12，16，20 μL，按拟订色谱条件进样测定峰面积，以峰面积积分值(Y)为纵坐标、桂皮醛的量(X，μg)为横坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=10 487X-0.062 1，r=1.000 0。结果表明，桂皮醛进样量在0.02～0.10 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。

精密度试验:精密吸取同一对照品溶液10 μL，按拟订色谱条件连续进样6次。结果峰面积平均值为1 143.187 928，RSD=0.33%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性考察:取同一供试品溶液(批号为20120508)10 μL，按拟订色谱条件，分别于0，2，4，8，12 h时进样测定。结果含量的RSD=0.11%(n=5)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

重复性试验:取同一批(批号为20120508)样品，平行制备6份供试品溶液，按拟订色谱条件测定桂皮醛的含量。结果桂皮醛含量的平均值为2.451 mg/g，RSD=0.32%(n=6)，表明该方法测定桂皮醛重复性较好。

回收率试验:取同一批(批号为20120508)样品(桂皮醛含量为2.451 mg/g)，精密称取0.2 g，按拟订方法操作，精密吸取5 mL，共6份，分别置50 mL容量瓶中，精密加入对照品溶液(质量浓度为 11.00 μg/mL)各 5 mL，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，依法测定，计算回收率。结果见表1。