15种薏苡仁中多糖含量测定
2014-05-02杨志清张世鲍张鱼雷何金宝
杨志清,王 硕,张世鲍,张鱼雷,何金宝*
(1.云南农业大学,云南省优势中药材规范化种植工程研究中心,云南 昆明 650201;2.保山市农业科学研究所,云南 保山679100;3.文山州农业科学院,云南 文山 663000)
15种薏苡仁中多糖含量测定
杨志清1,王 硕2,张世鲍3,张鱼雷1,何金宝3*
(1.云南农业大学,云南省优势中药材规范化种植工程研究中心,云南 昆明 650201;2.保山市农业科学研究所,云南 保山679100;3.文山州农业科学院,云南 文山 663000)
薏苡仁是我国传统中药,含有丰富的营养成分和特殊的药用成分,具有多种药理活性。采用回流提取仪提取薏苡仁多糖,以葡萄糖为标准曲线,采用苯酚-硫酸法对15个不同种源薏苡仁中多糖含量进行了测定,结果表明:不同种源薏苡仁中多糖含量存在较大差异,多糖含量最高的为德宏梁河种,达2.3%,最低的为老挝种,只有1.0%,为充分开发利用薏苡资源提供了理论依据。
薏苡仁;多糖;含量测定
薏苡(Coixlacryrna-jobi L.)为禾本科薏苡属(CoixL.)植物,又名米仁、六谷子、苡米、菩提子等,是中国传统药食兼用作物。薏苡仁(Semen Coicis)英文名Coix Seed,性味甘、淡、微寒, 入脾、胃、肺,经常见的中药薏苡仁即为薏苡的成熟种仁,具有健脾利湿、除痹止泻、清热排脓、健胃解痉等功效[1-2]。 薏苡仁含有多种活性成分,如脂类、多糖类、木脂素类、酚类和腺苷等化合物,其中薏苡仁中含有丰富的多糖,具有显著降糖作用[3]。徐梓辉等[4]研究发现,薏苡仁多糖可能有抑制肝糖原分解、肌糖原酵解,抑制糖异生作用,从而达到血糖水平降低的目的。
薏苡属不同种质之间在薏苡仁脂和多糖的含量上存在着显著差异。吕峰等[5]报道不同产地薏苡仁的功能成分含量差异明显,特别是薏苡仁多糖的含量差异极为显著,但对云南不同生境下的薏苡居群的薏苡仁脂和薏苡仁多糖的含量进行系统的比较测定,目前尚未见报道。本研究通过对不同地区薏苡多糖含量的分析比较,为云南薏苡优良品种的选育提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
选取来自老挝、越南、陕西省农科院、中国农科院品质所、广西省农科院及云南的文山、德宏、版纳、普洱、曲靖并保育在文山州农业科学院试验基地的15个薏苡仁种质资源,带回云南农业大学实验室烘干备用。
1.2 试剂与仪器
葡萄糖标准品、苯酚纯品、5%苯酚、浓硫酸。T-6紫外可见分光光度计、回流提取仪。
1.3 葡萄糖标准曲线绘制方法
采用苯酚-硫酸法测定多糖含量[6-7]。先用葡萄糖标准品0.1g置于100mL容量瓶中,加入蒸馏水至刻度(1mg/mL)配制葡萄糖对照品溶液备用;再用葡萄糖对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于100mL容量瓶中,分别加入蒸馏水定容,得标准曲线系列溶液;最后吸取标准曲线系列溶液0.5mL于25mL试管,对照管加入蒸馏水0.5mL,在各管中加入0.5mL的5%苯酚溶液摇匀后,迅速加入浓硫酸3mL,摇匀后置冷水浴中10min,置沸水浴加热16min,然后在冷水浴中冷却10min,再用分光光度计于490nm处测定吸光度,以吸光度(Z)为纵坐标,葡萄糖标准溶液的浓度(C)为横坐标,得葡萄糖标准曲线。
1.4 薏苡仁多糖含量测定方法[7]
2 结果与分析
2.1 葡萄糖标准曲线的绘制
从图1可知,在10~50μg/mL范围内葡萄糖浓度值与回归方程y值及吸光度Z值有线性关系。随着吸光度值(Z)从0.08到0.40不断增大,各个处理的葡萄糖浓度也从10~50μg/mL范围内成线性关系变化。
图1 葡萄糖标准曲线
2.2 不同种源薏苡仁多糖含量比较
由表2可知,15种薏苡仁所得到的吸光度值不同,测定得到的多糖含量也各不相同,吸光度值Z从品种文薏1号的0.142到品种YDL的0.869不断变化,而多糖含量也从老挝品种的最低1.0%到YDL品种的最高2.3%不断变化,但也有些薏苡种类之间薏苡仁的多糖含量比较相似。
由图2方差分析中可以看出,在0.05水平上YDL、德宏种与其它品种差异显著;Y7-1、越南种、Y9-1、版纳种之间差异不明显;Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2号、Y12-2之间差异不明显;老挝种、文薏1号、Y3-6、Y6-2之间差异不明显。在0.01水平上YDL与德宏种差异显著,与其它品种差异极显著;德宏种、Y7-1、越南种、Y9-1、版纳种之间差异不明显;Y8-1、Y-11、YGL-12品系、文薏2号、Y12-2之间差异不明显;老挝种、文薏1号、Y3-6、Y6-2之间差异不明显。
表2 不同种源薏苡仁多糖含量的测定结果
3 讨论
15个不同种源的薏苡仁中的多糖含量存在着一些差异,种子来自于同一地区的薏苡仁多糖含量也存在着差异;不同种源薏苡仁中多糖含量最高的为德宏梁河种(YDL),为2.3%,最低的为老挝种,为1.0%;来自文山地区的4个种源中以文薏2号最高,为1.6%,其它3个相同,为1.1%;来自德宏州的3个种源中以德宏梁河种(YDL)最高,为2.3%,最低的为德宏梁河大广种1.3%。这种差异说明由于每个地方的薏苡经过多年的人工种植,受到各地气候、土壤及栽培方法等的影响,形成了一些各自不同的特征,包括薏苡仁中化学成分的差异,形成了薏苡种质资源的生物多样性[8]。
注:小写字母表示在P<0.05水平差异显著;大写字母表示在P<0.01水平差异极显著。
图2 不同种源薏苡仁多糖含量(%)方差分析
用热水浸提薏苡仁多糖时利用了多糖类化合物水溶性好的特点,经研究表明随着温度的提高多糖得率也逐渐增加,温度为100℃时,多糖得率最高,但在实验过程中采用了75℃的温度提取多糖,多糖提取不完全,可能会影响实验结果。
本实验测定了15个不同种源薏苡仁中多糖的含量,但有资料表明薏苡非种仁部位,如:根、茎、叶中也含有丰富的多糖[9],为了提高薏苡的综合利用效率,需在今后的实验中开展薏苡非种仁部位有效成分研究。
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].2010版.北京:中国医药科技出版社,2010:353-354.
[2] 胡军,金国梁.薏苡仁的营养与药用价值[J].中国食物与营养,2007,13(6):57-58.
[3] KROTO HW,HEATH JR,O’BRIEN S C,et a1.c60:Buekmin-sterfullerene[J].Nature,1985(318):162-163.
[4] 徐梓辉,周世文,陈卫,等.薏苡仁多糖对糖尿病血管并发症大鼠NO及主动脉iNOS基因表达的影响[J].第三军医大学学报,2007,29(17):1673.
[5] 吕峰,杨彩霞,姜艳梅,等.不同产地薏苡仁的保健与加工品质[J].福建农林大学学报:自然科学版,2008,37(4):433.
[6] 董群,郑丽伊,方积年. 改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究[J]. 中国药学杂志,1996,31(9):550 -553.
[7] 王贞,徐增莱,史云云,等.不同居群薏苡生物学与经济学性状分析比较[J].江苏农业科学,2009(2):148-149.
[8] 王硕,张世鲍,何金宝,等.薏苡资源性状的主成分分析和聚类分析[J]. 云南农业大学学报,2013,28(2):157-162.
[9] 刘春兰,周宜君,巴 特.薏苡多糖的提取及其单糖组分的分析[J].中央民族大学学报:自然科学版,2005,14(1):49.
(责任编辑:宋勇刚)
2014-05-27
云南省科技厅基金项目(2011FB055);云南省科技计划项目(2014RE002)
杨志清(1968-),女,云南农业大学副教授,研究方向为药用植物栽培与资源评价。
何金宝(1968-),男,云南省文山州农业科学院高级农艺师,研究方向为杂粮作物品种选育。E-mail:wshejinbao@163.com。
R284
A
1673-2197(2014)19-0025-02