益心舒胶囊中人参皂苷Rg1、Re不同提取方法及总量测定

李雪芹，李美位，陈丽萍

(贵阳市食品药品检验检测中心，贵州 贵阳 550081)



益心舒胶囊中人参皂苷Rg1、Re不同提取方法及总量测定

李雪芹，李美位*，陈丽萍

(贵阳市食品药品检验检测中心，贵州 贵阳 550081)

目的：比较两种不同提取方法对益心舒胶囊中人参皂苷Rg1和Re含量及总量的影响。方法：对照组按《中国药典》2010版提取方法；实验组采用三氯甲烷回流，药渣加入水饱和正丁醇液，密塞，放置过夜，超声处理并过滤，续滤液采用正丁醇饱和氨试液提取3次，正丁醇层液置于蒸发皿加热蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至容量瓶。其中人参皂苷Rg1和Re采用《中国药典》2010版含量测定方法测定。结果：经检测，对照组人参皂苷Rg1含量为0.71mg/g，Re含量为4.29mg/g，Rg1和Re总含量为5.00mg/g；观察组人参皂苷 Rg1含量为0.34mg/g，Re含量为2.33mg/g，Rg1和Re总总量为2.67mg/g。结论：研究表明，与对照组比较，实验组提取过程简单，周期较短，但人参皂苷 Rg1、Re含量及总量均较低，改进提取方法、缩短周期、简化过程、提高提取含量测定结果将是下一步实验研究的方向。

人参皂苷 Rg1；人参皂苷Re；提取方法；含量测定

益心舒胶囊是由人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参等多味中药制成的复方制剂，已收载于《中国药典》2010版第一增补本[1]。该药方以人参为君药，人参主要活性成分为人参皂苷 Rg1、Re，具有益气复脉、活血化瘀、养阴生津的功效，可用于治疗气阴两虚、心悸脉结代、胸闷不舒、胸痛及心绞痛等疾病。本文分别按《中国药典》2010版第一增补本规定和文献报道方法，制成供试液，再采用《中国药典》2010版人参含量测定方法，比较人参皂苷Rg1和Re含量及总量，探究不同提取方法对Rg1和Re的影响。

1 试剂与方法

1.1 仪器

安捷伦Agilent-1260型高效液相色谱仪；KQ5200DE型超声波清洗器； CP225D型电子分析天平(Sartorius，德国)；HH-6型数显恒温水浴锅 (常州谱天仪器有限公司)。

1.2 试剂

人参皂苷Rg1对照品(批号：110703-201128，中国食品药品检定研究院)；人参皂苷Re对照品(批号：110754-201324，中国食品药品检定研究院)；益心舒胶囊 (贵州信邦制药股份有限公司，批号：20131009，规格0.4 g/粒)；乙腈(色谱纯)；水为超纯水；其它试剂均为分析纯。

1.3 方法

1.3.1 对照品溶液制备 精密称取人参皂苷Rg1和Re对照品，分别加甲醇制成0.482 9mg/mL的人参皂苷 Rg1和0.387 5mg /mL的人参皂苷Re对照品溶液。

1.3.2 供试品溶液制备 对照组按《中国药典》2010版提取方法[1]：取30粒益心舒胶囊粉末研细，混匀，精密称取4.0g，置于索氏提取器，加三氯甲烷和乙醚各75 mL，加热回流3h，药渣挥去溶剂，将药渣移入具塞锥形瓶，加2%氢氧化钾甲醇溶液50mL，加热回流1h，放冷滤过，加少量甲醇液洗涤药渣及容器，合并洗液和滤液，蒸干，残渣加50mL水溶解；选用水饱和正丁醇液提取4次(20mL、20mL、10mL、10mL)，合并正丁醇液，先后分别用氨试液、1%磷酸二氢钾溶液、正丁醇饱和水溶液各40mL洗涤，弃去洗涤液，加正丁醇液蒸干，残渣选用甲醇溶解并转移至5mL容量瓶，加甲醇定容，摇匀滤过，取续滤液即得。

实验组按文献报道方法提取[2]：取30粒益心舒胶囊粉末研细，混匀，取约2.0g，置于索氏提取器，加三氯甲烷150mL，85℃加热回流3h，药渣挥去三氯甲烷，将药渣移入具塞锥形瓶，精密加入水饱和正丁醇液50 mL，密塞，静置过夜；超声(功率250W，频率50kHz)处理30 min，滤过，弃初滤液，精密量取续滤液25mL，置于分液漏斗，采用正丁醇饱和氨试液提取3次，每次10mL，弃氨试液，正丁醇液置于蒸发皿加热蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL容量瓶，加甲醇至刻度摇匀，过滤，取续滤液即得。

1.3.3 色谱条件 安捷伦 C18色谱柱(100mm×4.6mm，3.5μm)；流动相：0.1%磷酸溶液-乙腈(82∶18)；体积流量：1.0mL/min；检测波长：203nm，柱温：30℃；进样量：10μL。

2 实验结果

2.1 对照品与样品HLPC色谱

对照品与实验样品的色谱见图1。

图1 对照品与样品HLPC

注：1.人参皂苷Rg1；2.人参皂苷Re。

2.2 样品测定

按《中国药典》2010版第一增补版含量测定方法[1]进行人参皂苷Rg1、Re含量测定，结果见表1和表2。

表1 对照组测定结果 (n=3)

表2 实验组测定结果 (n=3)

经检测，对照组测得Rg1含量为0.71mg/g，RSD含量为0.32%；Re含量为4.29mg/g，RSD为0.41%，Rg1和Re的总量为5.00mg/g。实验组测得人参皂苷 Rg1含量为0.34mg/g，RSD为0.95%；Re含量为2.33mg/g，RSD为1.51%，Rg1和Re的总量为2.67 mg/g。研究表明，对照组Rg1、Re测定含量及总量明显高于实验组。

3 讨论

3.1 流动相选择

预实验选取配制1%磷酸二氢钾-乙腈(80∶20)和1%磷酸二氢钾-乙腈(82∶18)两种流动相，后者条件下可较好分离人参皂苷Rg1和Re峰，峰型对称，且与其它杂质峰完全分离，效果较好。因此，该实验采用1%磷酸二氢钾-乙腈(82∶18)作为流动相。

3.2 不同提取方法比较

对照组采用药典规定方法，有两次回流、七次萃取环节，耗时长，过程多，较为复杂，在萃取过程中常萃取不完全，而且容易乳化，尤其是用氨试液如果不是新鲜配制时，乳化现象更加严重；实验组文献报道的方法，有一次回流、一次超声和三次萃取，耗时相对较短，操作步骤相对简单,取样量小。

4 结论

对照组采用药典方法提取较完全，测得含量值明显高于试验组，但该方法较繁琐，过程多，周期长。实验组采用文献报道方法相对简单，过程较少，周期较短；由于复方制剂益心舒胶囊处方组成大，成分复杂，提取不完全，故含量结果偏低。因此，改进提取方法、缩短周期、简化过程、提高提取含量测定结果将是下一步实验研究方向。

[1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：220.

[2] 肖飞 ,李卫民,李其凤.益心舒胶囊质量标准[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(20):87.

(责任编辑：李岚春)

2014-07-14

李雪芹(1976-)，女，贵州省贵阳市食品药品检验检测中心助理工程师，研究方向为食品、药品检验。

李美位(1988-)，男，研究方向为食品、药品检验。

R286

A

1673-2197(2014)22-0012-02