不同厂家不同品种禽流感灭活疫苗免疫效果评价

韩庆安等

高致病性禽流感对养禽业的危害非常严重，世界动物卫生组织（OIE）将高致病性禽流感列为必须报告的动物传染病和A类传染病，我国将其列为一类动物疫病。为了有效预防和控制禽流感，减少对养禽业的危害，我国对高致病性禽流感实行强制免疫政策。为了解不同厂家禽流感疫苗的免疫效果，为禽流感疫苗的选择提供参考，2012年5-12月份，对当年中标的9个厂家生产3种不同类型14个批次禽流感疫苗进行免疫效果的比对试验。现将试验结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 试验用疫苗

禽流感灭活疫苗共分三种类型，其中重组禽流感H5N1（Re-4+Re-6株）二价灭活疫苗7个批次、重组禽流感H5N1（Re-6株）单价灭活疫苗5个批次、H5（Re-6株）+H9亚型禽流感二联灭活疫苗2个批次。

1.1.2 实验动物

保定某规模蛋鸡场，整栋2000只120日龄海兰褐鸡群，按照饲养笼，随机分成14个实验组，每个实验组试验鸡100～200只。该栋鸡群分别于10日龄和38日龄注射重组禽流感H5N1（Re-4+Re-6株）二价灭活疫苗各1次，剂量分别为0.3 mL/只和0.5 mL/只；75日龄注射禽流感H5（Re-6株）+H9二联灭活苗1次，剂量为0.5 mL/只，现产蛋率为20%，鸡群健康状况良好。

1.1.3 主要试剂

H5亚型禽流感Re-4株、Re-6株HI标准抗原以及相应的标准阳性血清，H9亚型禽流感HI标准抗原以及相应的标准阳性血清均购于国家禽流感参考实验室。

1.2 方法

1.2.1 疫苗样品的准备

疫苗样品从我单位疫苗供应科随机抽取14个批次中标产品，编号后进行免疫效果试验。其中7个批次不同厂家重组禽流感H5N1（Re-4+Re-6株）二价灭活疫苗编号为A1、B1、C1、D1、E1、F1和G1（批次号分别为：2012009、2012057、2013036、2012048、2011079、2012039和2012024），5个批次不同厂家重组禽流感H5N1（Re-6株单价灭活疫苗编号为C2、E2、G2、H2和I2（批次号分别为：2012018、2012034、2012004、2012016和20120403），2个批次不同厂家禽流感H5（Re-6株）+H9亚型禽流感二联灭活疫苗编号为B3和F3（批次号分别为2012014和2012018）。

1.2.2 免疫程序

每实验组随机选用一种疫苗进行免疫，剂量0.5 mL/只。

1.2.3 实验方案

在分组前从整个鸡群中随机抽取30枚鸡蛋进行禽流感抗体检测，了解当前抗体水平。免疫后每隔1个月每组随机收集鸡蛋20～30枚，进行卵黄禽流感抗体检测，直至群体免疫抗体合格率低于国家规定的标准为止。

1.2.4 检测及结果判定方法

检测方法按照国标《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2003）中血凝和血凝抑制试验（HA-HI）进行，结果判定方法按照《蛋禽H5亚型禽流感免疫抗体卵黄检测技术规程》（DB 13/946-2008）规定方法进行。

2 结果

2.1 母源抗体水平

对30枚120日龄鸡群的鸡蛋进行禽流感H5N1（Re-4株）、禽流感H5N1（Re-6株）和禽流感H9亚型免疫抗体检测，结果抗体水平范围介于（3～6）lg2之间，其中H5亚型Re-4株禽流感群体免疫抗体合格率为63.33%，H5亚型Re-6株禽流感群体免疫抗体合格率为53.33%，H9亚型禽流感群体免疫抗体合格率为56.66%，均低于国家规定的标准。

2.2 疫苗免疫结果

双价疫苗免疫效果见图1和图2，单价疫苗免疫效果见图3，二联疫苗免疫效果见图4和图5。

3 小结与讨论

从图1和图2可以看出，7个不同厂家的高致病性禽流感重组二价疫苗免疫1个月后抗体效价基本上均达到峰值，然后逐步缓慢下降，到5～7个月后免疫抗体群体合格率低于国家规定的标准（70%）。总体分析，尽管禽流感H5N1（Re-4株）免疫抗体效价相对要高于H5N1（Re-6株），但7个厂家疫苗中H5N1 Re-4株和Re-6株病毒含量配比还是比较合理的，它们的免疫抗体保护期均比较一致（只有C1疫苗两个不同重组毒株免疫抗体保护期有所不同，其中H5N1 Re-4株免疫抗体保护期均为5个月，而H5N1 Re-6株免疫抗体保护期为6个月）。从免疫保护期长短分析，A1疫苗质量最好，两个不同重组毒株免疫抗体保护期均为7个月，其次是D1和G1，两个不同重组毒株免疫抗体保护期均为6个月。

图3结果显示，5个不同厂家的H5N1（Re-6株）免疫抗体值和免疫抗体保护期均相差不大，同图2结果比较可以看出，单苗无论是在免疫抗体值方面，还是在免疫保护期方面，均好于联苗，这可能与疫苗中毒株的有效含量配比有关。

图4和图5的结果表明，两个厂家的H5+H9二联灭活疫苗中H9亚型禽流感的免疫效果要好于H5亚型禽流感的免疫效果。

在对不同厂家不同品种禽流感疫苗免疫效果进行统计分析的同时，我们也对抗体值进行离散度分析。结果发现，A1、B1、D1、G1、C2、G2、H2、B3和F3疫苗免疫抗体值整齐度较好，离散度相对较低，均低于40%；保护期中段抗体值离散度明显低于保护期前段和后端，尤其是后端。当群体免疫抗体合格率接近或低于70%时，其离散度值偏高，有的甚至超过80%。所以，养鸡场使用上述免疫抗体保护期为5个月的疫苗对产蛋鸡群进行免疫时，我们建议其免疫间隔期为4个月。

本次比对试验的开展，摸清了2012年部分禽流感疫苗质量，确保了使用这些厂生产的疫苗的养鸡场鸡群的免疫效果，促进了疫苗厂家对其产品质量的重视，同时为以后的禽流感疫苗的选择提供了参考。

（编辑：郭远）