DC—CIK细胞治疗148例老年恶性肿瘤的疗效观察

耿奇 李秀萍 张平

【摘 要】目的：探讨DC-CIK联合培养治疗不能手术、不能化疗的老年晚期恶性肿瘤患者的临床疗效观察。方法：观察148例临床确诊为恶性肿瘤的老年患者的肿瘤标记物、免疫指标和KPS评分的变化。 结果：DC-CIK治疗后，肿瘤标记物CEA和CA125 降低，CD3+、 CD4+、CD8+的指标都有显著提高（P<0.05），KPS评分不同程度的提高。结论：DC-CIK细胞治疗不能手术、化疗的老年晚期恶性肿瘤患者临床疗效好，改善患者的生活质量，提高患者的生存期。

【关键字】免疫治疗；树突状细胞；CIK；老年人；恶性肿瘤；疗效

【中图分类号】R73 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0565-01

随着我国人口的老年化，老年恶性肿瘤的发病率和死亡率逐年上升。大部分老年患者由于年纪、身体状况和合并各种基础病等原因而不能化疗、手术等治疗。随着分子生物学和细胞免疫学的发展，生物免疫疗法已成为肿瘤治疗的重要方法[1]，其中，CIK细胞联合DC细胞治疗恶性肿瘤，提高患者免疫功能的同时，有协同抗肿瘤的作用[2]。2011年12月～2012年10月148例晚期恶性肿瘤老年患者在我院接受DC-CIK治疗，报告如下：

1 材料与方法

1.1临床材料

经病理学或细胞学确诊的癌症患者148例，男性92例，女性56例。肺癌60例，乳腺癌20例，结肠癌15例，膀胱癌10例，前列腺癌8例，胃癌6例，肝癌5例，食道癌5例，胰腺癌5例，宫颈癌5例，卵巢癌3例，肾癌3例，黑色素瘤3例。患者入选标准：年龄大于60岁； 病理组织学、影像学或细胞学等检查确诊为肿瘤患者；生活自理，KPS评分标准50分以上；预计生存期至少大于3个月；签署知情同意书。

1.2 方法

采外周血：采血前对患者进行血常规检查，淋巴细胞与单核细胞的总数≥1×109/L。如不符合此标准，需采用GM-CSF进行刺激造血系统后，采血量为50-60ml，采血前晚患者进食清淡饮食。

DC-CIK分离与体外诱导：将采集的外周血加入葡聚糖梯度离心进行单个核细胞分离，采用虹吸的方式吸出单个核细胞细胞，用含有自体血清、细胞因子和硫酸庆大霉素的1640培养基悬浮，并转移至75ml的培养瓶内，置于37℃的二氧化碳培养箱中培养。每2天半量换培养液和观察生长情况，并取培养液送到检验科微生物是进行微生物检测，若发现污染立即停止细胞培养，检测细胞的CD3+、CD4+、CD8+、分子标记表达水平，要求CD3阳性率大于90% ，CD3/CD8大于 60%，台盼蓝染色计算细胞活力大于85% ； 收集DC-CIK 细胞，注入100ml生理盐水输液袋中。

DC-CIK回输：一般采血后的8～14天开始首次回输，间隔一天，分4次静脉回输完毕。回输过程如有不适，及时处理症状。

观察指标：由于部分患者因个人原因致无法了解肿瘤体积变化，主要通过观察患者的肿瘤标志物、免疫指标、生存质量、不良反应、临床症状、食欲、体重等判断疗效。其中临床症状、生存质量、不良反应以患者主诉为依据。

1.3 免疫学相关指标及肿瘤标记物检测

抽取患者治疗前1周和治疗结束3天后的外周血，用流式细胞仪检测T细胞亚群（包括CD3+、CD4+、CD8+、 CD4+/CD8+），治疗前1周、治疗后1月检测肿瘤标记物。

1.4 疗效判定

生活质量：采用Karnofsky评分标准，提高20分以上为显效；提高10-20 分为有效；提高10分以下至下降10分以内为稳定；下降10分以上为恶化。

疗效评价：病灶完全缓解（CR），病灶部分缓解（PR），病灶稳定（SD），病灶进展（PD）

毒副作用：根据《急性和亚急性毒性反应的表现和分度标（ WHO标准） 评价化疗毒副反应。

1.5 统计学处理

数据以均值±方差表示，采用SPSS17.0 统计软件进行均值比较的方差分析，两两比较采用t检验，概率的比较采用 x2检验，P<0.05表示差异有统计学上意义。

2 结果

2.1 DC-CIK细胞治疗前后肿瘤标记物的检测

检测148例患者的DC-CIK细胞治疗前后的肿瘤标记物癌胚抗原（CEA）和CA125的改变情况：148例中96例下降；39例无变化；13例升高。下降率64.9%

2.2 DC-CIK细胞治疗前后免疫系统的影响

148例患者平均接受了细胞回输，治疗后均表现精神状态良好，治疗前后前后患者免疫系统相关指标如表2所示，治疗前后患者的外周血中CD3 +、CD4+、 CD8+细胞均有明显的上升（P<0.05）

2.3 治疗前后患者疗效评估

对148例患者进行回访，治疗后有110例卡式评分提高10-30分，有29例无变化，有9例下降。92例体重增加，占62.2%。说明治疗后患者的生活质量得以提高和改善，其中，病情部分缓解的有（PR）82例，影像学检验发现病灶缩小明显，情况，病情平稳（SD）的有42例，没有新的病灶转移，病情进展（PD）有24例。

2.4生存期： 例患者DC-CIK细胞治疗后1年生存期为，2年为。随访2年的生存期见表3.

2.5 不良反应：148例患者中有18例出現发热均在输后1小时内出现，持续不超过3小时，除有3例体温达38℃，退热处理后缓解。其余患者回输后无不良反应。

3 讨论

老年肿瘤患者身体机能差、器官功能退化、免疫功能下降，常常同事合并多个系统基础疾病，导致对手术、化疗等的耐受性差。CIK细胞是细胞因子诱导培养获得的T淋巴细胞，具有在体外快速增殖、非MHC限制的杀瘤活性，广泛用于各种抗肿瘤治疗[3]。DC细胞是人体功能强大的抗原递呈细胞，在机体预防外来病原均感染和肿瘤发生起重要作用。肿瘤患者体内的DC细胞未能发育成熟能识别抗原但不具有递呈能力的细胞，所以在体外诱导成熟后回输给患者，从而启动抗原递呈而发挥免疫效应，以防肿瘤细胞的逃逸。

有文献报道[4] DC细胞和CIK细胞共同培养比CIK单独培养杀瘤活性更强，且大大缩短培养时间。本研究采用DC细胞和CIK细胞联合细胞治疗148例老年晚期恶性肿瘤患者，并观察患者治疗前后的肿瘤标记物和免疫系统的变化规律，分析治疗效果，评估期安全性。

从 DC-CIK细胞治疗对患者的肿瘤标记物和免疫系统的影响来看，治疗前后肿瘤标志物下降64.9%，免疫细胞数量提高明显（P<0.05）。免疫球蛋白和相关细胞因子在免疫系统中也起着重要作用，在免功能变化评估中，本研究没有进行免疫球蛋白和相关细胞因子的检测，在以后的工作中会逐步开展。

通过疗效观察，回访时患者治疗后精神状态佳，自我感觉良好。DC-CIK细胞治疗后KPS评分提高的患者达到84.3%。综上所述，DC-CIK细胞联合治疗恶性肿瘤具有广泛的应用前景，目前，DC-CIK细胞治疗已经取得较好的临床治疗效果，毒副作用低，安全性好，预防和减少恶性肿瘤的转移和复发，为一些对手术、放疗、化疗已无适应症的患者提供了一种提高免疫功能，缓解和减轻临床症状，改善生活质量和延长患者生命的新途徑 [5]。

参考文献：

[1] DeVita VT. Rosenberg SA. Two hundred years of cancer research[J].N Engl J Med.2012.366（23）：2207-2214

[2] Sangiolo D， Mesiano G， Carneval E-Schianca F， et al . Cytokine induced killer cells as adoptive immunotherapy strategy to augment graft versus tumor after hematopoietic cell transplantation. Expert Opin Biol Ther， 2009， 9： 831–840.

[3] Olioso P， GiancolA R， Di Riti M， et al . Immunotherapy with cytokine induced killer cells in solid and hematopoietic tumours： a pilot clinical trial. Hematol Oncol， 2009， 27： 130–139.

[4] Tao Yang， Ying Xiang， Yucheng Li，et al. Clinical study of co-treatment with DC-CIK cells for advanced solid carcinomas*. J Clinical Oncology（Chinese-German）2011， 10：354–359

[5] Zhong GC， Zhang XY， SunY，et al.Autologous tumor antibody-pulsed dendritic cells combined with cytokine -induced killer cells in the clini-cal treatment of lung adenocarcinoma. Tumor （Chinese）， 2010， 5： 395–400.