乙肝病毒检测技术分析
2014-04-29黄海萍
黄海萍
【摘 要】现代医学认为,乙肝是严重威胁人体健康的一种世界性传染病,其发病率和死亡率较高。乙肝病毒是导致患乙肝病症的病毒,主要是通过血液、母婴和性接触进行传播现代医疗技术条件下,针对乙肝病毒进行技术检测是预防和控制乙肝病毒的重要途径。
【关键词】乙肝病毒肝炎、检测技术
【中图分类号】R81 【文献标识码】B 【文章编号】004-7484(2014)04-2571-01
近年来,由于人类生活环境的恶化,导致威胁人类健康的疾病呈多样化趋势。乙肝病毒性肝炎,作为严重侵害人类健康的传染病,是由乙肝病毒引起的重要顽症,危害性极大。随着现代医疗技术的不断进步,针对乙肝病毒的实验室检测方法发展较快,为乙型肝炎的诊断、治疗和深入研究提供了重要依据。本文针对乙型肝炎疾病的病理特征,对乙型肝炎病毒的检测技术进行了分析。
1 乙型病毒性肝炎
乙型病毒性肝炎,又称乙肝,是由乙肝病毒引起的,以肝脏炎症性病变为主的,可引发人体多种器官功能损坏的一种传言性疾病。本病主要通过血液、母婴和性接触等途径传播,主要侵犯儿童和青壮年人群,其症状表现为全身乏力,呕心呕吐,食欲减退、肝大厌油以及肝功能异常,部分病例伴有黄疸和发热现象。少数病例病程发展为肝硬化和肝癌。
乙型病毒性肝炎的特点为发病迟缓,以慢性型肝炎较为常见,也有很多乙肝病毒携带者无明显症状表现。乙肝没有固定流行期,散发型发病率高,传染性强,已成为严重威胁人类生命与健康的世界性传染病。
乙肝病毒分析
乙肝病毒也叫乙型肝炎病毒,是指引起人类感染急性或慢性肝炎的病毒,它是一种专一的嗜肝性DNA病毒,其传染性强,人体一旦感染上乙肝病毒,肝脏就会发生炎性病变,肝细胞受损,对人体造成极大地伤害。
乙肝病毒基因组长3.2kb,为部分双链环状DNA,完整的乙肝病毒体型呈颗粒状,直径为42纳米,颗粒分为外壳和核心两部分。乙肝病毒对外界的抵抗力较强,于37度下抗原性稳定,但在高温或高压环境下均可杀灭。
2 乙肝病毒的检测内容
3 乙肝病毒DNA检测是判断乙肝病毒复制的常用手段。乙肝病毒的DNA为乙肝病毒的主要成分,具有传染性和复制性。临床上可操纵斑点杂交法和聚合酶链反应法从被浸染者的血液中检测到它。
传统的乙肝病毒检测包括“乙肝两对半”和“肝功能”检测,乙肝病毒DNA检测可检测血清中乙型肝炎病毒在体内的含量,成为临床调节疗效剖断的依据。
4 乙肝病毒的检测技术
4.1 免疫学检測技术:免疫学检测技术主要是检测乙肝病毒感染过程中产生的抗原抗体免疫标记物。临床上常用的免疫学检测方法有如下方法:
4.1.1 免疫荧光法:免疫荧光法是利用化学方法使荧光素标记抗体、抗原与组织细胞相应抗原抗体结合,通过荧光素荧光颜色、强度大小进行定位检测抗原或抗体方法。近年来改进的时间分辨荧光免疫分析法,灵敏度高、稳定性好,结果准确,成为乙肝免疫标记物检测的新技术。
4.1.2 免疫法:酶免疫法是以固相酶免疫法的酶联免疫吸附试验为主,将抗原抗体反应的特异性与酶对底物的高效催化作用结合起来,根据酶作用底物后显色,以颜色变化判断结果,此技术无放射性污染,不需昂贵的测试仪器,推广较快。
4.1.3 固相放射免疫法:固相放射免疫法是利用放射性同位素碘125和131作为标记物,标记抗原、抗体与相应抗体、抗原结合,通过测定抗原抗体结合物的放射性活性判断结果。此法灵敏度高、特异性强、精度高,可进行超微量分析,临床上可用于检测抗原或抗体。
4.1.4 金标免疫技术:又称胶体金免疫层析测定法,是以胶体金作为标记物,以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔膜毛细管作用,使膜条测试端的标本慢慢向另一端渗移,在移动过程中发生抗原抗体结合反应。具有简便、快速、可单份操作的优点,适用于急诊检验需要。
4.2 分子生物学检测技术:乙肝病毒持续感染过程中往往会发生病毒变异情况,从基因水平上的HBV-DNA检测,则更能准确表明它的复制情况。
4.2.1 核酸探针法:乙型肝炎病毒的核酸探针有DNA探针和RNA探针两种。是指核酸分子杂交基于其组成的的碱基可通过配对互补结合,带有标记物的DNA和RNA片段能与互补的核酸序列特异结合,核酸探针标记可用放射性同位素、生物素、地高辛等物质标记。
4.2.2 基因芯片技术:基因芯片技术是将大量特定寡核苷酸或基因片段作为探针,有规律的高密度固定排列在硅片、玻片上,然后与待检荧光标样品核酸根据碱基配对原则杂交,经洗涤后检测信号强度,由计算机分析处理相关数据,获取生物信息。
4.2.3 PCR扩增技术:PCR扩增是一种体外基因扩增技术,经过变性-退火-延伸等循环处理合成DNA片段,经电泳-溴化乙啶染色-紫外线灯下观察结果。在传统的PCR扩增体系中加入双荧光标记寡核苷酸探针,通过荧光定量PCR仪检测荧光强度,运用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA
5 结束语
总之,乙型病毒性肝炎是严重威胁现代人类生命和健康的疑难性传染病症,乙肝病毒是引发乙肝疾病的根源。现代医疗技术条件下,优化技术资源,针对乙肝病毒进行更有效的实验室监测分析,对临床诊断治疗合理用药和判断预后具有重要意义。