两种藏锦鸡儿中总黄酮的含量测定

2014-04-27张幸福

亚太传统医药 2014年9期

关键词：锦鸡儿中总芦丁

张幸福

(青海省食品药品检验所，西宁 810016)

两种藏锦鸡儿中总黄酮的含量测定

张幸福

(青海省食品药品检验所，西宁 810016)

目的：建立二种藏锦鸡儿(鬼箭锦鸡儿和昌都锦鸡儿)的定量测定方法。方法：采用紫外-分光光度法对其总黄酮进行含量测定。结果：线性回归方程为Y=0.014X-0.010 9，相关系数r=1.000 0。结论：所建立的方法可为藏锦鸡儿中总黄酮的含量测定提供参考。

鬼箭锦鸡儿；昌都锦鸡儿；芦丁；总黄酮；紫外分光光度法

藏锦鸡儿为豆科植物鬼箭锦鸡儿Caraganajubata(pall.)Poir.及昌都锦鸡儿(Caraganachangduensisfiauf)的木部心材，具破血、化瘀、降压功效[1-2]。黄酮类化合物是藏锦鸡儿中的药效学成分[3-5]。本研究在文献 [6-8]基础上减少样品的取样量，缩短处理时间，以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定了总黄酮的含量。研究结果可为藏锦鸡儿的质量控制提供参考。

1 仪器与试药

岛津紫外分光光度计(UV-2450)，OHAUS AR5120电子天平(奥豪斯公司)，HANGPING FA1004电子天平(上海天平仪器厂)，KQ5200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

液相用甲醇、乙腈均为色谱纯，水为蒸馏水的超纯水；其余试剂为分析纯(市售)。芦丁对照品(批号100080-200707，供含量测定，使用前不需干燥处理，供UV法测定，纯度为92.5%，购于中国药品生物制品检定研究院)。收集藏锦鸡儿药材共10批，经青海省食品药品检验所骆桂法主任鉴定为鬼箭锦鸡儿及昌都锦鸡儿的木部心材。见表1。

表1 藏锦鸡儿样品来源

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备

取芦丁对照品适量，精密称定，加75%乙醇使溶解，制成含芦丁0.238 9 mg·mL-1的溶液 (必要时超声处理或置水浴上微热使溶解)。

2.2 供试品溶液的制备

取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%乙醇50mL，密塞，称定重量，放置30分钟，置水浴上加热回流1h，放冷，用75%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得，备用。

2.3 标准曲线的制备

精密量取芦丁对照品溶液1mL、2mL、4mL、6mL、8mL与10mL，分别置50mL 量瓶中，各加75%乙醇至10mL，摇匀，加5%亚硝酸钠溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液1.5mL，摇匀，放置6min，再加10%氢氧化钠溶液10mL，加75%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，放置15min，以相应的试剂为空白，采用紫外-可见分光光度法，在510nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。其线性方程为:Y=0.014X- 0.010 9，相关系数r=1.000 0。

2.4 精密度试验

取芦丁对照品溶液，按“2.3”项条件处理，连续6次测定其吸光度A值，结果吸光度的RSD为0.1%，表明仪器精密度良好。

2.5 重复性试验

分别精密称取样品(7号)0.5 g，共6份，按“2. 3”项下方法操作制备供试品备用溶液，然后精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法测定吸光度，计算含量，结果总黄酮的平均含量为7.83%，RSD为1.8%，表明本方法重复性好。

2.6 稳定性试验

取供试品溶液(7号)，分别在0、5、10、20、30、40、50min依法测定吸光度，结果表明样品溶液在50min内稳定，吸光度的RSD为1.5%。

2.7 回收率试验

取芦丁对照品约20～25mg，扣除纯度，共6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，每瓶中再精密称取已知含量的锦鸡儿样品(7号样品，含量为7.823 7%)0.25g，依次精密加入75%乙醇50mL，密塞，称定重量，放置30min，置水浴上加热回流1h，放冷，用75%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2.0mL，置50mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的量，计算回收率，平均回收率为100.4%，RSD=2.6%。

2.8 样品测定

取藏锦鸡儿样品，按“2.2”项下方法制备供试品备用溶液，精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的量，计算，结果见表2。

表2 样品中总黄酮含量 (%)

3 讨论

取芦丁对照品溶液依法显色并测定溶液的紫外光谱，结果该溶液在510nm处有最大吸光度值，故选择510nm作为紫外-分光光度法的检测波长。经考察，10%氢氧化钠溶液的用量为10mL，10%硝酸铝溶液用量为1.5mL时，测得的吸光度值最佳。分别在室温、20℃、35℃时测定溶液的吸光度值，结果表明温度对测定无影响，所以选择室温下进行测定。

该研究所建立的方法取样方便，处理简单，可为藏锦鸡儿的质量控制提供参考。

[1] 卫生部药典委员会.卫生部药品标准[S] .藏药第一册.1995:136.

[2] 青海省卫生厅.青海省藏药标准[S].1992:42.

[3] 宋萍,李小娟,贾岩岩.鬼箭锦鸡儿化学成分的研究[J].中成药,2011(11):1934-1936.

[4] 宋萍,杨新洲,于军.鬼箭锦鸡儿中紫檀烷类化合物抗真菌活性研究(英文)[J].中国现代应用药学,2009(9):691-694.

[5] 宋萍,马欢,田娅.藏药鬼箭锦鸡儿化学成分及药理作用的研究进展[J].中国药物与临床,2009(12):1149-1151.

[6] 郑敏燕,魏永生. 藏锦鸡儿原药材中总黄酮含量的初步测定[J].青海大学学报：自然科学版,2001(5):10-11，14.

[7] 宋萍,李存仁,于军.分光光度法测定藏药鬼箭锦鸡儿中总黄酮的含量[J].时珍国医国药,2008(9):2076-2077.

[8] 魏永生.正交试验法研究藏药鬼箭锦鸡儿总黄酮含量[J]. 咸阳师范学院学报,2005(2):27-29.

(责任编辑：宋勇刚)

2014-01-06

国家药品标准提高项目(民族药N0.427)