北柴胡醋制前后对抑郁症小鼠脑内DA和NE含量的影响

王丽娜，汪 巍，贾天柱,2

(1.辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600；2.辽宁省炮制工程中心， 辽宁 大连 116600)



北柴胡醋制前后对抑郁症小鼠脑内DA和NE含量的影响

王丽娜1，汪 巍1，贾天柱1,2

(1.辽宁中医药大学 药学院，辽宁 大连 116600；2.辽宁省炮制工程中心， 辽宁 大连 116600)

目的：通过比较柴胡醋制前后对抑郁症小鼠脑内DA、NE的影响，探讨柴胡疏肝解郁作用机制。方法：ELISA法测定抑郁症模型小鼠脑内DA和NE的含量。结果：柴胡可使抑郁症小鼠脑内NE、DA含量明显增加，且醋柴胡作用强于生柴胡，纳入复方逍遥散后，可增强此作用。结论：柴胡与醋柴胡均具有抗抑郁作用，作用机理可能与其增加脑内单胺类递质NE、DA含量有关。

北柴胡；抗抑郁；多巴胺；去甲肾上腺素

柴胡具有疏散退热、疏肝解郁、升举阳气之功效，尤长于情志不舒、郁怒忧思等肝气郁结证，临床用于治疗精神分裂症及抑郁症等神志性疾病[1-3]。传统认为醋制可增强柴胡疏肝解郁作用，如柴胡疏肝散(《景岳全书》)、逍遥散(《处方集》)等方均用醋柴胡。

抑郁症与脑内儿茶酚胺类物质失调有关，包括5-羟色胺、5-羟吲哚、去甲肾上腺素和多巴胺等，是一类调节机体生理活动的重要物质，这些物质在脑内的含量可反映神经系统功能变化。本实验以小鼠脑内DA、NE为指标，探讨柴胡治疗抑郁症的作用机制，同时将柴胡与醋柴胡纳入复方比较醋制前后作用的差异。

1 材料

1.1 药品

柴胡：购于辽宁正大祥和药业集团有限公司，批号：201105245，产地辽宁，经辽宁中医药大学药学院鉴定教研室翟延君教授鉴定为柴胡(BupleurumChinense DC.)；醋柴胡为生柴胡加入定量米醋(每 100 kg用米醋20 kg)拌匀，稍焖润，待醋被吸尽后，置炒制容器内，用文火加热，炒干，取出晾冷[4]。样品：分别将生柴胡、醋柴胡水煎煮后浓缩至每mL折合生药1g，备用。

自制逍遥散：柴胡(生或醋制)15g，当归15g，白芍15g，白术15g，茯苓15g，生姜15g，薄荷6g，甘草6g，上述八味药混合粉碎，备用。临用前配置成每毫升折合生药1.5g的混悬液。

小鼠多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、ELISA试剂盒购于上海研域商贸有限公司。

1.2 仪器

FSH-2电动匀浆器(江苏佳美)， Multiskan Mk3酶标仪 (Thermo，国产)。

1.3 动物

BACL小鼠40只，体重(18±2)g，购于大连医科大学实验动物中心，清洁级(CL)。

2 方法与结果

2.1 动物造模方法

小鼠随机分为正常组、模型组、柴胡组、醋柴胡组、生柴胡逍遥散组和醋柴胡逍遥散组，每组6～7只。采用慢性温和不可预知应激(chronicunpredictable mild stress，CUMS)结合利血平给药造模。CUMS抑郁模型组按照文献[5-6]略加改进，将30min行为限制、4℃冰水游泳5min、停水24h、停食24h、夹尾1min、明暗颠倒24h、摇晃5min(160 Hz)、40℃环境5min、噪音5min等9种刺激随机安排到3周内，每天1种，使动物不能预料刺激的发生。正常对照组不予干预。造模 1周后灌胃给药，剂量为1mL/20g体重，空白组给予等剂量生理盐水。造模2周后，除正常组外各组动物腹腔注射利血平0.25mg/kg，每日1次，连续1周。造模 3周。

2.2 小鼠悬尾实验 (tail suspension test)

末次给药后，参照文献[7]将小鼠尾部固定头向下悬挂，测定6min内小鼠不动的时间，比较各组差异。结果见表1。

2.3 ELISA法测定小鼠脑内DA和NE

表1 对抑郁症小鼠不动时间、脑内DA和NE含量的影响 ±s)

注：与正常组比较，1)P<0.05；与模型组比较，2)P<0.05。

柴胡和醋柴胡均可缩短小鼠不动时间，说明柴胡与醋柴胡均具有抗抑郁作用。柴胡可使小鼠脑内NE、DA含量明显增加，且醋柴胡作用强于生柴胡，纳入复方逍遥散后，可增强此作用，推测柴胡治疗抑郁症的作用机理可能与其增加脑内单胺类递质NE、DA含量有关。

3 讨论

抑郁症属中医“郁证”范畴。中医认为，郁证是由于情志不舒、气机郁滞所引起的一类病症，表现为心情抑郁、情绪不宁、胁肋胀痛或易怒善哭，以及咽中如有异物、失眠等症状。抑郁症的病机是情志所伤、肝气郁结逐渐引起五脏气机不和所致，特别是肝、脾、心三脏受累以及气血失调而成。郁证的治疗原则为理气开郁、调畅气机、怡情易性，以达到解郁安神，调理体内阴阳平衡，最终改变患者心境。

悬尾实验作为行为绝望模型具有简单、快速、敏感等特点，常用于抗抑郁药物的快速筛选[9]。悬尾小鼠为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一定时间后，出现间断性不动，显示“绝望”状态，多数抗抑郁药可有效缩短小鼠的不动时间[8]。本实验结果提示：模型组小鼠的不动时间明显长于正常组，说明造模成功，通过给药可缩短小鼠的不动时间，说明柴胡与醋柴胡均有一定抗抑郁作用。

抑郁症与脑内儿茶酚胺类物质失调有关。多巴胺(dopamine,DA)控制着认知、情感、摄食和内分泌调节等许多功能。NE合成减少可引发抑郁症及其相关症状，后者包括嗜睡、精神运动性阻滞、认知障碍和快感缺失等。目前研究认为[10-13]，脑内去甲肾上腺素(NE)和DA之间的平衡失调，即DA和(或)NE一种或数种神经递质(生物胺)出现了神经生化上的失衡或功能缺陷，导致传递功能受损，从而引起抑郁。利血平可耗竭或使去甲肾上腺素失活而产生抑郁作用，因此造模时采用应激刺激加利血平结合法。

本试验研究结果发现，模型组小鼠脑内DA/NE均明显下降，说明抑郁症模型可使小鼠神经递质间的平衡失调。各药物均可以升高抑郁症小鼠脑内DA/NE含量，对抑郁状态亦有一定的改善作用，且作用强度逍遥散>醋柴胡>柴胡，提示醋制可增强柴胡抗抑郁作用，与传统认为柴胡醋制后疏肝解郁作用增强一致。

柴胡为疏肝解郁常用药。许多学者对肝郁证实质进行的研究发现，肝郁患者抑郁时脑内NE含量显著降低[14]，且DA含量也较正常偏低。有实验表明肝郁证模型小鼠脑内NE和DA与对照组比较下降明显[15]，说明柴胡的疏肝解郁作用机制可能是与增加脑内受体部位的DA/NE含量有关。尽管柴胡与醋柴胡对DA/NE含量也有调节作用，但效果不如逍遥散，可能在复方中各味药通过配伍增强了此作用。

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(责任编辑：宋勇刚)

Before and after Bupleurum Processed With Vinegar Influence on the Content of DA and NE in the Mouse Brain Suffering from Depression

Wang Lina1,Wang Wei1, Jia Tianzhu1,2

(1.Liaoning Journal of Traditional Chinese Medicine University, DaLian 116600,China;2.Chinese Material Medica Processing Engineering Center of Liaoning province, DaLian 116600,China)

Objective:By comparing the Bupleurum and vinegarish Bupleurum influence on the content of DA and NE in the mouse brain suffering from depression, investigate the mechanism on soothing liver-qi stagnation. Methods:Determine the content of DA and NE in the mouse brain suffering from depression by ELISA.Results:Bupleurum abled to significantly increased the content of DA and NE in the mouse brain suffering from depression, the effect of vinegarish Bupleurum is better than Bupleurum, after inclusion compound XiaoTaoSan, this effect will be enhanced.Conclusion:Both of the Bupleurum and vinegarish Bupleurum have antidepressant effects, and the mechanism of action may be related to an increase of the content of monoamine neurotransmitters NE,DA.

BupleurumChinense DC.;Antidepressant; DA;NE

2014-01-10

国家中医药管理局中医药行业科研专项项目(201107007)

王丽娜(1979-)，女，辽宁中医药大学讲师，研究方向为中药化学。

R285

A

1673-2197(2014)09-0004-02