四棱筋骨草等对小鼠抗运动疲劳比较研究

程 鹏，陈 飞，何先元.*， 周卯勤，明拂晓

(1.重庆医科大学 实验管理中心 ，重庆 401331；2.重庆医科大学 中医药学院， 重庆 401331；3.重庆市药物种植研究所，重庆 408435)



四棱筋骨草等对小鼠抗运动疲劳比较研究

程 鹏1，陈 飞2，何先元1.2*， 周卯勤3，明拂晓2

(1.重庆医科大学 实验管理中心 ，重庆 401331；2.重庆医科大学 中医药学院， 重庆 401331；3.重庆市药物种植研究所，重庆 408435)

目的：研究四棱筋骨草水浸液对小鼠的抗运动疲劳作用。方法：通过对小鼠分组灌胃四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液和生理盐水后小鼠的游泳时间、血尿素氮、肝糖原和肌糖原的测定，观察比较四棱筋骨草、肉苁蓉、太子参和红参水浸液对小鼠抗运动疲劳作用。结果：四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液均能增强小鼠抗运动疲劳的作用。结论：民间草药四棱筋骨草与传统补益类中药红参、肉苁蓉、太子参一样可明显提高机体抗运动疲劳的能力，可以作为提高机体运动适应性药物开发和应用的资源植物。

四棱筋骨草；水浸液；运动疲劳

四棱筋骨草是唇形科基源四齿四棱草(Schnabeliatetrodonta(Sun) C. T. Wu et G. Chen)干燥的全草。四棱筋骨草作为一种民间草药，具有祛风除湿、活血通络、散瘀止痛的功效，常用于风湿疼痛、四肢麻木、腰膝酸痛、跌打损伤、闭经痛经和月经不调等症，使用广泛，需求量很大，然而有关四棱筋骨草对运动疲劳的影响研究报道还没有[1-10]。本研究采用常用补益类中药红参、肉苁蓉、太子参等作为阳性对照比较，初步考察四棱筋骨草以及其它三味中药对运动疲劳影响的差异，同时红参、肉苁蓉、太子参也无人专门比较研究它们的抗疲劳作用差异。本研究旨在为四棱筋骨草资源的开发利用和另三味中药在抗疲劳方面的临床运用提供参考。

1 资料与方法

1.1 材料与试剂

四棱筋骨草(采自重庆市南川区金佛山自然保护区)、红参、肉苁蓉、太子参等从市场购买，水煎液从药店采购，水煎液(按一般水煎液方法制备)，每毫升相当于原生药2g。

肌/糖元试剂盒(规格100T/96样，生产批号：20131025，南京建成生物工程研究所)，尿素氮(BUN)试剂盒(规格50T/48样，生产批号：20131105，南京建成生物工程研究所)，双蒸水。

1.2 仪器设备

小鼠游泳装置：圆柱型不锈钢盆(50cm×50cm，内装冰水混合物，水深40cm，水温0℃ )；300mL 磨口广口瓶(凡士林密封)。紫外光分光光度计(UV-1200)、高速离心机(H1650-W)、数显恒温水浴锅(荣华HH-4)、匀浆器。

1.3 实验动物

昆明种健康小鼠由重庆医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK(渝)2002-0001，重庆医科大学动物实验中心提供。

1.4 实验方法

1.4.1 实验分组 选小鼠50只，体重(20±2)g，随机分为5组，即生理盐水组、四棱筋骨草水煎液组、红参水煎液组、太子参水煎液组、肉苁蓉水煎液组，每组10只，剂量按0.3mL/10g灌胃给药。其中4只作为运动疲劳实验小鼠，6只做肝糖原及肌糖原和血尿素氮测定。

1.4.2 小鼠运动疲劳实验 本方法是根据低温实验和小鼠游泳实验两种方法综合得出的检测小鼠运动疲劳的实验方法。各组给药后1h，然后将小鼠放入游泳装置，木棒敲打不锈钢盆边缘，刺激小鼠快速游动；记录小鼠游泳开始至呛水的时间。

1.4.3 小鼠耐缺氧实验 将上述开始呛水的小鼠转移到300 mL磨口广口瓶中(每瓶一只)，瓶内预先置新鲜钠石灰10g，用凡士林密封瓶口后开始计时，记录小鼠从瓶口密封到小鼠呼吸停止耐缺氧的时间。

1.4.4 生化指标测定方法 ①血清尿素氮含量：灌胃1h后受试动物，水中游泳疲劳后，断头采血，高速离心分离血清，二乙酰-肟比色法测定；②肝糖原含量：灌胃1h后受试动物，水中游泳疲劳后，取肝脏150mg匀浆，比色法测定；③肌糖原含量：灌胃1h后受试动物，水中游泳疲劳后，取后腿肌肉150mg匀浆，比色法测定。

1.5 统计学处理

所有实验数据采用SPSS 19.0软件包进行处理，新复极差测验(LSR法)字母标记法，凡有一个相同字母的即为差异不显著，凡没有相同标记字母的即为差异显著。

2 结果

2.1 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳的影响

四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液与生理盐水对小鼠运动疲劳经方差分析，见表1，处理间F值大于F0.05及F0.01值，说明不同中药水煎液处理之间差异大，不同水煎液对小鼠对运动疲劳影响具有不同的作用。

表1 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳的方差分析

对本实验研究数据进行多重比较，采用新复极差分析法，结果见表2，四棱筋骨草、红参和肉苁蓉水煎液对小鼠运动疲劳均与生理盐水比较存在显著差异，太子参水煎液与生理盐水比较无差异，四棱筋骨草、红参和肉苁蓉三者的水煎液对小鼠运动疲劳不存在差异。

表2 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳的新复极差分析

2.2 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳血尿氮的影响

四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液与生理盐水对小鼠运动疲劳血尿氮的影响经方差分析，结果见表3，处理间F值大于F0.05及F0.01值，说明不同中药水煎液处理之间差异大，不同水煎液对小鼠运动疲劳后血尿氮存在不同的影响。

表3 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳血尿氮影响的方差分析

对本实验研究数据进行多重比较，采用新复极差分析法，结果见表4，太子参、肉苁蓉、四棱筋骨草、红参水煎液对小鼠运动疲劳后的血尿氮的影响均与生理盐水比较存在极显著差异的影响，太子参、肉苁蓉、四棱筋骨草、红参四种水煎液相互之间对小鼠运动疲劳后的血尿氮也存在极显著影响。

表4 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳血尿氮影响的新复极差分析

2.3 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肝糖原的影响

四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液与生理盐水对小鼠运动疲劳后肝糖原的影响经方差分析，结果见表5，处理间F值大于F0.05及F0.01值，说明不同中药水煎液处理之间差异大，不同水煎液对小鼠运动疲劳肝糖原存在不同的影响。

表5 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肝糖原影响的方差分析

对本实验研究数据进行多重比较，采用新复极差分析法，结果见表6，太子参、肉苁蓉、四棱筋骨草、红参水煎液对小鼠运动疲劳后肝糖原的影响均与生理盐水比较存在极显著差异，四棱筋骨草、太子参、肉苁蓉、红参四种水煎液之间对小鼠运动疲劳后肝糖原存在显著影响，四棱筋骨草与太子参、肉苁蓉和红参之间存在极显著影响，肉苁蓉与太子参和红参之间存在极显著影响，太子参和四棱筋骨草之间不存在极显著影响。

表6 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肝糖原影响的新复极差分析

2.4 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肌糖原的影响

四棱筋骨草、红参、肉苁蓉、太子参水煎液与生理盐水对小鼠运动疲劳后肌糖原的影响经方差分析，结果见表7，处理间F值大于F0.05及F0.01值，说明不同中药水煎液处理之间差异大，不同水煎液对小鼠运动疲劳后肌糖原存在不同的影响。

表7 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肌糖原影响的方差分析

对本实验研究数据进行多重比较，采用新复极差分析法，结果见表8，肉苁蓉、太子参、红参水煎液对小鼠运动疲劳后肌糖原的影响与生理盐水比较存在显著差异，四棱筋骨草与生理盐水比较不存在显著差异，太子参与红参水煎液比较不存在差异，肉苁蓉与四棱筋骨草、红参和太子参水煎液之间存在极显著差异，红参与肉苁蓉水煎液之间存在极显著差异，太子参与红参之间、太子参和四棱筋骨草水煎液之间不存在极显著差异。

表8 四棱筋骨草等水煎液对小鼠运动疲劳肌糖原影响的新复极差分析

3 讨论

四棱筋骨草与红参和肉苁蓉补益类中药水煎液一样能显著提高小鼠运动疲劳的时间，太子参作用不明显，值得进一步探讨。

血尿素氮是蛋白质的代谢产物，当机体长时间运动而不能通过糖、脂肪分解代谢获得足够能量时，蛋白质和氨基酸分解代谢加强，血尿素氮可以作为评价机体体力超负荷时承受能力的指标。本研究表明红参、四棱筋骨草、肉苁蓉、太子参水煎液能显著降低小鼠血尿素氮含量，说明这4种药物具有提高机体对抗运动疲劳的适应能力，作用效果顺序是红参>四棱筋骨草>肉苁蓉>太子参，也说明四棱筋骨草可以作为抗运动疲劳的资源药物应用和开发。

体内肌糖原是运动时能量的来源，肌糖原储备充足，供应的能量就越多，耐力就越好；肝脏中肝糖原的储备增多，可以维持运动时血糖水平，从而为机体提供更多的能量来达到抗疲劳的目的。本实验结果可以看出，肉苁蓉、太子参、红参、四棱筋骨草水煎液均显著高于生理盐水对照组，提高了小鼠机体肌糖原和肝糖原的储备，增强机体对疲劳运动的适应能力。

中药成分中的皂甙、多糖、黄酮和多种氨基酸等多种物质均能提高机体抗疲劳的能力，作为民间草药的四齿四棱筋骨草所具有的抗疲劳作用主要是哪一类物质在起作用，有待进一步研究。

[1] 何来英，严卫星，楼密密，等.保健食品抗疲劳作用试验方法研究[J]. 中国食品卫生杂志，1997,9(4)：1-6,24.

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(责任编辑：宋勇刚)

Comparative Study on Anti-sports Fatigue Effect of Herbs Schnabelia Tetrodonta in Mice

Cheng Peng1,Chen Fei2,He Xianyuan1，2*,Zhou Maoqin3,Ming Fuxiao2

(1. Experimental management center of Chongqing Medical University，Chongqing 401331，China; 2.College of Traditional Chinese Medecine，Chongqing Medical University，Chongqing 401331，China; 3. Chongqing Institute of Medicinal Plant Cultivation, Chongqing 408435，China)

Objective:Study on anti-sports fatigue effect of water infusion of herbs Schnabelia tetrodonta in mice.Methods:The mice were randomly divided into five groups by intragastric administration water infusion of herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, cistanche, radix pseudostellariae and saline then the swimming time, blood urea nitrogen, liver glycogen and muscle glycogen of mice were determinated.Anti-sports fatigue effects were compared mutual between herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, Cistanche, radix pseudostellariae and saline in mice.Results:The decoction of herbs Schnabelia tetrodonta, red ginseng, Cistanche, radix pseudostellariae can enhance the anti-sports fatigue effect in mice.Conclusion:The folk medicinal herb Schnabelia tetrodonta can obviously improve the anti-fatigue ability of body in common with the traditional Chinese medicine ginseng, cistanche,radix pseudostellariae.The herb Schnabelia tetrodonta can be used as the plant resources of improving body movement adaptability drug development and application.

Schnabelia Tetrodonta;Water Infusion;Sports Fatigue

2014-03-11

重庆市卫生局科技项目(2012-2-144)

程鹏(1964-)，男，重庆医科大学实验管理中心实验师，研究方向为中药质量控制。

何先元(1963-)，男，重庆医科大学教授，硕士生导师，研究方向为中药资源开发利用及中药材GAP。

R285.5

A

1673-2197(2014)13-0009-03