高良姜水提和醇提样品液解酒效果比较研究
2014-04-27杨中林
周 利,葛 方,杨中林
(中国药科大学 现代中药教育部重点实验室,江苏 南京 210009)
高良姜水提和醇提样品液解酒效果比较研究
周 利,葛 方,杨中林*
(中国药科大学 现代中药教育部重点实验室,江苏 南京 210009)
目的:比较研究高良姜水提样品液和醇提样品液的解酒效果及对酒精性肝损伤的保护作用。方法:第1天小鼠均用52℃红星二锅头白酒0.14mL/10g体重灌胃,造成小鼠急性酒精中毒,灌酒30min后,模型组给予蒸馏水,其余各组给予相应的药物,灌胃体积为0.2mL/10g体重,检测指标为小鼠在金属网上的攀附时间,研究药物的解酒作用。第2天至第6天小鼠给酒造模3h后给药,造成小鼠酒精性肝损伤模型,检测指标为血清中GPT(谷丙转氨酶)的活性,研究药物的保肝作用。结果:高良姜水提样品液和醇提样品液都能延长小鼠在金属网上的攀附时间,并降低酒精性肝损伤小鼠血清中GPT的活性。结论:水提高良姜的解酒效果和保肝效果均优于醇提高良姜。
高良姜;解酒作用;酒精性肝损伤
随着人们物质生活水平的不断提高,饮酒过量已成为一种普遍现象。饮酒过量可导致中毒,引起机体生理功能紊乱,严重时可因呼吸肌麻痹而致死。目前,西药并无特效解酒药物,而中药在解酒方面却有较好效果。因此,为了人们的身心健康,提高人们的健康水平,根据解酒产品的需求及现状,有必要对解酒药物进行实验研究。
高良姜性味辛热,有散寒止痛、温中止呕之功,可用于解酒毒。药理学研究表明,其具有抗溃疡、抗腹泻、镇痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化、抗菌等药理活性[1-2]。有研究表明,高良姜对酒精性肝损伤具有保护作用[3]。目前还未见有关高良姜解酒作用的研究报道。本文通过建立小鼠急性酒精中毒和酒精性肝损伤模型,研究高良姜的解酒作用和对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。
1 实验材料
1.1 仪器
BS124S型万分之一电子天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司],80-2型低速离心机(江苏金坛市金城国胜实验仪器厂),96孔细胞培养板(Costar公司),DG5033A型酶标仪(华东电子),10μL、50μL、200μL和1 000μL移液器[大龙医疗器设备(上海)有限公司],垂直金属网(0.6cm×0.6cm孔径,50cm×50cm长宽)。
1.2 试剂与试药
高良姜(产地:广西,批号:130427,购自南京上元堂天景山药房,经中国药科大学杨中林教授鉴定为姜科植物高良姜(AlpiniaofficinarumHance)的干燥根茎),52℃红星二锅头白酒(北京红星股份有限公司),GPT测试盒(批号:20130926,南京建成生物工程研究所),海王金樽(深圳市海王健康科技发展有限公司)。
1.3 动物
ICR小鼠,雄性,体重23~30g,55只,购自扬州大学比较医学中心。
2 实验样品液制备
2.1 水提高良姜实验样品液制备
精密称取高良姜6.75g,加10倍量水(67.5mL)浸泡2h,分别以10倍、8倍、8倍量的水,各直火加热提取一次,时间分别为2h、2h、1h,合并三次续滤液,减压回收,加蒸馏水定容至100mL,得到的药液浓度为0.067 5g/mL,备用。
2.2 醇提高良姜实验样品液制备
精密称取高良姜6.75g,加10倍量70%的乙醇(67.5mL)浸泡2h,分别以10倍、8倍、8倍量的70%的乙醇,各回流加热提取一次,时间分别为2h、2h、1h,合并三次续滤液,减压回收至无醇味,加蒸馏水定容至100mL,得到的药液浓度为0.067 5g/mL,备用。
2.3 阳性药配制
取7片海王金樽(7g),研成粉末,精密称取6.75g,放入100mL的容量瓶中,加蒸馏水定容至100mL,即得,浓度为0.0675g/mL。
3 方法与结果
3.1 高良姜水提样品液和醇提样品液解酒效果比较
实验分组情况为:55只小鼠随机分为5组各11只,分别为:空白组、模型组、海王金樽组、醇提高良姜组、水提高良姜组。实验前12h小鼠禁食。每只小鼠均用52℃红星二锅头白酒0.14mL/10g体重灌胃,灌酒30min后,模型组给予蒸馏水,灌胃体积为0.2mL/10g体重;其余各组给予相应的药物,给药剂量为1.35g/kg体重,给药体积为0.2mL/10g体重,药物浓度为0.067 5g/mL。
在给予药物30min、90min、3h和4.5h后,将小鼠放在垂直悬挂的金属网正中间。同时记录小鼠在金属网上的攀附时间(把小鼠放在金属网上直至从金属网上掉落的时间),时间以秒(s)来记录。对于在金属网上的攀附时间超过10min 中的小鼠,其攀附时间一律记为10min(即600s)。
3.2 高良姜水提样品液和醇提样品液保肝效果比较
小鼠连续给酒造模6天,连续给药6天。从第2天开始,给酒造模3h后给药。于连续给药的第6天眼底静脉丛取血。分离血清,按试剂盒说明书方法测定血清中GPT(谷丙转氨酶)的活力。
3.3 统计学方法
3.4 实验结果
实验结果显示:海王金樽组、水提高良姜组与模型组比较,海王金樽组和水提高良姜组小鼠的攀附时间延长(P<0.05),说明海王金樽和水提高良姜的解酒效果显著。模型组与空白组比较,模型组的GPT值升高(P<0.05),说明小鼠的酒精性肝损伤模型成功;海王金樽组和水提高良姜组与模型组比较,海王金樽组和水提高良姜组小鼠的GPT值降低(P<0.05),说明海王金樽和水提高良姜具有保护肝损伤的作用。在给药30min和4.5h时各给药组小鼠的攀附时间与模型组比较,P>0.05。各组药物的解酒效果和保肝作用见表1、表2。
表1 小鼠第1天的攀附时间
注:与模型组比较,*P<0.05;与模型组比较,△P<0.05。
表2 血清GPT的测定结果 ±s,卡门氏单位)
注:与空白组比较,△P<0.05;与模型组比较,*P<0.05。
4 讨论
醉酒也称乙醇中毒,是指一次饮酒过量而导致的中枢神经等发生损伤的过程。乙醇摄入后,75%由十二指肠和空肠吸收,其余由胃吸收。95%以上乙醇在体内经过肝脏氧化、分解和代谢,其余乙醇未经氧化直接经肾从尿中排出、经呼吸道呼出或经皮肤汗腺随汗排出[4]。乙醇及其代谢产物能促进体内氧自由基的生成和脂质过氧化反应,诱发器官损伤,尤其是肝及神经系统。
要使人快速醒酒,恢复清醒状态,就要加速肝脏中乙醇的氧化分解代谢,减少其在体内蓄积;同时要增强清除自由基的能力,防止自由基对机体尤其是肝脏的直接或间接损害[5]。
本实验以小鼠在金属网上的攀附时间长短来判断小鼠的清醒状态,结果表明水提和醇提高良姜液都可以使小鼠的攀附时间延长,但是水提液效果更显著。其作用机制还需要进一步研究。
目前认为,过量的氧自由基在酒精性肝损伤发病过程中起了重要作用。机体大量摄入乙醇后,经乙醇脱氢酶和微粒体乙醇氧化系统分解代谢,产生大量氧自由基,导致肝细胞膜脂质过氧化反应,引起细胞代谢及功能障碍,造成肝细胞氧化损伤[6]。本研究发现,高良姜能显著降低急性酒精性肝损伤小鼠血清GPT水平,提示高良姜对酒精性肝损伤小鼠具有一定的保肝作用。但其作用机制还需进一步研究。
[1] 胡佳惠, 闫明. 高良姜的研究进展[J]. 时珍国医国药, 2009,20(10):2544-2546.
[2] 张明发, 沈雅琴. 高良姜的温里药理研究[J]. 陕西中医, 1996,17(7):324-326.
[3] 周园, 黎小妍, 熊天琴, 等. 高良姜对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用[J]. 北方药学, 2012(7):30-31.
[4] 郭金英. 中草药解酒药物研究进展[J]. 酿酒科技, 2007(11):86-91.
[5] 钟晓凌, 王然. 醒酒机理的研究进展[J]. 科教文汇, 2009(24):271-272.
[6] 冯志强, 沈志祥, 谭诗云. 酒精性脂肪肝的发病机制研究进展[J]. 世界华人消化杂志, 2002(3):346-348.
(责任编辑:宋勇刚)
Study on the Anti-alcoholism Effect of Alpinia officinarum Hance of Water Extraction and Alcohol Extraction
Zhou Li,Ge Fang, Yang Zhonglin*
(Key laboratory of Modern Chinese Medicines of Ministry of Education, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009,China)
Objective:To Study the Anti-alcoholism Effect and the protective effect of alcoholic liver injury of Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Methods:Alcoholic liver injury in mice model was established by alcohol gavage (52%U/U at 20mL/kg)per day for six days.Day 1 test in vertical metal clings time in mice. On the sixth day the determination of serum Glutamic Pyruvic Transaminase (GPT) activity. Results:Compared with model group, the clings time in the metal net was prolonged and the levels of GPT was significantly lowered by Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Conclusion:Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction has the Anti-alcoholism Effect and the protective effects on acute alcohol-induced liver injury in mice, but Alpinia officinarum Hance of water extraction was better than Alpinia officinarum Hance of alcohol extraction.
Alpinia Officinarum Hance; Anti-alcoholism Effect; Alcoholic Liver Injury
2014-03-07
周利 (1989-),女,中国药科大学硕士研究生,研究方向为解酒药药理作用。
杨中林(1950-),女,满族,中国药科大学教授,博士生导师,研究方向为中药新药研发。E-mail:yzl1950@126.com。
R285.5
A
1673-2197(2014)13-0004-02