草鱼配合饲料添加酵母培养物对草鱼生长性能、肝肠功能的影响

2014-04-26刘立鹤张志勇

武汉轻工大学学报 2014年1期

刘立鹤，张恒，聂伟，陈进，张志勇，刘军，黄峰，2，范伟

(1.武汉轻工大学动物科学与营养工程学院，湖北武汉430023;2.湖北省淡水水产健康养殖协同创新中心，湖北武汉430023;3.武汉爱维信生物科技有限公司，湖北武汉430070)

益宁易 SCP(Celmanax Soluble Concentrated Powder)是美国伟克公司采用先进的生产工艺和独特的发酵技术生产的纯天然酵母水解产物。该产品富含酵素、氨基酸、肽、维生素、矿物质、多种有机酸和生长因子;同时含有酵母细胞壁的水解产物如β-葡聚糖、甘露寡糖等功效物质。目前在畜禽上已有使用，对有效降低动物的热应激、促进食欲、增强动物的免疫力有十分明显的效果［1］。

近年来随着酵母源生物的推广，酵母水解物、酵母培养物在水产动物的应用也开始普及和推广，其中酵母水解物、酵母培养物在对虾［2］、斑点叉尾鮰［3］、中华鳖［4］等高档水产动物饲料中的应用相对较多，有研究报道证实酵母水解物对促进水产动物快速生长、促进采食、改善肠道结构有明显改善［5-6］。酵母核酸在淡水鱼类相应研究及应用较少，笔者前期曾在鲫鱼［7］和草鱼［8］上进行过酵母源生物饲料有零星的研究，但有关酵母培养物在淡水鱼类上的相关研究尚不多见。

笔者通过在两种不同饲料配方水平中分别添加益宁易SCP，通过人控水体养殖，研究饲料中添加益宁易SCP对草鱼生长性能、饲喂效果、肝功能指标和肠道显微结构的影响。

1 材料与方法

1.1 试验鱼

供试草鱼系同批同源苗种，购自汉川华严农场，运抵武汉轻工大学水产养殖基地暂养2周后，开始分组试验。

1.2 饲养时间

试验于2012年11月18日开始，至2012年12月31日结束，为期6周。

1.3 试验饲料

试验饲料分设A和B两个对照组，其中A对照组饲料配方价格跟目前市场上常见饲料配方价格持平，B对照组饲料配方价格略低于A对照组。在每个对照组基础上分别添加50 g/t和100 g/t的益宁易SCP，共6个处理组(见表1)。

试验原料制粒前经粉碎后过40目筛。饲料微量元素添加时采用逐渐扩大法混合，原料按配方均匀混合后，经挤条机挤压成型，24 h空调房晾干，置于-20℃冰箱保存备用。

表1 试验饲料配伍及常规成分分析 /%

1.4 试验管理

每个处理组设4个重复，每个重复25尾鱼，鱼均重20.39±2.19 g。试验期间，每天分2次饱食投喂(09∶30和16∶30)，并密切观察和记录鱼的摄食和活动情况，准确记录投喂的饲料量。每3日换1次水，保持水质在以下标准内:平均水温为(20±2)℃ ，溶氧＞6 mg/L。

1.5 样品采集

试验前和试验结束后分别将鱼禁食24 h后称重，试验期间记录投饵的重量和死亡数目。试验结束后分别在各组随机抽取若干条草鱼尾静脉抽血，采取血清用于肝功能指标的测定。每缸随机取鱼5尾，测定体长、体重，并解剖后称取肝重和空腹重，每个试验组取1—2尾鱼取前中肠、后肠和肝脏在布安氏液中固定后，制作成显微切片进行观察。

1.6 评价指标

成活率=(总尾数-死亡数)/总尾数;

增重率(WGR)= ［(Wt-W0)/W0］×100%;

饵料系数(FCR)=F/(Wt-W0);

肥满度=体重/(体长)3;

胴体比=空腹重/体重;

肝体指数=肝重/空腹重。

式中:Wt为试验末鱼总体重(g)，W0为试验初鱼总体重(g)，F为摄取的饲料总重量(g)。

待测血清送医院检测谷丙转氨酶、谷草转氨酶等免疫指标。对制作的切片进行显微观察，并以小肠皱褶高度作为相关的评估指标，以此判断饲料添加益宁易SCP后对草鱼肠道结构的影响。

1.7 统计分析

试验数据采用SPSS17.0软件进行统计分析，单因子方差(One-Way ANOVA)分析进行差异显著性检验，并采用邓肯氏(Duncan’s)法进行多重比较。显著水平 P ＜0.05。

2 结果与分析

2.1 对草鱼生长性能及形态指标的影响

饲料中添加益宁易SCP对草鱼生长性能的影响见表2。试验数据显示，饲料中添加益宁易SCP对改善草鱼的生长性能有一定的作用，只是这种作用并无显著性差异。随着饲料中益宁易SCP添加量的增加，草鱼的增重率总体呈现出增加的趋势，饵料系数呈现下降的趋势。其中，常规饲料配方中分别添加50 g/t和100 g/t益宁易SCP后，草鱼增重率分别提高了13.93%和31.89%，饲料系数分别降低了27.54%和18.84%;而相对低质饲料中添加50 g/t的益宁易 SCP后，草鱼增重率由对照组的34.77%减少到 25.03%，降低了 28.01%(估计与死亡鱼类个体相对较大有一定相关性)，益宁易SCP的添加量上升到100 g/t后，草鱼增重率上升到42.16%，提高了21.25%，此时其饵料系数也降低了 12.45%。

饲料中添加益宁易SCP对草鱼成活率、肥满度和胴体比的影响不大，除试验组2(对照组A+100 g/t益宁易SCP)的成活率为65%，比对照组的77%下降了 15.58%以外，其余各组的成活率都在71%—77%之间，无明显变化。各组间的肥满度均在1.30左右，胴体比在87%上下，组间变化率均在5%以内，无明显变化。

表2 饲料中添加益宁易SCP对草鱼生长性能及形态指标的影响

2.2 饲料中添加益宁易SCP对草鱼肝功能的影响

由表3可知，饲料中添加益宁易SCP后对草鱼的肝功能有明显的改善效果，其中，在普通饲料中添加50 g/t和100 g/t的益宁易SCP后，草鱼的肝体指数分别降低了17.91%和15.92%，谷丙转氨酶分别降低了20.31%和20.97%，谷草转氨酶在添加量为50 g/t时降低了15.10%，但在添加量增加到100 g/t时，上升了3.44%。在低价饲料中添加50 g/t和100 g/t的益宁易SCP后，草鱼的肝体指数分别降低了10.27%和18.92%，谷丙转氨酶分别降低了37.76%和 16.66%，谷草转氨酶分别降低了26.10%和31.21%。但组间组内酶活力波动较大，各组间并无呈现显著差异(P＞0.05)。

表3 饲料中添加益宁易SCP对草鱼肝功能的影响

2.3 饲料中添加益宁易SCP对草鱼肝脏、肠道显微结构的影响

从试验各组所取草鱼肝脏的显微结构(见图1—图6)分析，普通饲料组草鱼肝脏的显微细胞结构基本完整，即便一些细胞出现核区扩散的现象，但细胞的核区、界面也基本清晰，并无出现明显的病变和衰变迹象。低质饲料组草鱼肝脏的细胞结构仍然相对完整，核区、界面相对清晰，即便个别图中(如图2)个别肝细胞出现类似核区自溶，核区界面仍然相对可见，也无明显病灶特征。相对而言，低质饲料组肝脏细胞结构不如普通饲料组结构清晰，细胞中空泡现象相对普通组要普遍。

图1 A组肝胰脏的显微结构图×400倍

图2 B组肝胰脏的显微结构图×400倍

图3 试验组1肝胰脏的显微结构图×400倍

图4 试验组2肝胰脏的显微结构图×400倍

图5 试验组3肝胰脏的显微结构图×400倍

图6 试验组4肝胰脏的显微结构图×400倍

从前中后肠的显微结构(图7—图12)分析，前中肠的微绒毛相对高大粗状，而后肠的微绒毛则显得相对短小。在饲料中添加益宁易SCP后，无论是前肠、中肠还是后肠微绒毛高度都呈现出增加的趋势(见表4)，尤其是在普通饲料中添加50 g/t和100 g/t的益宁易SCP后，草鱼前肠微绒毛高度分别达到44.44μm 和47.07μm，比对照组分别增加了8.8%和13.19%;中肠微绒毛分别达到 43.98 μm和52.31μm，明显高于对照组的37.99μm。而在低价饲料中，添加100g/t的益宁易SCP能够使草鱼的前、中和后肠绒毛高度较低价未添加组分别增加5.01%，28.64%和12.07%，这都反映出益宁易 SCP对能够改善肠道结构，增强消化吸收能力。

表4 饲喂不同饲料对草鱼肠道微绒毛高度的影响 (n=10) /μm

图7 A组显微结构图×100倍

图8 试验组1显微结构图×100倍

图9 试验组2显微结构图×100倍

图10 B组显微结构图×100倍

图11 试验组3显微结构图×100倍

图12 试验组4显微结构图×100倍

3 讨论与小结

3.1 对草鱼生长性能及形态指标的影响

益宁易SCP主要成分为酵母发酵物和酵母细胞壁的水解产物，能够提供B族维生素、有机酸、氨基酸等营养物质，对加强动物自身免疫，促进消化吸收，改善动物饲料利用率有很大的帮助。本试验结果亦表明草鱼饲料中添加益宁易SCP对提高草鱼的生长性能有一定的帮助。

3.2 饲料中添加益宁易SCP对草鱼肝功能、肠道的影响

在饲料中添加益宁易SCP后，反应草鱼肝功能受损情况的相应指标包括肝体指数、谷草转氨酶和谷丙转氨酶都呈现出下降的趋势，表明益宁易SCP对改善草鱼肝功能，增强草鱼体质有明显的效果。近年来，由于水产养殖的密度逐渐增大导致的水体环境不断恶化，以及饲料营养等多方面的原因，造成鱼类肝脏负担不断增加，引起草鱼肝脏部位发生病变，导致肝脏肿大，色泽失常，使肝脏失去正常的生理机能，导致鱼体疾病［9-10］。而要想防治肝胆疾病，改善草鱼消化吸收能力，提高草鱼自身免疫力是关键。益宁易SCP含有的各种改善肠道和增强免疫成分，可以改善草鱼肠道的微生物菌群结构，促进肠绒毛的生长，提高草鱼消化能力，并通过免疫多糖类物质加强草鱼自身免疫力，增加草鱼肝脏的排毒解毒性能，保护草鱼肝脏不受损伤，对防治草鱼肝胆综合症有明显的作用。

研究显示，甘露寡糖可以促进肠道益生菌的生长，影响有害菌在肠道内的定植，对调节肠道微生态结构有显著地效果。而良好的肠道微生态结构，是保持肠道健康的重要保证。本试验中，在饲料中添加富含甘露寡糖的益宁易SCP后，草鱼肠绒毛长度增加，再次证明了甘露寡糖对改善肠道微生态结构的良好效果。