毛细管气相色谱法测定山西产连翘中有机磷农药残留

2014-04-26郭爱玲张淑蓉王秀文梁学伟

亚太传统医药 2014年10期

关键词：毛细管连翘残留量

郭爱玲，张淑蓉，王秀文，梁学伟，周健

(山西中医学院中药学院，山西太原 030024)

毛细管气相色谱法测定山西产连翘中有机磷农药残留

郭爱玲，张淑蓉*，王秀文，梁学伟，周健

(山西中医学院中药学院，山西太原 030024)

目的：建立毛细管气相色谱测定连翘中有机磷农药残留的方法。方法：采用乙酸乙酯超声提取样品，活性炭小柱净化，用毛细管气相色谱法同时测定连翘中12 种有机磷农药残留量。结果：被测定的12种农药标准曲线的相关系数r 为0. 999 0～0. 999 8，回收率为80.00%～96.76%，均符合要求；20批连翘样品中均未检测到农药残留。结论：该方法简便、快速、准确，可用于连翘中有机磷农药的残留量测定。检测结果表明山西省野生连翘生长环境优良，未受有机磷农药污染。

连翘；有机磷农药；毛细管气相色谱法

有机磷农药是一类人工合成的磷酸酯类农药，其品种多、药效高、药害小、用途广[1]。为提高我国中药材的国际市场化程度，保证安全用药，测定和控制中药中的农药残留量显得十分重要。气相色谱法是分析和测定各种农药残留的重要方法之一[2-3]，目前已有学者采用气相色谱法对有机磷农药残留[3-5]进行了研究，但对中药中有机磷农药残留的研究很少，对连翘的有机磷残留测定更未见报道。因此，本文采用毛细管气相色谱法对野生连翘中有机磷农药残留量进行测定，为连翘的质量控制提供参考依据。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

HP-6890气相色谱仪(检测器FPD)，KQ5200V型超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司) ，DB-1701弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，RE-52旋转蒸发仪(上海予华仪器设备有限公司)，Reacti-Therm Ⅲ氮气吹扫仪(广州西谱实验室设备有限公司)，FA/JA1004型万分之一电子天平(上海天平仪器厂)。

1.2 试剂

无水硫酸钠、乙酸乙酯、正己烷均为农残级。农药标准品敌敌畏、杀扑磷、乙酰甲胺磷、对硫磷、马拉硫磷、甲基对硫磷、久效磷、乐果、甲胺磷、二嗪农、乙硫磷和氧乐果(浓度均为1mg·mL-1)购于天津环境监测总站。连翘药材为山西太原、山西安泽、山西降县、山西左权等地区采集(见表1)，由山西中医学院副教授裴香萍鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspensa(Thunb.) Vahl的干燥果实。

表1 样品编号及来源

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用FPD检测器，进样口温度为220℃，检测器温度为300℃，载气为高纯氮气，采用分流进样；柱流量为1.00mL·min-1，分流比为10∶1，尾吹为60.0mL·min-1，进样量为1.0μL，采用外标法定量。

2.2 对照品溶液制备

精密量取1mg·mL-1敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、二嗪农、氧乐果、乐果、久效磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷、杀扑磷、乙硫磷对照品适量，分别用乙酸乙酯稀释成浓度为0.1mg·mL-1的溶液。分别量取0.1mL该浓度12种标准溶液于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即配制成1μg·mL-1混合标准溶液。

2.3 供试品溶液制备

取供试品粉末(过二号筛)约5g，精密称定，置于100mL具塞锥形瓶中，加入5g无水硫酸钠，50mL乙酸乙酯冰浴超声提取2次，每次3min，滤过，合并滤液，浓缩至干，加乙酸乙酯再次溶解后转移至5mL容量瓶中，量取1mL，上样活性炭小柱(Supelclean ENVI-Carb SPE Tubes，120～400目，0.25g，3mL，用5mL乙酸乙酯预洗)，置于多功能真空样品处理器上，用5mL正己烷-乙酸乙酯(1∶1)洗脱，置于氮吹仪上浓缩至干，加1mL乙酸乙酯溶解即得。

2.4 标准曲线制备

分别精密量取上述12种混合标准溶液0.01mL、0.05mL、0.1μL、0.2mL、0.5mL，置于10mL容量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，即配制成0.1μg·mL-1、0.5μg·mL-1、1μg·mL-1、2μg·mL-1和5 μg·mL-1的系列标准溶液。分别吸取上述标准溶液1.0μL进样测定，GC色谱见图1。以浓度(μg·mL-1) 为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，结果见表2。

图1 12种混合标准溶液GC色谱

农药tR(min)回归方程r线性范围(μg·mL-1)敌敌畏2.583Y=9951X-6180.99960.1～5.0甲胺磷3.546Y=12286X-11910.99920.1～5.0乙酰甲胺磷6.500Y=8905X-15000.99900.1～5.0二嗪农8.453Y=6445X-3220.99950.1～5.0氧乐果8.617Y=7090X-3750.99940.1～5.0乐果9.869Y=8390X-11550.99900.1～5.0久效磷10.098Y=8603X-5550.99910.1～5.0甲基对硫磷11.276Y=6818X-4290.99980.1～5.0马拉硫磷11.557Y=5423X-2220.99930.1～5.0对硫磷12.191Y=7559X-3190.99940.1～5.0杀扑磷13.512Y=5140X-3290.99920.1～5.0乙硫磷14.848Y=9535X-4590.99970.1～5.0

2.5 精密度试验

分别精密吸取1μL 0.5μg·mL-1的12种混合标准品溶液，连续进样6次，测定峰面积积分值，计算RSD，结果见表3。

表3 精密度试验结果 (%，n=6)

2.6 加样回收试验

精密称取山西太原青翘(6号样品)5g，共6份，分别精密加入浓度为5μg·mL-1的12种混合标准品溶液0.5mL，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，进样测定，计算回收率及RSD，结果见表4。

表4 加样回收试验测定结果 (%，n=6)

2.7 样品有机磷残留测定

精密称取20批样品各5.0g，按照“2.3”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定。结果表明，20批连翘样品中均未检出12种有机磷农药，样品色谱见图2和图3。

图2 老翘样品色谱

图3 青翘样品色谱

3 讨论

本文实验结果表明，20批连翘药材中均未检测到有机磷农药残留，一方面由于有机磷农药中多含有酯键，性质不稳定，不易长期残留[7-8]，另一方面可能是连翘本身不易吸收该类农药，或是因为20批连翘均为野生，未被农药污染。本研究采用毛细管气相色谱法同时测定了连翘中12种有机磷农药残留量，该法简便、快速、准确，可为连翘药材的质量控制提供参考依据。

[1] 蒋晔,刘红菊,郝晓花.中药中农药残留量研究进展[J].药学实践杂志,2004,22 (2):68.

[2] 李钦,张保国.中药中农药残留及有害金属检测方法概述[J].开封医专学报,1997,16(1):42.

[3] 白艳玲,王丽玲.气相色谱法快速测定蔬菜中六种有机磷农药残留量[J].广东卫生防疫, 1999,25(1):9.

[4] 林国斌,赵道辉,陈宏靖.气相色谱法毛细管柱同时测定蔬菜中七种有机磷农药含量实用[J].预防医学,2002,9(1):91,

[5] 杨雪梅,钟怀宁,严轶琛,等.药材中9种有机磷农药残留量的方法研究[J].时珍国医国药,2006,17(7):1156-1157.

[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:人民卫生出版社,2005:附录53.

[7] 张炜,王伟.几种中成药中有机磷类农药残留分析[J].解放军药学学报,2002,18(1):56.

[8] 张俊清,刘明胜,邢福桑,等.近年来中药材农药残留的研究概况[J].中国药学杂志,2003,38 (1):7.

(责任编辑：尹晨茹)

2014-03-20

山西省科技攻关项目(2006031083-01)

郭爱玲(1976-)，女，硕士，山西中医学院讲师，研究方向为中药化学成分分析。