金龙胶囊对鼻咽癌患者放疗期间免疫功能的影响

蓝小林吴伟李金伟刘联斌周茂华曾国兴

金龙胶囊对鼻咽癌患者放疗期间免疫功能的影响

蓝小林1吴伟2李金伟2刘联斌3周茂华3曾国兴1

目的观察金龙胶囊对鼻咽癌患者放疗期间免疫功能的影响。方法将40例初治鼻咽癌患者随机分为治疗组20例,接受常规放疗加口服金龙胶囊；对照组20例，仅接受单纯常规放疗。于放疗前及放疗结束时以流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞和自然杀伤细胞，比较两组结果差异。结果放疗结束时，治疗组和对照组CD4/CD8、CD19均值均比放疗前降低（P＜0.05），但治疗组较对照组下降幅度小（P＜0.05），CD56变化组间差异不大（P＞0.05）。结论 金龙胶囊可以减缓鼻咽癌患者放疗期间的免疫功能下降水平，尤以CD4/CD8和CD19明显。

鼻咽癌；放射疗法；免疫功能；金龙胶囊；疗效

恶性肿瘤患者免疫功能是削弱的，T淋巴细胞亚群及NK细胞是评价人体细胞免疫功能的重要指标，B淋巴细胞是评价人体体液免疫功能的指标，放疗可加剧由癌症诱发的低免疫功能，而细胞免疫功能与患者的预后密切相关[1,2]。放疗是鼻咽癌的主要治疗手段，放疗通过射线杀灭肿瘤细胞使患者得到康复，但又有可能抑制机体的免疫功能，造成不能完全被消灭的肿瘤细胞重新生长，导致肿瘤的复发和/或转移。金龙胶囊是以鲜活药用动物为原料，运用低温冷冻及现代生化技术分离提取工艺制备而成的现代中药，具有抗肿瘤及免疫调节双重作用。本文通过流式细胞仪检测鼻咽癌患者放疗前后T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞的变化，以了解金龙胶囊对鼻咽癌放疗免疫功能状况的影响。

资料与方法

1 临床资料

2012年1月～2012年6月来本院就诊的随机抽取的40例初治鼻咽癌患者，均经病理确诊为鼻咽未分化型非角化性癌，其中男23例，女17例；I期7例，II期15例，III期14例，IV期4例。年龄32～67岁，中位年龄47.5岁。将40例初治鼻咽癌患者随机分为两组:治疗组20例,常规放疗加放疗期间口服金龙胶囊（北京建生药业有限公司，国药准字Z10980041，规格0.25g×30粒）1.0g（4粒），3次/ d，口服；对照组20例，单纯常规放疗。放疗前及放疗后收集标本，采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞及NK细胞。

2 仪器和试剂

美国BD公司FACSCalibur流式细胞仪，用标准荧光微球校正光电倍增管(PMT)电压，建立荧光补偿,检查仪器灵敏度，使流式细胞仪处于最佳工作状态；美国BD公司配套四色试剂MUltiTESTTM IMK.KIT，货号：340503。

3 样本制备与检测。

3.1 所有样品按照要求采集外周静脉血2ml，EDTA-K2抗凝，均在采样48h内完成检测。

3.2 在检测管中准确加入20μlMultiTEST四色试剂和50μl全血，充分混匀后置室温阴暗处15 min。加入450μl FACS溶血剂(1x),充分混匀后室温阴暗处15min。

3.3 标本制备后立即上机运行MultiTEST程序检

测。

3.4 每次检测均使用质控品同时检测，质控品的检测值均在其靶值±2s范围内各样品检测值有效。

4 放射治疗

采用西门子直线加速器6MV的X线。采用体位不变的等中心照射，热塑型面罩固定，低熔铅个人专挡，屏蔽非照射区域。常规分割连续放疗，每次2Gy，1次/天，每周5次；鼻咽靶区根治剂量为65~ 75Gy，颈淋巴结转移灶根治剂量为60~70Gy，颈淋巴结预防性照射剂量为45~50Gy。

5 检测数据统计分析

结果

治疗组和对照组放疗后CD4/CD8、CD19的均值比放疗前降低（P＜0.05），治疗组较对照组下降均值减少（P＜0.05），CD56变化不大（P＞0.05）。经统计学分析差异显著，见表1-3。

表1 治疗组放疗前后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

表1 治疗组放疗前后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

表2 对照组放疗前后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

表2 对照组放疗前后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

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表3 治疗组和对照组放疗后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

表3 治疗组和对照组放疗后CD4/CD8、CD19和CD56细胞变化（+s）

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讨论

鼻咽癌是我国南方地区的常见肿瘤，放疗是其主要治疗手段。在放射治疗中，射线将使T细胞亚群发生变化，对细胞免疫功能和T细胞亚群产生影响，对淋巴细胞增殖功能有抑制作用。T淋巴细胞是来源于淋巴干样细胞，在胸腺内发育成熟为T细胞，然后移行至外周淋巴组织，T淋巴细胞受抗原刺激，最后形成具有免疫活性的致敏淋巴细胞，合成与免疫作用有关物质，细胞随血液至抗原所在处，通过与抗原、抗体接触而发挥免疫作用[3]。T细胞亚群包括总T细胞数(CD3)、辅助T细胞数(CD4)、抑制T细胞数(CD8)以及后两者的比值(CD4/CD8)，此四项指标中，CD3的检测意义已逐渐减小，CD4和CD8的结果相互影响，功能相互牵制，单独分析有一定的局限性，而CD4/CD8的值在判断结果时相对稳定，检测更具有实用价值。B淋巴细胞(CD19)主要参与机体的体液免疫功能，自然杀伤细胞(CD56)对肿瘤的免疫监视并不和T细胞完全一样,其在体内还需刺激因子(如白介素2等)的激活才能发挥杀伤肿瘤的作用。

金龙胶囊是一种鲜活动物药制剂，以鲜金钱白花蛇、鲜蕲蛇和鲜守宫等新鲜动物为主要成分，在低温下，经现代生化技术分离提取工艺制备。其中守宫,入血分透筋达络,善破血散结解毒,又能通经活络而止痛。《本草求原》称其“咸寒,小毒,入血分,治血病……滋阴降痰，为瘰疬妙品……且毒能攻毒,故治痈疽”,滋阴为其扶正之功,破瘀散结、降痰解毒为其荡邪之效,故为本方君药。金钱白花蛇,《本草纲目》曰:“白花蛇能透骨搜风,截惊定搐,为风痹、惊搐、癞癣恶疮要药,取其内走脏腑,外彻皮肤,无处不到也”。其具有破瘀、散结、降痰、解毒、通络的作用,辅助君药以加强破瘀散结、解郁通络之效,且能协同蕲蛇共同引药入肝经,故为臣药。蕲蛇,味甘咸性温,入肝经,性善走窜,内走脏腑,外彻皮毛,透骨通经散结,既可加强君药滋阴破瘀散结功效,又可加强臣药的通络解郁散结力量,为方中之佐使药。上述3药有毒或有小毒,经现代化工艺处理后,不但充分发挥“以毒攻毒”的作用,还免除了对人体的毒性[4]。药理研究也证实，金龙胶囊保持了原药的各种生物活性，特别体现在多种氨基酸、多肽、酶类、核苷酸类以及多种微量元素得以保留。不仅可以起到散结解毒，扶正祛邪，补血益气，提高患者免疫力，改善生活质量的作用；还能抑制肿瘤细胞生长，还可补充人体必需的氨基酸、微量元素[5]。金龙胶囊可增强机体的免疫功能,通过增加T细胞、NK细胞、LAK细胞、巨噬细胞等肿瘤杀伤细胞的数量或功能,增强抗肿瘤相关的细胞因子活性而达到抗肿瘤的作用[6-8]。

放疗后由于T细胞亚群数量及比例均有改变，对患者产生强大而持久的抑制作用，降低其免疫功能。本研究结果示，治疗组和对照组患者放疗后CD4/CD8，CD19的均值比放疗前明显降低（P＜0.01），统计学检测有极显著性差异，表明放疗在使鼻咽癌病灶消退的同时也损伤机体的免疫功能，致使CD4/ CD8比例降低或者倒置、机体免疫功能抑制，减弱宿主免疫细胞抗肿瘤的能力，其免疫功能显著降低；CD56变化不大（P＞0.05），无统计学意义，可能与NK细胞在鼻咽癌中的作用有限相关。治疗组和对照组放疗后相比，治疗组放疗后CD4/CD8，CD19的均值比对照组下降均值减少（P＜0.05），统计学检测有显著性差异，表明金龙胶囊可以减缓放疗时免疫功能的下降。

综上所述,放射治疗可以使鼻咽癌患者的免疫功能下降，金龙胶囊可以减缓放疗时免疫功能的下降，从而提高临床获益率、改善鼻咽癌患者放疗后的生活质量,值得临床进一步研究。

1 Sootaek U,SangML,HyeonTKet al.The effect of radiation therapy on immune function in patients with squamous cell lung carcinoma[J].Chest,1994;105:132.

2 Parkin DM.Global cancer statistics in the year 2000[J]. LancetOn-co,l 2001,2(9):533.

3 陈慰峰，主编.医学免疫学.[M].第3版.北京：人民卫生出版社，2000:89-91.

4 曾宝珠,杨亚群,韩新巍.金龙胶囊联合TACE治疗原发性肝癌31例[J].中医研究,2010,23(8):35-37.

5 贾立群,李学,万东桂,等.金龙胶囊的免疫双向调节作用[J].北京医学,2005,27(9):550-552.

6 韩飞,张建东,邵震宇,等.同步放化疗联合金龙胶囊治疗中晚期鼻咽鳞癌的临床观察[J].中华肿瘤防治杂志, 2010,17(2):138-139.

7 徐淑玲,王笑红,张永祥,等.金龙胶囊对免疫受抑小鼠淋巴细胞亚群的影响[J].中国中医基础医学杂志,2005,11 (12):908-909.

8 叶欣,葛忠民,费兴波,等.高强度聚焦超声联合金龙胶囊治疗原发性肝癌54例疗效分析[J].中国肿瘤临床, 2008,35(7):372-374.

(收稿:2014-03-21 修回：2014-04-16)

Effects of Jinlong Capsules on the immune function of patients with nasopharyngeal carcinoma undergoing radiotherapy

LAN Xiaolin,WU Wei,LI Jinwei,LIU Lianbin,ZHOU Maohua,ZENG Guoxing Department of Head and Neck Oncology,Jiangxi,341000,China

Objective To observe the protective effects of Jinlong Capsules(JLC)on the immune function of patients with nasopharyngeal carcinoma(NPC)undergoing radiotherapy.MethodsA total of 40 untreated NPC patients were randomly assigned to two groups,i.e..20 cases in treatment group(TG)treated by routine radiotherapy combined with JLC and 20 in control group(CG) treated only by routine radiotherapy.Then,detected before the treatment and by the end of therapeutic course were the numbers of lymphocytes and natural killer cells in peripheral blood by flow cytometry to compare the difference of radiation effect on the immune function of patients during the period of radiotherapy in these 2 groups.ResultsBy the end of radiotherapy,the mean values of CD4/ CD8 and CD19 were both reduced obviously in either TG or CG as compared with that of pre-treatment(P＜0.05),but the reduced extents of them were significantly smaller in TG than in CG(P＜0.05).However,there was no significant difference found in the mean values of CD56 between these two groups(P＞0.05).ConclusionsJinlong Capsules hold such an effect on the immune function of NPC patient receiving radiotherapy to lower the damaging effect on immunocytes induced by radiation during therapeutic course, especially for CD4/CD8 and CD19.

Nasopharyngeal carcinoma;Radiotherapy;Immune function;Jinlong Capsules;Therapeutic effect

10.3969/j.issn.1007-4856.2014.06.015

1江西省赣州市肿瘤医院头颈科（341000）

2江西省赣州市肿瘤医院放疗科

3江西省赣州市肿瘤医院检验科

蓝小林，主任医师.Email::lxl3628@163.com