鸦胆子油胸腔内灌注对恶性胸腔积液患者生活质量及胸水DNA倍体的影响

高静东 李湧健 张少朋

（苏州市中医医院，江苏苏州 215000）

鸦胆子油胸腔内灌注对恶性胸腔积液患者生活质量及胸水DNA倍体的影响

高静东 李湧健 张少朋

（苏州市中医医院，江苏苏州 215000）

目的：观察鸦胆子油胸腔内灌注对恶性胸腔积液患者生活质量及胸水DNA倍体的影响。方法：35例恶性胸腔积液患者，胸腔内灌注鸦胆子油，观察患者治疗前后卡氏评分、血细胞指标变化情况，并在治疗前后抽取胸水进行DNA倍体分析。结果：鸦胆子油治疗后，患者卡氏评分较治疗前明显提高，白细胞、血红蛋白、血小板指标较治疗前无明显差异。治疗前29例患者DNA倍体分析为阳性。6例患者3次灌注治疗后DNA倍体转为阴性，胸水量极少拔引流管；15例患者5次灌注后DNA倍体转为阴性但积液量仍较多，再灌注鸦胆子油，直至24h胸水量极少时拔管。结论：鸦胆子油治疗恶性胸腔积液疗效显著，毒副作用低，能有效控制恶性胸腔积液，患者易于接受。临床可根据胸水中非整体细胞所占的比率变化来评价疗效，并决定继续使用原药物或更换药物。

恶性胸腔积液 鸦胆子油 DNA 倍体分析

近年来，我们采用胸腔内注入鸦胆子油的方法治疗恶性胸腔积液患者35例，获得较好的疗效，现报道如下。

1 临床资料

35例均为2011年1月至2013年7月本院收治的恶性胸腔积液患者。其中男24例，女11例；年龄最大86岁，最小33岁，平均年龄（62.40±13.05）岁；肺癌21例，肝癌2例，卵巢癌3例，软组织肉瘤3例，腮腺癌1例，结肠癌3例，宫颈癌1例，胃肠间质瘤1例。

2 治疗方法

采用广州佛山特种医用导管有限责任公司，CF-ABC 16Ga×20cm一次性使用中心静脉导管，在胸部B超定位后，患者半卧位或坐位，取腋中线或腋后线7～9肋间为穿刺点。利多卡因局麻后，用中心静脉导管针行胸腔穿刺，抽出液体后，送入导丝，拔出穿刺针，沿导丝将导管送入胸腔内，留置导管总长度为10～15cm，拔出导丝后，如回抽有液体流出，用带肝素帽封管，并用贴膜将导管固定于胸壁上，将导管与一次性引流袋连接，持续引流。胸片或B超示胸水排净后，开始向胸腔内注入鸦胆子油（沈阳药大药业有限责任公司，生产批号：Z21020639）50mL，利多卡因（徐州莱恩药业有限公司，生产批号：H32023258）0.1g。灌注完闭后，封闭引流管。隔日1次，连续灌注5次。

3 疗效观察

3.1 生活质量及安全性评价记录患者治疗前后卡氏评分，检测治疗前后白细胞（WBC）、血红蛋白（HGB）和血小板（PLT）指标。

3.2 DNA倍体分析每次鸦胆子油灌注前抽取胸腔积液30mL，进行DNA倍体分析。采用美国BD Biosciences公司生产的BD FACSC anto TMⅡ型流式细胞仪以及DNA倍体分析配套试剂盒。取胸水30mL，予肝素抗凝后，分别装入10mL试管中，离心5min之后弃上清液，再用生理盐水洗涤，离心5min之后弃上清液。如沉淀中有红细胞，则加入红细胞溶解液1mL，混匀振荡，避光，室温静置10min，离心5min之后弃上清液，再用PBS液洗涤1～2次，离心5min后弃上清液，制成单细胞悬液。取单细胞悬液1mL，加入DNA倍体分析试剂盒A液（细胞膜穿透液）250μL，室温卵育10min，之后加入B液（RNA消化酶）200μL，室温卵育10min，最后加入冷C液（PI染液）200μL，避光孵育10min，细胞悬液经300目筛过滤后上机检测。

3.3 统计学方法采用SPSS13.0软件进行统计分析，率的比较采用卡方检验，治疗前后数据比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

3.4 治疗结果

3.4.1 患者治疗前后卡氏评分变化治疗前患者卡氏评分（57.35±13.77）分，治疗后卡氏评分（63.53±11.25）分，治疗后明显高于治疗前（P＜0.05）。表明使用鸦胆子油胸腔灌注后，卡氏评分较前提高，患者生活质量较前改善。

3.4.2 患者治疗前后血常规指标变化见表1。治疗前后患者外周血白细胞、血红蛋白、血小板等指标无明显变化（P＞0.05）。说明鸦胆子油对骨髓抑制不明显，对血常规影响较小，具有疗效好、毒副作用小的优点。

表1 患者治疗前后外周血白细胞、血红蛋白、血小板指标变化

3.4.3 患者治疗前后DNA倍体变化依据FCM肿瘤诊断的标准[1]，应用ModFit LT 2.0软件进行分析，同时以正常人外周血淋巴细胞作为正常二倍体对照，被测标本细胞DNA含量峰值与对照标本细胞二倍体峰值之比为DNA指数（DI），二倍体DI为（1±0.1），DI不在（1±0.1）范围者为异倍体。

35例患者初次DNA倍体分析阳性29例，阳性率82.8%。对胸水分析阳性的患者在每次灌注前留取胸水，进行DNA倍体分析。6例患者3次灌注后DNA倍体转为阴性，胸水量又极少拔引流管；15例患者5次灌注后DNA倍体转为阴性但积液量仍较多，再灌注鸦胆子油，直至24h胸水量极少时拔管；8例患者5次灌注后DNA倍体仍为阳性给予更换药物治疗。治疗过程DNA倍体分析结果变化见图1、图2。图1为某患者治疗前胸水DNA倍体分析，非整倍体细胞数为44.97%；图2为同一患者5次灌注后DNA倍体分析，非整倍体细胞数下降为0.79%。

图1 患者治疗前胸水DNA倍体分析

图2 患者治疗后胸水DNA倍体分析

3.5 远期疗效通过对29例初次DNA倍体分析阳性患者进行随访，其中积液控制少于3个月者10例，占34.5%；3～6个月者15例，占51.7%；大于6个月者4例，占13.8%。

4 讨论

恶性胸腔积液主要由于肿瘤细胞侵犯胸膜并在胸腔内种植所致，是晚期肿瘤的常见并发症之一，多增长迅速，压迫纵隔、心脏及肺组织，从而影响呼吸及循环功能，影响患者的生存状况并威胁患者的生命。

鸦胆子是一种传统中药，又名老鸦蛋、苦参子，味苦，性寒，有毒，有清热解毒、截疟治痢、腐蚀赘疣之功效。鸦胆子油是由鸦胆子脂肪酸中提取而成的新型抗癌药物，具有抗肿瘤和提高机体免疫功能的作用[2]，对肿瘤细胞增殖周期具有直接杀伤和抑制作用，能抑制多种癌细胞的DNA合成。其在体内可定向分布，对抗肿瘤药物有增敏作用而且毒副作用低，对骨髓无抑制作用[3-5]。本研究结果表明，胸腔灌注鸦胆子油治疗恶性胸腔积液，具有疗效显著、毒副作用低的优点，能有效控制恶性胸腔积液，且无明显胸痛，患者易于接受。其作用机制有可能在于药物对肿瘤细胞的直接杀伤作用，鸦胆子油与癌细胞有较强亲和力，能够黏附在癌细胞周围时间较长，从而充分发挥抗癌作用；灌注药物后，抗癌药物的有效成分能直接接触胸膜组织，并产生化学性炎症反应，破坏细胞膜，使积液的产生减少或停止，促进胸膜粘连、纤维化，从而封闭胸膜腔，达到控制胸水的目的。

人体正常细胞均为二倍体（23对染色体），而肿瘤细胞常常发生染色体突变，导致染色体的结构和数目异常，在胸水中检测到细胞DNA异倍体可高度提示为恶性肿瘤细胞，具有很高特异性。因此，DNA倍体分析在恶性胸腔积液方面有较好的临床应用价值[6]。目前在胸水治疗中，诊断恶性胸腔积液常无统一标准，多依据病史、胸水常规是否为渗出液和胸水中是否找到肿瘤细胞来判断。而对胸水疗效的评价，亦无统一的标准，更缺少对胸水中肿瘤细胞数量的变化分析。因此，我们借鉴流氏细胞检测技术，用DNA倍体分析方法，间接判断胸腔积液中肿瘤细胞数目，从而对恶性胸腔积液的治疗效果进行评价。我们研究发现，经多次灌注鸦胆子油药物，如果非整体倍细胞数仍较高，说明肿瘤细胞已产生耐药，应及时更换灌注药物，如治疗后倍体分析转阴性，但积液量仍较多，说明仍有渗出，可继续应用灌注鸦胆子油，增加局部无菌性炎症，减少渗出，促进胸膜粘连、纤维化，减少或控制胸水。该方法操作简便，灵敏性和特异性高，实用性强，值得进一步研究。

[1]Klein FA，Herr HW，Sogani PC，et al.Detection and follow up 0f carcinoma of urinary bladder by flowcytometry.Cancer，1982，50：389

[2]朱春荣，王庆才，陈凯.鸦胆子油乳注射液治疗中晚期恶性肿瘤79例.江苏中医药，2002，23（11）：30

[3]韩芍亭.新编抗肿瘤药物手册.济南：山东科学技术出版社，1995：240

[4]李佩文.中西医临床肿瘤学.北京：中国中医药出版社，1996：111

[5]司品现，王君，张士霞，等.鸦胆子油乳对化疗病人的骨髓保护作用.河南肿瘤杂志，1996，9（1）：71

[6]Saha I，Dey P，Vhora H，et al.Role of DNA Flow Cytometry And Image Cytometry In Effusion Fluid.Diag Cytopathol，2000，22（20）：81

编辑：韦杭吴宁

R730.6文献识别码A

1672-397X（2014）03-0032-02

高静东（1975-），男，医学博士，副主任中医师，从事中西医结合治疗恶性肿瘤研究。gaojingdong10@163. com

2013-09-29