益气通脉饮对慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影响

吉利 张艳

（辽宁中医药大学附属医院，辽宁沈阳 110032）

益气通脉饮对慢性心力衰竭大鼠心功能及血清ANP、BNP含量的影响

吉利 张艳

（辽宁中医药大学附属医院，辽宁沈阳 110032）

目的：探讨益气通脉饮不同剂量给药对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能及心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）含量的影响。方法：采用结扎大鼠左冠状动脉主干的方法复制急性心梗后心衰大鼠模型，造模成功的大鼠随机分为模型对照组、中药等效剂量组、中药大剂量组、西药对照组，另设正常对照组，每组8只，分别给予相应药物或生理盐水连续灌胃8周后，多普勒超声心动图机测定CHF大鼠心功能，酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清中ANP、BNP含量。结果：与模型对照组比较，益气通脉饮各剂量组大鼠治疗后心功能各项指标均有不同程度改善，ANP、BNP含量明显降低。结论：益气通脉饮可以改善CHF模型大鼠的心功能，降低血清中ANP、BNP含量，从而延缓慢性心力衰竭的发生和发展。

心力衰竭 益气通脉饮 心功能 ANP BNP

慢性心力衰竭（CHF）是心血管疾病的终末期表现和最主要的死因。近年来，笔者通过临床研究发现，心气虚衰是CHF发病的始动因素，而血瘀是CHF的中心病理环节。我们根据CHF的病机特点，筛选药物制成益气通脉饮，治疗CHF取得了良好的疗效。为了进一步探求益气通脉饮治疗CHF的作用机理，我们建立CHF大鼠模型，观察益气通脉饮对CHF模型大鼠的心功能及血清心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）含量的影响，现将结果报道如下。

1 实验材料

1.1 动物10～12周龄健康雄性Wistar大白鼠100只，体重250～300g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。

1.2 试剂益气通脉饮：由辽宁中医药大学附属医院中药房提供，制成每毫升含生药1.26g的溶液。药物组成：黄芪30g，人参10g，红花20g，丹参15g，三七10g，益母草30g，葶苈子20g。科素亚：由杭州默沙东制药有限公司生产，批号：国药准字H20000371，规格：50mg/片。大鼠心钠素（ANP）、脑钠素（BNP）酶联免疫试剂盒：购于武汉新启迪生物科技有限公司，产品编号分别为EIA06242、EIA06249。仪器设备：DH-140B型小动物呼吸机，由浙江医科大学医疗实验仪器厂生产；MS-2000多媒体化心电图软件，由广州市龙飞达科技有限公司生产；SONOS5500分色多普勒超声心动图机，由Agilent公司生产。

2 实验方法

2.1 造模与分组参考文献[1]方法，在无菌操作下，于胸骨左侧第3、4肋间皮肤处横向切开长约1.5cm的切口，钝性分离软组织，暴露心脏后，于左冠状动脉前降支起点下2～4mm处用6号丝线结扎左冠状动脉主干造成急性心肌梗死模型。术后记录标准肢体导联及胸前导联（纸速50mm/s）心电图，ST段弓背抬高者为造模成功。常规喂养饲料与水1周后，于第2周将其饲料减半，致大鼠处于半饥饿状态，常规喂水；于第3周开始，每天游泳1次，致疲乏无力（约20min）；于第4周由电检科医生做彩色超声多普勒心动图，测定左室收缩末期容积（ESV）、左室舒张末期容积（EDV）、左室射血分数（LVEF）、左室每搏输出量（SV），进而计算出左室心指数（CI），CI≤180mL/（min·kg）者作为心衰成功模型入选。入选的大鼠随机分成4组：模型对照组、中药等效剂量组、中药大剂量组、西药对照组，另取心功能正常的大鼠作为正常对照组，每组8只。

2.2 给药造模成功后，中药等效剂量组与大剂量组分别按照5.4g/kg、16.2g/kg予中药煎取液灌胃，即相当于临床成人剂量与3倍成人剂量；西药对照组予科素亚混悬液，按4.5mg/kg灌胃，相当于临床成人剂量；模型对照组与正常对照组以同体积的生理盐水灌胃。每日1次，共8周。

2.3 观察指标及检测方法心功能检查：给药结束后由电检科医生为大鼠做彩色超声多普勒心动图，测定左室收缩末期容积（ESV）、左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期容积（EDV）、左室每搏输出量（SV），各项数值均经计算机处理后获得。血清ANP、BNP含量测定：给药结束后，在5%戊巴比妥（2～3mL/kg）腹腔注射麻醉下开胸取左心室腔血2mL，注入试管中，摇匀，4℃3000r/min离心10min，取血清置于-20℃保存，用酶联免疫法测定ANP与BNP含量，严格按照试剂盒说明书进行操作。

2.4 统计学方法所有数据均采用SPSS13.0 for windows统计软件包进行分析。各项指标结果均以（±s）表示，组间比较采用t检验。

3 实验结果

3.1 各组大鼠一般状态比较除正常对照组外，其他各组大鼠在造模后均出现不同程度的蜷卧、脱毛、消瘦、厌食、便溏等症状，尤以未经任何治疗的模型对照组最重。模型对照组大鼠一般状态差，表现为活动度显著下降，进食及饮水量明显减少，消瘦明显。各组大鼠治疗后状态普遍有所改善，尤以中药等效剂量组最为明显，表现为食欲增加，活动较多，一般状态尚可。中药大剂量组和西药对照组与模型对照组相比，一般状态也有所改善，但不如中药等效剂量组明显。

3.2 各组大鼠心功能的变化结果见表1。中药等效剂量组和西药对照组各项指标之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

3.3 各组大鼠血清ANP、BNP含量比较见表2。中药大剂量组、等效剂量组和西药对照组大鼠血清ANP、BNP含量比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

4 讨论

随着对慢性心力衰竭研究的深入，专家学者发现了一种肽类物质——利钠肽类与心衰有关。人类有三种利钠肽类：心钠肽（ANP）、脑钠肽（BNP）和C型利钠肽（CNP）。ANP主要由心房分泌，生理作用为扩张血管和利尿排钠，BNP主要由心室合成和分泌[2]，生理作用与ANP相似但较弱，CNP的生理作用尚不明确。在某种意义上，慢性心力衰竭是一种神经激素细胞因子网络失衡状态。在初始的心肌损伤以后，肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAAS）和交感神经系统兴奋性增高，多种内源性的神经内分泌和细胞因子激活，加重心肌损伤和心功能恶化，进而又导致神经内分泌和细胞因子被进一步激活，从而形成恶性循环[3]。另一方面，心力衰竭时，心室壁张力增加，ANP及BNP分泌明显增加，其增高的程度与心衰的严重程度呈正相关，可以拮抗这些激素和细胞因子对心血管的不利效应。因而，无论在诊断、治疗CHF方面，还是在判断预后方面，ANP、BNP都有着极为重要的临床意义[4]。

CHF多归属于中医学“心悸”、“怔忡”、“心痹”等范畴。本研究认为CHF的基本病机为本虚标实，心气亏虚为本，血瘀为标。益气通脉饮是基于心气虚衰为CHF发病的基础、血瘀是其中心病理环节的理论认识基础上，结合临床经验而组方的。全方由黄芪、人参、红花、丹参、三七、益母草、葶苈子组成，方中重用补益心气之剂，辅以活血化瘀之品，使正复邪去，气充血行，血无“留滞”，气机调畅。

本研究结果表明，益气通脉饮能够改善大鼠的一般状况，使其食欲增加，活动灵活。中药等效剂量组、大剂量组以及西药对照组的心功能指标（ESV、LVEF、EDV、SV）同模型对照组比较均有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01），说明益气通脉饮和科素亚均能有效地改善大鼠心功能；西药对照组和中药等效剂量组之间比较无显著性差异（P＞0.05），说明益气通脉饮改善大鼠心功能的疗效与科素亚相当。中药各剂量组和西药对照组大鼠血清ANP、BNP含量均较模型对照组显著降低（P＜0.05或P＜0.01），而中药各剂量组和西药对照组之间血清ANP、BNP含量差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 各组大鼠治疗后心功能比较（±s）

表1 各组大鼠治疗后心功能比较（±s）

注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与西药对照组比较，△P＜0.05。

组别动物数（只）剂量（g/kg）LVEF （%）正常对照组ESV （mL）8 EDV （mL）81±11**SV （mL）79±21**149±16**68±29*模型对照组191±2833±58265±3454±17 8西药对照组80.004586±32**71±36**150±19**62±13*中药大剂量组816.2106±21*△53±28*△167±17**61±27△中药等效剂量组85.498±29**68±26**165±18**63±28*

表2 各组大鼠血清ANP、BNP含量比较（±s）

表2 各组大鼠血清ANP、BNP含量比较（±s）

注：与正常对照组比较，##P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.01，**P＜0.01。

组别动物数（只）剂量（g/kg）ANP（pg/mL）正常对照组8 8 8 BNP（pg/mL）38.95±8.3617.48±7.27模型对照组75.56±9.52##39.32±6.64##西药对照组42.23±5.19**21.79±9.39**中药大剂量组45.42±11.74**27.49±12.28*中药等效剂量组60.74±13.41*29.16±10.06*0.0045 8 16.2 8 5.4

目前已经证实，血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂除了改善心衰症状之外，更重要的是降低心衰患者代偿性神经-体液的不利影响，从而延缓心衰进展，降低患者的远期死亡率。益气通脉饮是否通过类似的机制，通过调节神经内分泌细胞因子以及影响利钠肽系统而改善心功能，有待于进一步的研究。

[1]王朔仁，赵明镜，王振涛，等.建立心肌梗死心气虚血瘀证和心阳虚血瘀证病症动物模型的研究.中国中西医结合杂志，2008，28 （3）：245

[2]Maekawa K，Sudoh T，Furusawa M，et al.Cloning and sequence analysis of cDNA encoding a precursor for porcine brain natrinretic peptide.Biochem Biophys Res Commun，1988，157 （1）：410

[3]Michael CA.B-type natriuretic peptide predicts death inwomen. JAm Coll Cardiol，2006，48：1808

[4]陈灏珠，钟南山，陆再英.内科学.北京：人民卫生出版社，2013：166

编辑：吴宁

R541.610.5文献识别码A

1672-397X（2014）09-0073-02

吉利（1973-），女，博士，副教授，主要从事心血管内科的临床教学与科研。lgych@163.net

2014-04-10