病毒感染与川崎病的相关性探讨

高树英，李新爱，李瑞燕

(1莒县人民医院，山东莒县276500;2济南护理职业学院)

川崎病(KD)又称皮肤黏膜淋巴结综合征，是一种病因未明，好发于5岁以下儿童的发热出疹性疾病，大多数学者认为可能是由病原微生物入侵具有遗传易感性的患儿，通过超抗原、热休克蛋白等触发体内异常免疫反应而引起［1］。流行病学调查显示其发病率逐年升高［2，3］;冠状动脉并发症发生率较高［4］。KD急性期表现与很多病毒感染的临床表现非常相近。文献报道上呼吸道感染与KD发生有关［5］;呼吸道病毒感染的KD患儿发生冠状动脉损害的机率更高［6］。2007年1月～2011年12月，我们收治KD患儿80例，现分析其病毒感染情况及其与KD发生的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2007年1月～2011年12月住院的80例KD患儿为观察组，均依据日本KD研究委员会制定的标准［7］纳入;同期住院的发热性疾病(包括口腔炎、上呼吸道感染、肺炎等)患儿100例为对照组。入选患儿男100例，女80例，年龄4个月～10岁，平均3岁1个月;两组患儿年龄比较无统计学差异。

1.2 病毒感染检测 临床收集KD患儿静脉血，离心(2 500 r/min)后去除上清液，提取沉淀细胞备用。取各组细胞各107个提取总RNA，加入1 mL裂解液，离心取上清，加氯仿，离心后取水相，加无水乙醇后离心，加去蛋白液、漂洗液，最后收集RNA，测定各组总RNA。按RT-PCR说明书加入1 μg总RNA，建立20 μL逆转录体系。PCR扩增使用总体积为20 μL的反应体系。目的基因为EB病毒、单纯疱疹病毒、冠状病毒OC43/229E和NL63、呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1和4。扩增条件为95 ℃变性3 min，95 ℃ 、30 s，60 ℃、30 s，72 ℃、50 s，25个循环，72 ℃、5 min;以 β-actin为内参;取8 μL扩增产物于1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定。实验材料:PCR扩增仪(BIO-RAD产品)，电泳仪(BIORAD产品)，凝胶成像分析仪(BIO-RAD产品)，总RNA提取试剂盒(天根公司)，逆转录试剂盒(TaKa-Ra公司)，PCR Mix酶(天根公司)。

1.3 冠状动脉病变情况观察 两组均行二维超声心动图检查，按文献［5］标准判断冠状动脉病变情况。冠状动脉病变严重程度分为四度:0度:冠状动脉正常、无扩张;Ⅰ度(轻度):冠状动脉瘤样扩张明显，但较局限，内径＜4 mm;Ⅱ度(中度):冠状动脉单发、多发或广泛性扩张，内径为4～7 mm;Ⅲ度(重度):冠状动脉巨瘤样扩张，内径≥8 mm，累及1支以上。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0软件行统计学处理，组间率的比较采用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病毒感染情况 80例患者中病毒感染阳性24例，阴性56例。观察组及对照组EB病毒阳性率分别为45%、25%，P＜0.05;单纯疱疹病毒阳性率分别为35%、30%，冠状病毒阳性率分别为18%、20%，呼吸道合胞病毒阳性率分别为25%、35%，副流感病毒阳性率分别为8%、12%，均无统计学差异。

2.2 冠状动脉损害情况 观察组17例出现冠状动脉损害，发生率为21.25%;其中Ⅰ度10例;、Ⅱ度6例、Ⅲ度1例;病毒感染阳性者(24例)与阴性者(56例)冠脉损害率分别为29.0%和17.8%，无统计学差异。

3 讨论

KD是一种好发于5岁以下儿童和婴幼儿的急性全身性血管炎性疾病。其临床特征为持续发热、眼结膜充血、不同程度的口腔黏膜炎、多形性皮疹、手足硬性肿胀伴指尖脱屑、非化脓性淋巴结炎;急性冠状动脉综合征、心肌梗死和冠状动脉血管瘤形成是其严重的并发症。

KD的病因和发病机制尚不清楚，但越来越多的证据提示KD与感染有关，其流行病学证据主要有［8］:①发病特征:呈急性自限性发作过程，具有低复发率的特点。②发病年龄:5岁以内儿童发病率明显高于5岁以上儿童，6个月以下的婴儿和成人较少患病;③发病时间:有明显的流行季节，春夏为发病高峰，有年度暴发趋势。④流行区域:发病趋向于人口分布密集的大城市，而在高寒边远地区罕见。

EB病毒是一种广泛存在的常见病原体，具有潜伏、持久、周期性复活的特点，可引起广泛的人类疾病，与传染性单核细胞增多症、Burkitt淋巴瘤及鼻咽癌等疾病密切相关。研究表明，EB病毒显性与隐性感染的比例为1∶2～1∶3;而机体免疫活性是决定感染后是否显性发病的重要因素。以上流行病学特点提示:KD与EB病毒感染均具有病原分布广泛、隐性感染率高、成人普遍具有免疫力、感染后具有保护性等特点。EB病毒感染多发生于幼儿期，与KD的好发年龄相符。KD和EB病毒感染引起的疾病均具有发热、皮疹、淋巴结肿大、上呼吸道感染的表现等特点。这些都提示KD与EB病毒感染有明显相关性。

Culora等［9］研究发现，KD患儿的心肌和冠状动脉的临床标本中检出EB病毒编码的RNA。虽并非所有KD患儿均有EB病毒感染，但KD可能起于EB病毒感染引起的异常免疫反应，当患儿再次感染EB病毒时，发病的可能性很大，考虑系T细胞对血管的潜在损害作用所致。Usta Guc等［10］报道巨细胞病毒可能与KD的发生有重要关系，其采用PCR方法在KD患儿的血清中检出了巨细胞病毒，提示巨细胞病毒感染可能为KD的诱发因素。Kim等［11］报道，冠状病毒 OC43/229E 和 NL63、呼吸道合胞病毒、副流感病毒等十余种呼吸道病毒在KD患儿和对照组儿童中的检出率未见明显差异，亦没有证据表明感染这些呼吸道病毒的KD患儿发生冠脉损害的机率增高。此与我们的研究结果相符。

本研究观察组EB病毒感染阳性率明显高于对照组，这提示EB病毒感染可能参与了KD的发病，与文献报道相符。两组单纯疱疹病毒、冠状病毒OC43/229E和NL63、呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1和4阳性率无明显差异，提示这几种病毒与KD发病无明显相关性。KD患儿病毒感染阳性者与阴性者冠状动脉损害发生率无明显差异，提示病毒感染不是冠状动脉损害发生的高危因素。

目前全球KD发病率有逐年增高趋势，且流行病学调查显示KD发生可能与感染及机体易感性有关，进一步明确与KD发病相关的病原体是今后的研究方向。

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