TS和DPD mRNA对替吉奥治疗晚期胃癌的疗效预测

郑积华

早期胃癌的临床症状不明显，确诊时往往已是晚期。替吉奥作为1种口服的氟尿嘧啶类药物具有毒副作用小，疗效可靠等优点，但是由于其临床治疗效果有较大的个体差异，因此，探寻1种对替吉奥敏感的预测因子，对指导临床用药以及提高化疗效果有非常重要的意义[1]。我们通过对晚期胃癌患者外周血中的TS mRNA以及DPD mRNA的表达情况进行检测，以探索其与替吉奥治疗晚期胃癌临床疗效之间的关系，现将结果总结报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年7月至2013年7月期间我院初治并应用口服替吉奥进行化疗的晚期转移性胃癌患者34例，所有患者均经病理学检查确诊为胃癌，影像学检查可见转移病灶。34例中男性15例，女性19例，年龄46～80岁，平均年龄(62.2±6.7)岁。所有患者ECOG评分≤2，之前并未接受过放化疗治疗，血常规、肝肾功能在化疗允许范围，无化疗禁忌，且预计生存时间为3个月以上。

1.2 方法

使用Ficoll-Hypaque法将抗凝血有核细胞分离，并将经焦磷酸二乙酯处理后的磷酸盐缓冲液洗涤2次后，按照TIANGEN公司RNA提取试剂盒上的说明书提取总RNA，并以此总RNA为RT-PCR循环的模板。具体方法参照RevertAid逆转录试剂盒上的说明书，引物序列：TS Forward primer:5'-AATCCGTCGAGCAGCGTT，Reverse primer:5'-CCCTTA CCCTTACCCTTACCCTAA;PDP Forward primer:5'-CTCCGGCTGTCACTTGGCTCTCT，Reverse primer:5'-AAGCAGTTCTTATCAGGATTTCTTTTCC。实验反应的条件为：总RNA模板在94 ℃的条件下持续30 s使其变性，退火1 min，在68 ℃的条件下延伸2 min，一共进行35个循环，循环后的产物经过1.5%的琼脂凝胶电泳进行分析。所有患者给予口服替吉奥胶囊进行治疗，每天80 mg/m2,早晚饭后各1次，连续使用14天，间隔7天，每21天为1个治疗周期，连续使用2个周期。在化疗期间，所有患者均接受相应护肝、止吐，并根据患者血细胞计数情况进行纠正贫血等治疗。于第2个周期化疗结束1周后行CT检查，对患者的病变部位进行测量，进行疗效分析。

1.3 疗效评定标准

采用实体瘤疗效评价RICIST标准[2]进行疗效评价：CR(完全缓解)：CT显示原有病变组织完全消失超过1个月；PR(部分缓解)：原有可测量病灶最长径之和缩小≥30%超过1个月；SD(病情稳定)：原有可测量病灶最长径之和缩小<30%或者增大<20%；PD(病情进展)：出现新病灶或原有可测量病灶最长径之和增大≥20%。以CR+PR统计有效率(RR)；无效为SD+PD。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 替吉奥治疗的效果

34例患者经过替吉奥治疗后CR 6例，PR 10例，SD 11例，PD 7例，有效率为47.06%。

2.2 替吉奥疗效与TS mRNA表达水平间的关系

按照所有患者检测出的TS mRNA的平均值2.61为标准，本研究规定：TS mRNA值≥2.61为TS mRNA高表达，<2.61为TS mRNA低表达，治疗有效患者的TS mRNA值为(1.57±0.31)，无效患者的TS mRNA值为(2.83±0.43)，差异有统计学意义(χ2=4.378，P=0.034)。

2.3 替吉奥治疗效果与DPD mRNA表达水平之间的关系

按照所有患者检测出的DPD mRNA的平均值1.55为标准，本研究规定：DPD mRNA值≥1.55为DPD mRNA高表达，<1.55为DPD mRNA低表达，治疗有效患者的DPD mRNA值为(1.15±0.37)，无效患者的DPD mRNA值为(0.98±0.22)，差异无统计学意义(χ2=3.637,P=0.055)。

3 讨论

胃癌在我国各种消化道肿瘤中的发病率较高，早期诊断以及行根治性手术具有良好的临床效果，但是早期胃癌的临床症状不明显，少数患者仅有恶心、呕吐等类似胃溃疡的消化道症状，部分患者在出现体重减轻与疼痛症状前来就诊时已经是晚期。替吉奥是一种胃癌晚期患者化疗所用到的口服氟尿嘧啶类药物，由氟嗪酸钾、吉莫斯特以及替加氟按照物质量1∶0.4∶1的比例组合而成[3]，其中，替加氟是5-氟尿嘧啶的前体药物，在体内转化成5-氟尿嘧啶后可以抗肿瘤；氟嗪酸钾可以影响5-氟尿嘧啶在肠道内的分布情况，进而降低消化道的毒副作用；吉莫斯特则抑制5-氟尿嘧啶的分解，提高其抗肿瘤活性[4-5]。陈静等[6]通过研究发现替吉奥治疗晚期胃癌的疗效肯定，而且毒副作用较轻，患者的耐受情况较好。TS 作为催化5-氟尿嘧啶的活性代谢产物dUMP的必要DNA聚合酶，它可以影响DNA的合成，但也可以使5-氟尿嘧啶的治疗效果下降，TS高水平表达的患者预后往往较差。相关研究表明[7]，TS mRNA以及TS蛋白水平与5-氟尿嘧啶的治疗效果呈负相关。日本学者Miyazaki等[8]的研究也证实了TS mRNA的表达水平可以作为替吉奥化疗效果的预测因子。DPD是人体内分解代谢5-氟尿嘧啶的限速酶，人体中仅有1%～3%的5-氟尿嘧啶进行了合成代谢并参与抗肿瘤反应，这是由于大量的5-氟尿嘧啶被DPD所灭活，因此，DPD的合成与分解与5-氟尿嘧啶的抗肿瘤效应密切相关。大量的研究结果显示[9-10]，DPD的生物活性与5-氟尿嘧啶的治疗效果呈负相关，但是吉莫斯特则抑制DPD作用下的5-氟尿嘧啶分解，因此，DPD能否作为替吉奥化疗效果的预测因子目前还没有明确的报道。在本研究中，替吉奥治疗有效患者的TS mRNA表达水平与平均值相比呈一种低表达的状态，无效患者的TS mRNA的表达水平则较高；替吉奥治疗有效与无效患者的DPD mRNA值与均值相比均较低，且无显著差别。因此，外周血中TS mRNA低表达的患者对口服替吉奥化疗的敏感性高，疗效较好，其表达水平可以作为替吉奥化疗效果的预测因子，但口服替吉奥化疗的疗效与外周血中DPD mRNA的表达情况无显著相关。

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