戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇治疗对前列腺癌患者血清VEGF和miR—34a的影响

李霖　韩晨东

[摘 要] 目的：探讨戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇治疗对前列腺癌患者血管内皮生长因子（VEGF）和miR-34a的影响。方法：选择2007年12月-2012年6月收治的晚期前列腺癌患者83例为研究对象，采用戈舍瑞林联合比卡鲁胺的间歇内分泌治疗，治疗9个月后评价疗效。测定治疗前后患者血清的VEGF和miR-34a。结果：患者的前列腺体积和血清前列腺特异性抗原（PSA）在治疗后均有明显减少，与治疗前比较差异显著（P<0.01）；前列腺体积变化率平均为36.4%，PSA抑制率为63.6%。治疗后患者血清VEGF均明显降低（P<0.01），治疗后血清miR-34a明显升高（P<0.01）。结论：戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇内分泌治疗可以明显减少前列腺癌血清VEGF，提高miR-34a的表达。

[关键词] 间歇治疗；前列腺癌；血管内皮生长因子；miR-34a

中图分类号：R737 文献标识码：B 文章编号：2055-5200（2014）02-045-03

在欧美国家前列腺癌的发病率较高[1]。近年来，我国前列腺癌的发病率也呈上升趋势，严重威胁男性的健康，大部分患者发现时已是晚期，此时手术根治的机会多已失去，往往需要采取以内分泌治疗为主的姑息疗法进行治疗。国内外学者研究发现，前列腺癌发病是与雄激素相关联的，比卡鲁胺属于非甾体类抗雄激素药物，可与雄性激素受体竞争性地结合。戈舍瑞林是一种促黄体生成素释放激素类似物的药物，可降低男性血清睾丸酮含量。因此，二者均对前列腺癌有治疗作用。血管内皮生长因子（VEGF）是一种多功能细胞生长因子，能特异性作用于血管内皮细胞，能够刺激血管内皮细胞增殖、促进生成肿瘤血管，在其作用下肿瘤增殖、侵袭及转移能力增强。microRNA是一种内源性非编码的短链RNA，它可以对肿瘤细胞发挥作用，其表达可以抑制肿瘤细胞的生长[2]。本研究主要采用戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇治疗，观察前列腺癌患者血清VEGF和miR-34a的变化，进一步研究其联合治疗的机理。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2007年12月至2012年6月我院收治的晚期前列腺癌患者83例作为研究对象，年龄65～83岁，平均年龄（75.4±8.1）岁，临床表现为尿频、排尿困难及骨痛等。经多普勒彩超、直肠指检、前列腺CT及MR、血前列腺特异性抗原（PSA）等检查，诊断为前列腺癌；前列腺穿刺活检进一步证实为前列腺癌。排除标准：（1）已接受抗雄激素治疗、雌激素治疗、睾丸切除术、酮康唑治疗、黄体生成素释放激素类似物治疗和细胞毒药物治疗；（2） 前列腺放射试验前3月内接受治疗者；（3） 5年内曾患前列腺癌以外的其他恶性疾病；（4） 丙氨酸转氨酶值高于正常值上限的1.2倍或胆红素高于正常值上限1.5倍；（5） 对研究药物过敏、患有其他疾病、药物滥用或酗酒等影响研究进行行为。所有治疗均征得患者及家属同意，并经医院医学伦理委员会批准。

1.2 治疗方法

采用间歇内分泌治疗，给予戈舍瑞林1次3.6mg，28日1次，比卡鲁胺1次50mg，1日1次；用药持续6～9个月，血PSA下降至4ng/mL以下，维持3个月后停药，进入间歇期，当血PSA上升至4ng/mL时，再次开始治疗，直至再次使血PSA降至4ng/mL，以此类推进入下一周期。

1.3 疗效评价

前列腺体积的变化经直肠超声检查，前列腺体积=前列腺左右径×前后径×上下径×0.52。前列腺体积变化率（%）= 前列腺治疗开始前体积-前列腺治疗后体积/前列腺治疗开始前体积。PSA的抑制率（%）= 开始治疗前PSA值-治疗后PSA值/开始治疗前PSA值。

1.4 血清VEGF和miR-34a的测定

清晨空腹抽取静脉3mL，静置30min，以2000r/min离心15min分离血清，将其吸取放入Ependoff管中，置于-20℃冰箱保存备检。酶联免疫吸附法测定VEGF。聚合酶链式反应测定血清miR-34a。

1.5 统计学方法

采用SPSS 11.0统计软件对实验数据进行整理与分析，计量资料进行正态性检验，正态分布数据用（x±s）表示，偏态分布数据比较前经变量转换为正态，用中位数与四分位数间距表示，两样本均数比较的t检验采用成组设计。检验水准定为α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后疗效比较

患者的前列腺体积和血清PSA在治疗后均有明显减少，与治疗前比较差异明显（P<0.01）；前列腺体积变化率平均为36.4%，PSA抑制率为63.6%。见表1。

表1 治疗前后疗效比较（x±s）

时间 例数 前列腺体积（cm3） PSA（ug/L）

治疗前

治疗后 83

83 62.5±10.8

31.8±7.23* 36.7±8.1

2.7±0.6*

与治疗前比较*P<0.01

2.2 治疗前后血清VEGF和miR-34a变化

如表2所示治疗后患者血清VEGF均明显降低（P<0.01），治疗后血清miR-34a明显升高（P<0.01）。

表2 治疗前后血清VEGF和miR-34a变化 （x±s）

时间 例数 VEGF（pg/mL） miR-34a（相对量）

治疗前

治疗后 83

83 447.3±97.2

125.4±42.7* -6.67±1.03

-4.07±0.85*

t

P 27.6233

0.0000 17.7373

0.0007

3 讨论

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一，常见于老年男性。近年来我国前列腺癌的发病率有逐年上升的趋势。在治疗过程中对患者的年龄、全身状况、病理分级及临床分期等因素均应综合考虑[3]。手术去势疗法或者手术根治仍是目前常规的治疗方法，但单纯采用手术治疗肿瘤易复发，癌细胞从雄激素依赖性转为非依赖性或雄激素阻断不完全是复发主要原因。对雄激素的依赖前列腺内细胞各不相同，大多数癌细胞依赖于雄激素，雄激素转变成双氧睾酮，其结合雄激素受体后能使前列腺细胞分裂受到激活，前列腺细胞发生异常无序生长导致癌变。因此，阻断雄激素就可抑制肿瘤的生长。美国国立综合癌症网络（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）2010指南建议，内分泌治疗或化疗应被应用于晚期（转移性）患者。到目前为止前列腺癌的内分泌治疗已有60多年历史，是治疗中晚期前列腺癌的主要途径。

在前列腺癌发展中，人体内双氢睾酮水平正常与否具有重要作用。人体内大部分双氢睾酮约90%来源于睾丸，小部分约10%来源于肾上腺，因此，为了更有效的阻断雄激素对前列腺的影响，睾丸来源雄激素在被去除的同时，肾上腺来源的雄激素也需被阻断。戈舍瑞林是一种多聚缓释植入剂，逐渐在体内进行生物降解，是促黄体生成素释放激素的类似物，脑垂体促黄体生成素合成被抑制，可降低男性血清睾酮水平。比卡鲁胺是一个竞争性的雄激素受体的拮抗剂，并且其血浆消除半衰期长，服用方便。戈舍瑞林与比卡鲁胺联合应用可使包括肾上腺皮质来源的雄激素得到去除，雄激素完全被抑制。二者在临床联合应用以持续性内分泌治疗为多，可能导致生活质量下降，如疲劳、智力下降、性欲低下、勃起功能障碍、肌力降低、脂肪聚积、心理障碍、精神抑郁、生理活动和整体活动能力降低，患者的相关治疗费用同时增加[4]。近期文献报道，心血管疾病的发病率和死亡率在内分泌治疗后可能增加[5]。新诊断的前列腺癌患者在接受激素治疗1年以上后，较接受12个月以内激素治疗的患者患心血管疾病的风险增加了20%。同时，激素治疗使患者对胰岛素的敏感性降低，低密度脂蛋白及甘油三酯进一步升高。因而近年来，间歇性内分泌治疗受到高度重视[6]，间歇性疗法由于使用激素减少，上述副作用得以减轻。间歇性内分泌治疗的理论基础是：间断进行全雄激素抑制，通过补充雄激素，存活的肿瘤细胞进入到正常的分化途径，凋亡的能力得到恢复。

PSA是敏感的前列腺癌标志物，分子量约为34 000Da，PSA是一种由前列腺腺泡及导管上皮分泌的蛋白酶，PSA值与临床分期、前列腺癌体积和病理分级有良好的相关性。作为临床常用的检测指标，PSA 可以用于前列腺癌诊断及判断内分泌治疗的疗效及预后[7]。本研究显示，患者的前列腺体积和血清PSA在治疗后均有明显减少，与治疗前有明显差异（P<0.01）；前列腺体积变化率平均为36.4%，PSA抑制率为63.6%，因此，采用戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇治疗前列腺癌是有效的。

VEGFs是首先从牛垂体滤泡星形细胞体外培养液中纯化出来的，血管内皮细胞的有丝分裂活性可以被其加强[8]。现有研究表明：VEGF是特异性最高、作用最强的血管生成调控因子，它可特异性地结合血管内皮细胞，能使血管通透性得到增强，进一步刺激血管内皮细胞增殖，并促进血管内物质的渗出，内皮细胞的凋亡也可以被其抑制，蛋白酶被激活，因此更加有利于降解细胞外基质，诱导新生血管的生长及延伸，为迁移内皮细胞和转移肿瘤细胞提供形态学基础[9-10]。miRNAs可以调节人类近30%的基因表达，可以起到癌基因或者肿瘤抑制基因的功能[11]。其在一些基础细胞进程中均扮演着极为重要的角色，如脂肪代谢、细胞生长周期调控、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、血细胞生成等。研究表明，miRNA均存在于人类及动物的血清和血浆中。血清miRNA的表达在同一种物种的不同个体中也是稳定一致的，miRNA的稳定性不被轻易影响，可作为潜在新型疾病标志物。多种肿瘤和肿瘤细胞系中都存在miR-34a的表达缺失或下调，miR-34a表达水平减少的原因之一为miR-34a启动子的高频率甲基化[12]。另外，肿瘤抑制基因P53也可以诱导miR-34a的表达，肿瘤细胞的生长不仅在高表达miR-34a后受到抑制，细胞周期和细胞凋亡的基因产物同样也可以被其抑制[13]。本研究显示，治疗后患者血清VEGF均明显降低（P<0.01），治疗后血清miR-34a明显升高（P<0.01），因此，戈舍瑞林联合比卡鲁胺间歇内分泌治疗可以减少前列腺癌的血管生成，减少肿瘤生长，减慢肿瘤转移的发生。

参 考 文 献

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