芪连肠宁胶囊质量标准薄层鉴别方法的研究

徐金凤 孙 妍 张洪娟

（黑龙江澳利达奈德制药有限公司·庆安 152400）

芪连肠宁胶囊制剂处方来源于临床经验方剂，并经过多年疗效观察总结而制成的现代有效中药制剂，由黄芪、党参、黄连、牡丹皮等十余味中药组成，具有温肾固肠，健脾益胃，调气行血，祛湿排毒之功效。主治慢性溃疡性结肠炎，慢性顽固性结肠炎（过敏性结肠炎），直肠炎等症。为保证临床用药安全、疗效稳定，通过薄层层析法建立了制剂中药味的鉴别方法，以有效保证制剂质量。

1 仪器与药品

薄层层析缸，紫外光灯；黄芪甲苷，芍药苷，甘草苷、盐酸小檗碱对照品，大黄对照药材均购自中国药品生物检定所；药品：参芪肠宁胶囊自制；薄层层析用硅胶购自于青岛海洋化工厂；所用试剂均为分析纯。

2 芪连肠宁胶囊质量标准中薄层鉴别方法

2.1 黄芪的鉴别

取本品内容物10g，加甲醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，5g，内径10～15mm）上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗涤2次，每次20ml；弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将处方中去掉黄芪，按成品制备工艺制成缺黄芪阴性样品，以下操作同供试品前处理方法，制成黄芪阴性对照液，照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取对照品溶液2μl，供试品溶液及阴性对照液各10～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的粉红色斑点，而阴性液色谱对应处则无相同斑点，说明阴性无干扰。

2.2 牡丹皮的鉴别

取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将处方中去掉牡丹皮，按成品制备工艺制成牡丹皮阴性样品，以下操作同鉴别2.1供试品前处理方法，制成牡丹皮阴性液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取鉴别1.1项下供试品溶液、对照品溶液及阴性对照液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热数分钟，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性液色谱则无相应的斑点，说明阴性无干扰。

2.3 黄连的鉴别

取本品内容物5g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥至2～3ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的对照品溶液。将处方中去掉黄连，按成品制备方法制成黄连阴性样品，以下操作同供试品溶液方法制成黄连阴性对照液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述四种溶液各5～10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（7：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个荧光斑点，而阴性液色谱则无相应的斑点，说明阴性无干扰。

2.4 大黄的鉴别

取本品内容物5g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸1ml，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材1g，同法制成对照药材溶液。将处方中去掉大黄，按成品制备工艺制成大黄阴性样品，以下操作同供试品溶液制备方法制成大黄阴性对照液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性对照液各5～10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙黄色斑点，置氨蒸汽中熏后，斑点变为红色，而阴性液色谱则无相应的斑点，说明阴性无干扰。

2.5 甘草的鉴别

取本品内容物10g，加正丁醇60ml，超声处理30分钟，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，再加稀盐酸调节pH值至2～3，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。将处方中去掉甘草，按成品制备工艺制成缺甘草阴性样品，以下操作同供试品前处理方法，制成甘草阴性对照液。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液及阴性对照液各10～15μl，对照品溶液5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（10：2：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，而阴性液色谱则无相应的斑点，说明阴性无干扰。

3 讨论

本产品的制剂工艺设计以临床多年用药经验为基础，根据处方中各药所含成分和理化性质，参考各药味现代药理研究结果，将本品制成胶囊剂[1.2]。在质量标准的研究中，分别建立黄芪、牡丹皮、黄连、大黄、甘草5味药薄层定性鉴别方法[3.4]，结果表明：薄层斑点分离好，阴性无干扰，所选方法专属性强，可作为制剂的质量标准项下鉴别方法，为开发复方中药芪连肠宁胶囊提供了质量研究的基础资料。

[1]雷载权，张廷模.中华临床中药学（上、下卷）[M].北京:人民卫生出版社，1998

[2]江苏新医学院《中药大辞典》编写组，中药大辞典（上、下卷，附编）[M].1995

[3]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究[M].北京，中国医药科技出版社.1994

[4]国家药典委员会，中华人民共和国药典.2005年版一部