功能性腹泻脾虚证动物模型的制作与评价思路初探※

2014-04-02白世敬李峰马捷宋月晗刘燕韩晨霞

河北中医 2014年4期

白世敬李峰马捷宋月晗刘燕韩晨霞

（北京中医药大学2011级硕士研究生，北京 100029）

功能性腹泻作为一种功能性胃肠疾病，临床上较为常见。脾虚证是中医概念，是一种常见的中医证候。脾虚证可分为以消化不良为主要症状的脾虚证和以腹泻为主要症状的脾虚证，功能性腹泻的临床表现与以腹泻为主要症状的脾虚证很相似，二者皆可出现便溏、腹泻等症状。“功能性胃肠病罗马Ⅲ诊断标准”中规定功能性腹泻的诊断标准为:至少75%的排便为不伴腹痛的松软（糊状）或水样便，诊断前症状出现至少6个月，近3个月症状符合以上标准［1］。脾虚证诊断标准为:①主症:食少纳呆，体倦乏力，食后或午后腹胀，大便异常（溏、烂、先便后溏、时溏时硬）;②次症:神疲懒言，口淡不渴，腹痛绵绵，恶心呕吐，脘闷，肠鸣，面色萎黄，水肿，排便无力，舌质淡，舌体胖或有齿印，苔薄白，脉细弱。具备主症2项或主症1项加次症2项即可诊断［2］。脾虚证病程较长，与功能性腹泻在病程上也具有一致性。在临床中，功能性腹泻往往伴随脾虚证。因而，从病证结合角度研究功能性腹泻脾虚证有重要意义，而从病证结合角度对功能性腹泻脾虚证动物模型进行研究十分有必要。

1 功能性腹泻动物模型的制作与评价现状

1.1 功能性腹泻动物模型的制作现状功能性腹泻是一种常见的功能性胃肠疾病，国外研究主要集中在临床疗效观察。由于其病因未明，腹泻不伴随腹痛，且要排除胃肠或全身器质性疾病引起的腹泻，如炎症性肠病、贫血、甲状腺疾病等［3］，故模型制作困难，至今尚未形成成熟的动物模型。

1.2 功能性腹泻动物模型的评价现状功能性腹泻动物模型制作方法不成熟，评价标准也相应缺乏。评价功能性腹泻动物模型时一般以症状表现为主。在临床研究中，Scrimshaw NS等［4］认为肠道乳糖酶的缺乏导致乳糖吸收率低是引起慢性腹泻的原因之一，王玉玲等［5］认为肠道菌群失调参与了功能性腹泻的发病，但是这些说法并未在动物实验中验证，因而也无法作为客观指标用于功能性腹泻动物模型的评价。故功能性腹泻动物模型的客观指标评价目前尚无定论。

2 脾虚证动物模型的制作与评价现状

2.1 脾虚证动物模型的制作现状脾虚证作为一种中医证候概念，国内研究较多，临床研究及实验研究都到了一个较高层次。根据制作方法的不同，脾虚证动物模型制作方法可分为以下几种:中医病因造模法、理化因素造模法、复合因素造模法。其中中医病因造模法分为中医病因单因素造模法和中医病因多因素造模法。中医病因单因素造模法包括苦寒泻下法（使用苦寒药物如番泻叶［6］、大黄［7］、承气汤［8］等致泻）、耗气破气法（使用耗气破气药物如大黄加芒硝［9］等致泻）、饮食失节法（双日猪脂加单日甘蓝［10］使饮食失节伤脾致泻）等;中医病因多因素造模法如饮食失节加耗气破气法［11］、劳倦过度加苦寒泻下法［12］、饮食失节加劳倦过度加苦寒泻下法［13-14］等。理化因素造模法是运用药物毒副作用或其他理化手段使动物出现类似脾虚证的症状，如肌肉注射利血平法［15］、胃饲秋水仙碱法［16］、X射线照射法［17］、乙酸灌肠法等。复合因素造模法是结合中医病因造模法与理化因素造模法，如苦寒泻下加乙酸灌肠法［18］等。

以上动物模型制作方法为研究脾虚证起了重要作用，但也存在许多争议和问题。如动物模型的自愈性强，对施加的各种造模因素有过强的依赖性，一旦去除造模施加因素，模型便很快自然恢复，与临床所见的脾虚证不经治疗难以自愈的特点相违背。中医病因具有多重性，故造模时所采用的病因如过劳、饮食不节、饮食偏嗜，以及灌服大黄、番泻叶、承气汤等造模因素并不单独伤脾，而是五脏同受其害。理化因素造模虽然可以出现类似脾虚证的临床表现，但是其不符合中医理论，其副作用对人体的影响是否与中医脾虚证相同，也有待进一步深入研究［19］。

2.2 脾虚证动物模型的评价现状脾虚证动物模型的评价主要是以体征表现为主，如最早进行脾虚证造模的北京师范大学生物系消化生理科研组认为动物出现体质量减轻，并伴有便溏、纳呆、消瘦、少动、四肢无力、脱肛、毛发枯涩、畏寒、耐寒力低等症状为脾虚证造模成功的标志。此后的脾虚动物实验多沿用此标准。在实验研究中，研究人员也试图寻找脾虚证的客观指标，在集中研究探索消化道及消化相关脏器组织形态、内分泌及功能变化、血液及微循环改变、供能系统及肌组织形态学变化后发现，脾虚时，大鼠的血乳酸值［20］、尿D-木糖排泄率、唾液淀粉酶活性［21］会出现相应变化，对脾虚证的诊断具有一定价值。同时，也有实验人员从实验大鼠Th1/Th2细胞因子［22］、5-羟色胺（5-HT）及其受体变化［23］等方面进行研究，也取得了一些成果。

总体上看，脾虚证动物模型的评价缺乏客观量化标准，客观指标繁杂且特异性差，未能形成客观、统一的评价标准体系。建立脾虚证动物模型客观评价体系势在必行。

3 从病证结合角度讨论功能性腹泻脾虚证动物模型的制作

国外没有对功能性腹泻脾虚证的研究，国内对脾虚型功能性腹泻虽有研究，但研究局限于临床，并没有进行动物实验，故从病证结合角度研究功能性腹泻脾虚证动物模型的制作对于研究功能性腹泻脾虚证具有重要意义。

从病证结合角度出发，功能性腹泻脾虚证动物模型制作的基本原则为:动物模型从病因、症状、病程上兼具功能性腹泻及脾虚证的特点。

由于功能性腹泻病因未明，在制作动物模型时可以参考中医脾虚证病因。脾虚证的病因多样，有情志失调、劳倦过度、饮食不节等，但由于中医学病因具有多重性，伤脾同时多五脏同伤，故在造模时应纯化病因，分清饮食失节、劳倦过度、情志失调等病因在导致脾虚证过程中的主次关系，优选纯化造模因素，根据其发病规律进行复合造模，同时注意多元化造模因素的层次性、动态性，尽可能使其不确定性降至最低［24］。

在症状上，功能性腹泻脾虚证须兼有功能性腹泻与脾虚证的临床表现。即其动物模型须具备至少75%的排便为松软（糊状）或水样便，动物出现体质量减轻、纳呆、消瘦、少动、四肢无力、毛发枯涩等症状。

病程对功能性腹泻脾虚证动物模型的制作有较高要求。功能性腹泻与脾虚证病程都较长，在造模时应以人与动物寿命长度比例要求造模时间，使动物模型病程与人类功能性腹泻“诊断前症状出现至少6个月，近3个月症状符合以上标准”时间同比例。在造模时，不仅要求症状符合病证要求，也要使症状持续时间符合病程要求。

4 从病证结合角度探讨功能性腹泻脾虚证动物模型的评价

功能性腹泻脾虚证动物模型评价的基本要求为:①其病因、症状、病程符合功能性腹泻与脾虚证的特点;②参考临床研究可能存在的客观指标对动物模型进行检测;③应用临床有效药物对模型进行反证，药物有效。

功能性腹泻脾虚证动物模型病因上要符合中医脾虚证病因;在症状上，功能性腹泻脾虚证动物模型要兼具功能性腹泻与脾虚证的症状表现;在病程上，动物模型要与人类功能性腹泻“诊断前症状出现至少6个月，近3个月症状符合以上标准”时间同比例。需要注意的是，功能性腹泻临床上诊断要求“至少75%的排便为不伴腹痛的松软（糊状）或水样便，诊断前症状出现至少6个月，近3个月症状符合以上标准”，在动物实验中，腹泻、便质及病程都可以通过观察计算数值，但腹痛为主观感受，这就要求在评价模型时要采用一定方法确定是否存在腹痛。功能性腹泻诊断时要排除胃肠或全身器质性疾病引起的腹泻，故要对动物模型进行全面的检查，排除胃肠及全身器质性疾病。

参考临床研究可能存在的客观指标对动物模型进行检测:由于功能性腹泻临床指标欠缺，故动物模型指标检测可偏重脾虚证的客观指标，如选择脾虚证弱阳性指标乳酸值、尿D-木糖排泄率、唾液淀粉酶活性等。

反证模型:临床上，治疗功能性腹泻常用药物有天然蒙脱石粉剂［25］、益生菌［26］等，临床验证有效。中医治疗功能性腹泻常用药物有加味乌梅汤［27］、金匮肾气丸［28］、四神丸合香砂六君子汤［29］、参苓白术散［30］、参苓白术散合理中汤［31］、痛泻要方［32］等，临床验证有效。其中治疗脾虚型功能性腹泻的药物如参苓白术散等可作为反证功能性腹泻脾虚证的药物施之于功能性腹泻脾虚证动物模型，如有效，则可视为模型制作成功。

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