Y染色体Amelogenin基因变异1例

曹志华 孙亚男 唐立冈 刘延明 崔 文Δ

（1济宁市公安局刑侦支队，山东济宁272067；2济宁医学院司法鉴定中心，济宁272067；3汶上县公安局刑侦大队，汶上272500；4微山县公安局刑侦大队，微山277600）

1 案例资料

1.1 案情简介

2009年03月05日，某市郊区发生一起强奸案，侦查人员在现场提取到受害人岳某的内裤，与犯罪嫌疑人张某的血样一并送检。

1.2 检测过程

1.2.1 确证试验 剪取受害人岳某内裤裆部的适量可疑斑迹，经PSA试纸条检验为精斑。

1.2.2 DNA提取 采用差异裂解法提取内裤裆部检材的可疑精斑DNA。采用ID试剂盒对提取的模板DNA进行PCR复合扩增，扩增产物经3130型（ABI）遗传检测分析仪进行检测分析，得到上述检材的基因分型结果，见表1。

表1 STR分型结果

经过比对发现，可疑精斑与张某血样检出的DNA分型在D8S1179、D21S11等15个基因座上完全相同，Amelogene基因分型均表现为XX（女性？）。

检案人员再次提取受害人岳某的血样送检，其DNA分型与可疑精斑DNA分型不同，排除二者为同一个体所留。提取犯罪嫌疑人张某的父母和妻子、女儿的血样送检，其基因分型结果见表2。

表2 STR分型结果

上述DNA分型结果比对发现，张某与其父母在D8S1179、D21S11等15个基因座符合孟德尔遗传规律；同样，张某之女与张某、张某之妻之间的遗传关系也符合孟德尔遗传规律。张某之父和张某一样，Amelogene基因分型表现为XX。再次将张某之父与张某的血样DNA及可疑精斑DNA做Y染色体的STR分型检测，结果见表3。

表3 Y－SRT分型结果

G－DYS19G－DYS385Y－DYS393Y－DYS391Y－DYS439Y－DYS835 13 15／22 13 9 11 22 13 15／22 13 9 11 22 13 15／22 13 9 11 22 Y－DYS392 R－Y－GATA－H4 R－DYS437 R－DYS438 R－DYS448 14 10 14 12 19 14 10 14 12 19 14 10 14 12 19

上述Y－STR分型结果比对发现，张某之父、张某、可疑精斑均来自同一父系。

经亲缘关系鉴定和Y－STR检验，最终确定受害人内裤上的可疑精斑与张某的DNA分型一致，张某即是本案犯罪嫌疑人。

2 讨论

应用PCR方法鉴定性别已被证实多年。目前被法医DNA实验室广泛采用的性别分型方法是Amelogenin系统。Amelogenin是编码牙釉质蛋白的基因，为X、Y染色体共有，AmelX－gene大小为2872bp，定位于X染色体p22区域；AmelY－gene大小为3272bp，定位于Y染色体p12.2区域[1]。最早的扩增Amelogenin基因的特异性引物是由英国法庭科学服务部设计[2]。这些引物可连接于X染色体Amelogenin基因内含子1中6bp缺失的侧翼，使用AmpFlSTR试剂盒引物扩增X和Y染色体课分别获得106bp和112bp的产物。这种检测方法非常灵敏，低DNA模板量或女性DNA多于男性DNA的情况下均能得到良好的分型结果，而且Amelogene基因可以与STR基因座复合扩增。

然而，在法医学与临床医学的性别鉴定中，供体与受体性别不一致的骨髓移植成功个体的性别检测须谨慎，因为该种情况下受体的血细胞性别检测结果与供体一致而体细胞性别检测结果与本人一致[3]。此外，Y染色体Amelogenin的稀有缺失可导致无法得到Y染色体扩增产物[4]，类似AmelY基因变异的报道还有很多，而且一些学者认为这是由引物结合区的某一处突变导致的，与AmelY基因序列无关[5－7]。意大利曾报道了2例AmelY基因缺失的案例[8]，日本也曾报道了1例同一家族中4名男性均缺失AmelY基因的案例[9]。Tozzo等认为AmelY基因变异出现的频率具有群体特异性[10]。

本案例中，经Amelogene基因扩增检测发现，张某之父、张某的基因分型中只检出AmelX－gene，AmelY－gene缺失。显然，AmelY－gene发生了基因变异，而且这种变异可以遗传给下一代。此种情况在实际检案中比较少见，若扩增之前忽略了查找精子的步骤，极易误认为扩增出的是受害人（女性）的基因分型，从而延误案件的侦办或使案件最有力的直接证据缺失。有学者提出增加Y染色体性别决定序列的扩增来避免此类情况的发生[10]，但是因其无法与其他STR同时复合扩增而难以推广。因此，在今后的检案工作中需要办案人员综合分析，结合案情谨慎认真的处理相关生物检材，从而避免错误的发生。

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[3]von Wurmb－Schwark N，Bosinski H，Ritz－Timme S.What do the X and Y chromosomes tell us about sex and gender in forensic case analysis？[J].ForensicLeg Med，2007，14：27－30.

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