中青年缺血性脑血管病患者MMP－9和LPA与颈动脉粥样硬化的关系

谭 莹 曾 静 王 磊

湖北医药学院附属太和医院 1）检验部 2）体检中心 3）神经内科 十堰442000

目前，我国脑血管疾病患者呈现年轻化趋势，每年新发生的脑卒中患者中10%为45岁以下的中青年，颈动脉粥样硬化以及不稳定斑块的破裂和脱落是引发缺血性脑卒中最重要的危险因素。如何为临床提供早期预测及防治的检测手段成为大家研究的热点。溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid，LPA），是近年来发现的一种在动脉粥样硬化与缺血性心脑血管病发生过程中起核心作用的脂类分子［1］，通过导致内皮细胞屏障的结构和功能改变促进动脉粥样硬化早期进程。国内外多项研究表明，基质金属蛋白酶－9（MMP－9）与动脉粥样硬化斑块不稳定性相关。本研究就中青年缺血性脑血管病患者颈动脉粥样硬化斑块及硬化程度与以上两种相关因子的浓度进行分析，旨在及时了解颈动脉内膜和斑块的稳定情况，为中青年缺血性脑卒中事件的发生提供防治依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选择2012－02—2013－03我院收治的164例中青年缺血性脑血管病患者，男86例，女78例；年龄27～47岁，平均（37.4±6.7）岁。符合全国第4届脑血管病学术会议修订标准［2］，并经颅脑CT或MRI证实。排除心脑血管疾病、糖尿病、肿瘤、严重肝肾功能障碍、手术、外伤及近有感染史者。60例正常对照组均为我院体检中心公务员体检健康人群，男30例，女30例；年龄28～45岁，平均（35.4±5.5）岁。

1.2 方法及仪器

1.2.1 血液检测：所有受检者于清晨采集空腹静脉血3 mL，肝素钠抗凝，及时分离血浆。采用上海富众生物科技公司生产的试剂盒，ELISA法检测血浆MMP－9和LPA，操作步骤严格按照试剂盒操作步骤进行。低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）采用直接法，高敏C反应蛋白（hs－CRP）采用免疫比浊法，使用日本OLYMPUYS AU5400全自动生化分析仪检测，试剂及质控品均由上海科华生物有限公司提供。

1.2.2 颈动脉超声检查：采用以色列RIMED公司生产的全数字经颅超声＋二维超声模块超声诊断仪，探头频率8 MHz。受检者取平卧位，头部偏向检查区对侧，充分伸展颈部，沿胸锁乳突肌外缘先横切再将探头旋转90°做纵切扫查，依次显示颈总动脉及分叉部、颈内动脉起始处及颈外动脉、椎动脉，测量颈动脉内膜－中层厚度（IMT）。正常颈总动脉IMT＜1.0mm，将IMT≥1.0mm视为粥样硬化斑块形成。

1.2.3 斑块的病理学分型：①扁平斑：为早期少量脂质沉积在内膜，形成条带线状回声，贴附在内膜上形成内膜局限性增厚，厚度＜2mm，病变处动脉血管内膜回声增强，连续性差，有中断现象。②软斑：随着病情发展，纤维组织增生及钙盐沉积，斑块内出血，血栓形成，斑块突出于管腔内，局部显示不同程度的混合性回声或均匀的弱回声，表面有连续的回声轮廓及其光滑的纤维帽，为凸起的厚度＞2mm。③硬斑：则表现为斑块高低不平，强回声，后伴声影，伴有声衰减。④溃疡斑：指斑块表面溃疡形成，斑块较大，基底较宽，表面出现凹凸。超声显示为“火山口”状。软斑块及溃疡型斑块为易损斑块，扁平斑块及硬斑块为稳定斑块。

1.3 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两均数比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

通过颈动脉超声检查，将缺血性脑血管病患者与对照组检出颈动脉动粥样硬化斑块的比率进行比较：缺血性脑血管病组检测164例，其中检出颈动脉动粥样硬化斑块83例，斑块的发生率为50.6%；对照组60例检出颈动脉动粥样硬化斑块8例，发生率为13.3%，可见，缺血性脑血管病组的粥样硬化斑块发生率明显高于对照组（P＜0.01）。将164例缺血性脑血管病患者根据颈动脉超声检查结果，按照病理学分型，将其分为无斑块组、稳定斑块组、易损斑块组，与正常健康对照组间的血浆MMP－9和LPA浓度及相关指标浓度进行比较。易损斑组浓度较无斑块组及稳定斑组都有显著升高（P＜0.01）；稳定斑组较无斑块组血浆MMP－9和LPA浓度也有明显增高（P＜0.01）。见表1。

表1 各组血浆MMP－9和LPA的浓度及相关指标比较 （±s）

表1 各组血浆MMP－9和LPA的浓度及相关指标比较 （±s）

注：与健康组比较：，＊P＜0.01，△P＜0.05；与无斑块组比较，﹟P＜0.01，▽P＞0.05，与稳定斑组比较，⊕P＜0.01

组别 n MMP－9（ng／mL） LPA（μmol／L）LDL－C（mmol／L）hs－CRP（mg／L）健康对照6082.47±14.61 2.76±0.87 2.28±0.44 2.27±0.86无斑块组62 121.40±14.50＊3.98±1.60＊ 2.33±0.51△ 2.35±1.14△稳定斑组53 147.25±12.54＊﹟ 4.12±1.56＊▽ 2.32±0.65△ 3.29±1.67＊﹟易损斑组49 226.12±38.63＊﹟⊕4.53±1.79＊﹟⊕ 2.71±0.73＊﹟⊕ 6.15±2.51＊﹟⊕

3 讨论

最常见的颈动脉病变是动脉粥样硬化斑块形成。国外报道颈动脉粥样硬化性病变占中青年脑梗死的16%～22%［3］，国内为7.9%～22%［4］。斑块形成可引起管腔狭窄，使相应供血脑区缺血。一般认为低回声斑块、不均质斑块是产生神经系统症状的危险因素，易引起脑卒中或短暂性脑缺血发作，但临床同时也提出无症状的颈动脉狭窄也是脑血管病强有力的致病因素。不稳定斑块及血栓形成是在多种因素综合作用下的结果。本文通过研究不稳定斑块的产生及斑块破裂后血栓形成的主要影响因素，重要意义就在于了解颈动脉内膜和斑块的稳定情况，探索预测斑块破损的指标，进行及时的干预，为临床检测及防治不稳定斑块提供理论依据，防止脑梗死的发生。

在不稳定性斑块内由巨噬细胞、T淋巴细胞参与的炎性细胞大量分泌MMPs，使纤维成分降解加剧，破坏斑块纤维帽完整性，从而导致斑块破损、脱落，产生栓子。MMP－9主要是由巨噬细胞以前酶原形式分泌。国外研究发现，MMP－9在动脉粥样硬化病变处表达增强，并能促进动脉粥样硬化斑块破裂［5］。而在不稳定斑块中，特别是易发生破裂的斑块肩部区域，MMP－9含量较高，酶活性明显增高，通过降解纤维帽内的胶原，是造成斑块不稳定并破裂的主要因素［6－7］。本研究发现，易损斑块组MMP－9含量较稳定斑块及无斑组显著增高（P＜0.01）；且hs－CRP也显著高于对照组及无斑块组，肯定了hs－CRP水平升高与颈动脉粥样硬化斑块和脑梗死的发生有密切关系。

LPA是一种重要的VSMC丝裂素原，主要是由活化的血小板和低密度脂蛋白在轻度氧化过程中产生，且位于动脉粥样硬化斑块的中心区，当斑块破裂暴露LPA，使循环中的血小板活化形成大量的微栓子［8］。许多研究还观察到LPA诱导细胞内游离Ca2＋浓度增加，刺激Na＋／H＋交换，平行地激活有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK），且细胞增加42%，结果导致管腔狭窄。当血小板受凝血酶刺激后迅速产生并释放LPA，产生的LPA作为细胞间的“磷脂信使”，通过激活特异性G蛋白受体启动血小板活化，促进血小板聚集，导致血栓形成［9］。本研究中，检出斑块的2组LPA浓度明显高于对照组及无斑块组（P＜0.01），而稳定斑组较无斑组LPA水平比较无明显差异（P＞0.05），提示我们LPA是脑血栓形成的危险因子，血浆LPA浓度越高，发生血栓甚至梗死的几率越大。

颈动脉粥样硬化以及不稳定斑块的破裂和脱落是引发缺血性脑卒中最重要的危险因素，血浆中的MMP－9及LPA可作为反映动脉粥样硬化斑块易损性、不稳定性的两个预测指标，中青年缺血性脑血管病患者只要做好颈动脉粥样硬化的防治及稳定斑块的治疗，结合临床超声检查，做好监测，积极处理颈动脉粥样硬化性病变，纠正由其引起的管腔狭窄，避免斑块脱落，一定能减少缺血性脑卒中的发生。

［1］ Chung SM，Bae ON，L im KM，et al.Lysophosphat id ic A cid Induces Thrombogen ic Activity Through Phosphatidylserine Exposure and Procoagu lan tM icroves icle Generation inH um an E ryth rocytes［J］.A rterioscler Thromb Vasc B io l，2007，27（2）：414－421.

［2］ 中华神经科学会，中华神经外科学会 .各类脑血管病诊断要点及脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分标准［J］.中华神经科杂志，1996，29（6）：379－380.

［3］ Varona JF，Guerra JM，Bermejo F，et al.Causes of ischemic stroke in young adults，and evolution of the etiological diagnosis is over the long term［J］.Eur Neurol，2007，57：212.

［4］ 丁建平，宿英英.青年脑梗死病因及危险因素分析［J］.中国脑血管病杂志，2008，5：202.

［5］ Romero JR，Vasan RS，Beiser AS，et al.Association of carotid artery atherosclerosis with circulating biomarkers of extracellular matrix remodeling；the Framingham Off－spring Study［J］.J Stroke Cerebrovasc Dis，2008，17（6）：412－417.

［6］ Lin RT，Chen CH，Tsai PC，et al.Sex－specific effect of matrix metalloproteinase－9functional promoter polymorphism on carotid artery stiggness［J］.Atherosclerosis，2012，223（2）：416－420.

［7］ Loftus IM，Naylor AR，Goodall S，et al.Increased matrix metalloproteinase－9activity in Unstable carotid plague.A potential role on acute plaque disruption［J］.Stroke，2003，31（1）：40－47.

［8］ Siess W，Zhang KJ，Essler M，et al.Lysophosphatidic acid mediates the rapid activation of platelets and endothelial cells by mildly ox idized low density lipoprotein and accumulates in human atherosclerotic lesions［J］.Proc Narl Acad Sci USA，1999，96（7）：6 931－6 936.

［9］ Chung SM，Bae ON，Lim KM，et al.Lysophosphatidic acid induces thrombogenic activity through phoshatidylserine esposure and procoagulant microvesicle generation in human erythrocytes［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2007，27（7）：414－421 .