车前子化学成分与药理活性研究
2014-03-10张晓方
张晓方
(河南中医学院第一附属医院 药学部,河南 郑州 450000)
车前子化学成分与药理活性研究
张晓方
(河南中医学院第一附属医院 药学部,河南 郑州 450000)
车前子兼具药用及食用价值,其保健作用得到了国家卫生部的权威认证。中医中常以其入药,发挥利尿、镇咳、调节消化系统之功效。然而其副作用也较为明显,可能导致服用者血压升高,进而威胁其生命安全,因此准确探明其化学成分,对其进行深入的药理学研究具有一定的临床价值。立足于此,试图通过科学的实验研究分析其化学成分,为合理用药提供参考依据。
车前子;化学成分;药理学;检测
车前子为车前科植物平车前或车前的种子,外形主要以三角状长圆形或椭圆形为主,其含有的药用活性成分较多,具有渗湿通淋、清热利尿、明目祛痰的作用,常用于暑湿泄泻、痰热咳嗽、目赤肿痛以及水肿胀满等病症的治疗[1]。本文通过实验的方法对车前子的主要化学成分以及药理活性进行研究,为提高车前子在临床上的使用性能提供参考。
1 材料
1.1 原料与试剂
仪器主要包括紫外分光光度计、高效液相色谱仪、核磁共振波谱仪、空气泵、空气压缩机、质谱仪、蒸发光监测器、旋转蒸发仪、电子天平、紫外分析仪、干燥箱以及毛细管等。试剂主要包括三氯甲烷、甲醇、石油醚、冰乙酸、丙酮、去离子水、双蒸水、柱层层析硅胶、硫酸显色剂、反向板以及硅胶板。
1.2 样品
准确称取2.0kg车前子置于20L烧瓶中,加入16L质量分数为60%的乙醇,采用电热套加热,回流提取2h,过滤后即得滤液A。将上述过程中产生的滤渣收集起来,向其中加入12L质量分数为60%的乙醇,回流提取1h后再次过滤,得到的滤液记为B。将滤液A、B混合起来,于65℃下浓缩至干。
1.3 操作原理[2]
1.3.1 分离与纯化 本实验采用柱层析法对提取液进行分离:首先将已溶解的样品上样于色谱柱中,使用洗脱剂淋洗。样品中不同组分的吸附能力不同,因此经过几次吸附与解吸以后,色谱柱中就会出现不同的色带,且含有不同成分的溶液会从色谱柱底端流出。
1.3.2 成分检测 通过ODS柱层纯化得到的晶体即为所需化学成分,由于结构鉴定需要确保其为单一物质,对纯度的要求较高,因此需要通过一系列方法检测其化学纯度。一般通过液相检测、反相板检测、HPLC-ELSD以及HPLC-UV后,基本可以确定其为单一物质。假如其不适合通过液相检测,则需要使提取液反复通过两个正向板以及一个反相板进行检测。
1.4 鉴别方法
1.4.1 车前子结构骨架与官能团鉴定 车前子的结构鉴定主要通过官能团的显色反应来实现。首先,将样品溶于1.0mL甲醇中,加入少量镁粉混合,振荡均匀后加入几滴浓盐酸,等待显色。
1.4.2 车前子分子量与分子式确定 采用质谱法测定车前子的分子式,将待测液置于质谱仪的进样系统中,经质量分析、离子收集、检测以及记录等步骤后即可得到相应数据。
1.4.3 车前子结构确定 本次研究采用核磁共振法确定车前子的结构,可根据化学位移等相关数据来判定物质中氢原子的类型和所处的化学环境、峰位。而核磁共振法所得到的偶合常数可以体现核与核的关系以及质子的数目。具体操作步骤如下:①区分溶剂峰与杂质峰;②根据分子式计算物质的不饱和度;③确定各峰组相对应氢原子的数目,并进行分配;④考虑分子的对称性;⑤分析峰组的δ和J值;⑥分析可能出现的结构式;⑦对所推测的结构式进行确认。
2 结果
2.1 车前子提取物相关性质
本试验共得到车前子提取物15L,浓缩后的体积大约为4.1L,使用糖度计测定得到车前子粗提取液的糖度为5。
2.2 车前子主要成分
实验结果显示,车前子主要含有黄酮类化合物、三萜类化合物、挥发油、多糖成分等。其中黄酮类化合物主要包括高车前苷、木犀草素以及车前甙等[3];三萜类化合物主要有齐墩果酸和熊果酸等;挥发油主要有3-叔丁基-4-羟基茴香醚和2,6-二叔丁基对甲酚。车前子中含有大量车前子胶,其属于糖类物质,另含有质量分数为28%的D-半乳糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、半乳糖以及少量的炭藻糖和D-木糖。除以上四类以外,车前子中还含有氨基酸、蛋白质、生物碱以及环烯醚苷类物质,包括京尼平甙酸、桃叶珊瑚甙、固醇、脂肪酸、微量元素以及酚酸等[4]。此外,有研究证实,车前子中含有丰富的铁、铝、锌、镁等元素,其中镁元素含量最高。
2.3 车前子药理活性分析
车前苷可作用于人体的呼吸中枢,发挥减缓呼吸频率的作用,可促进支气管及消化道分泌相关物质,将其应用于慢性支气管炎的临床治疗会有不错的效果。由此可知,车前子在平喘、祛痰以及镇咳方面均具有较高的应用价值;其所含的桃叶珊瑚可以促进胆汁分泌,具有明显的抗肝脏毒性作用,可护肝利胆;车前子中含有的黏液质——车前子胶具有良好的调节血糖、降低血脂作用,可以预防由脂质代谢紊乱所引起的脂质过氧化问题,同时还可以防治冠心病和动脉粥样硬化[5]。此外,其还含有发酵性膳食纤维,可以发挥整肠通便的作用;环烯醚菇类物质则具有抗氧化作用;黄酮类物质车前苷、木犀草素等可以作用于人体的心血管系统,有效发挥解痉作用[6]。
3 结语
近几年来,车前子的药用价值不断得到挖掘,国内关于车前子形态、药理活性以及药用价值的研究非常多,已从动物模型以及临床应用等多个角度对车前子进行了研究。但是目前的研究成果并没有达到预期效果,其在临床上的应用还是以粗提取物为主,对其主要化学成分的研究也局限在多糖范围内。本文通过实验检测了车前子的主要化学成分,并以此为基础对车前子的药理活性进行了分析。研究证实,车前子所含的车前苷、桃叶珊瑚、黏液质以及木犀草素、车前甙等黄酮类物质均具有药用价值。这些主要成分即为车前子发挥降脂、降压、护肝利胆、止咳祛痰平喘、抗氧化、利尿及预防肾结石形成、抗衰老、抗菌、抗癌、抗病毒、通便、免疫调节、止痛、明目、抗发炎以及调节胃肠道等多种功效的基础[7]。综上所述,车前子含有多种有效成分,可发挥多种药理作用,在临床上具有较大的应用价值,值得大力推广开发。
[1] 张杰,李兴琴,王素敏,等. 车前子对高脂血症大鼠血脂水平及抗氧化作用的影响[J]. 中国新药杂志,2005(3):299-301.
[2] 回瑞华,侯冬岩,李铁纯,等.中国车前草挥发性化学成分分析[J]. 分析试验室,2004(8):85-87.
[3] 唐永富,黄丹菲,殷军艺,等. 车前子多糖对骨髓来源树突状细胞表型和吞噬功能的影响[J]. 食品科学,2007(10):517-520.
[4] 王勇,祁明信,黄秀榕,等. 车前子对晶状体氧化损伤所致LEC凋亡抑制作用的实验研究[J]. 现代诊断与治疗,2003(4):199-202.
[5] 刘强,牟洪波,刘元禄. 中药车前子对小鼠气囊滑膜炎细胞因子TNF-α及IL-12影响的实验研究[J]. 中华中医药学刊,2007(4):816-818.
[6] 谢小梅,付志红.车前子多糖对小鼠阴道菌群失调的调整作用[J]. 辽宁中医杂志,2006(2):241-242.
[7] 付志红,谢明勇,聂少平. 微波技术用于车前子多糖的提取[J]. 食品科学,2005(3):151-154.
(责任编辑:尹晨茹)
2014-03-18
张晓方(1985-),女,河南中医学院第一附属医院药学部药师,研究方向为药房调剂。
R284;R285
A
1673-2197(2014)12-0033-02