复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮的有关物质分析

陈晓英（福建生物工程职业技术学院，福州 350002）

复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊为复方降压药，是多组分复方制剂，其主药成分为：地巴唑、盐酸异丙嗪、磷酸氯喹、硫酸胍生、维生素B6、氯化钾、利血平、氯氮、氢氯噻嗪、乳酸钙、维生素B1、三硅酸镁。国内文献多见其各主成分的含量测定[1-5]，而未见对其有关物质的分析。笔者对该制剂的有关物质进行了初步研究，结果发现与高慧钦[5]报道相似，盐酸异丙嗪和氯氮䓬性质不太稳定。为此，本研究采用高效液相色谱（HPLC）法对该制剂中盐酸异丙嗪和氯氮产生的杂质进行了分析，并对市售的不同企业的51批产品进行了分析检测，为其质量控制提供依据。

1 材料

1.1 仪器

1100型液相色谱仪、6400 LC/MS（液质联用）仪（美国Agilent公司）。

1.2 药品与试剂

市售复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊（厂家及批号见表1，规格：均为每粒0.25 g）；盐酸异丙嗪原料药（批号：090214，纯度：99.2%）、氯氮原料药（批号：171229-200603，纯度：99.92%）均由福建省药品检验所提供；磷酸二氢铵、磷酸、盐酸均为分析纯，甲醇为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C8（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相A：0.05 mol/L磷酸二氢铵（用磷酸调节pH至3.2），流动相B：甲醇（梯度洗脱，0～20 min，60%A；20～50 min，60%A渐降至15%A；50～55 min，15%A；56～60 min，60%A），流速：1.0 ml/min；检测波长：254 nm；柱温：室温；进样量：10 μl。

2.2 专属性试验

盐酸异丙嗪结构中含有吩噻嗪环，容易被氧化成醌型化合物，对光敏感，光照下吩噻嗪类化合物更易被氧化。根据此特性，将盐酸异丙嗪原料药同时进行光照（4 500 lx）和高温（60 ℃）处理，处理后的样品用0.1 mol/L盐酸（以下简称盐酸）溶解，制成0.5 mg/ml的溶液（a）。

取约2粒胶囊样品（批号：20111204）细粉于90 ℃加热处理后，置于25 ml棕色量瓶中用盐酸溶解并稀释至刻度，微孔滤膜滤过，作为破坏后供试品溶液（c）。

取约2粒胶囊样品（批号：20111204）细粉置于25 ml棕色量瓶中，用盐酸溶解并稀释至刻度，微孔滤膜滤过，作为供试品溶液（d）。

取上述溶液进样，记录色谱图见图1。

根据图1可知，在破坏试验中，无论是盐酸异丙嗪原料药还是胶囊样品，均存在1个保留时间约为5.4 min的杂质及主峰异丙嗪后面的2个杂质峰。

2.3 空白干扰试验

图1 高效液相色谱图A.溶液a；B.溶液b；C.溶液c；D.溶液d；E.溶液e；1.异丙嗪；2.氯氮䓬；3.异丙嗪杂质Ⅰ；4.异丙嗪杂质Ⅱ；5.异丙嗪杂质Ⅲ；6.化合物Ⅱ；7.化合物ⅠFig 1 HPLC chromatogramsA.solution a；B.solution b；C.solution c；D.solution d；E.solution e；1.promethazine；2.chlordiazepoxide；3.promethazine impurity Ⅰ；4.promethazine impurity Ⅱ；5.promethazine impurity Ⅲ；6.compoundⅡ；7.compound Ⅰ

图2 化合物Ⅱ的液相-质谱图（ESI负离子）Fig 2 LC/MS spectrum of compound Ⅱ（ESI negative ion）

经调查，各不同厂家生产的该制剂的配方和工艺基本相似，按照该品配方制备缺主药成分盐酸异丙嗪和氯氮的阴性样品，按照与制备供试品溶液相同的方法制备成溶液e，进样后记录色谱图。结果表明，在该色谱条件下阴性样品对主成分测定未见干扰，见图1E。

2.4 检测限与精密度试验

2.4.2 精密度：取溶液d连续进样6次，记录色谱图。结果盐酸异丙嗪和氯氮主峰峰面积的RSD分别为0.73%、0.52%（n＝6）。

2.5 稳定性试验

取溶液d在室温下放置，分别在0、2、4、6、8 h取样测定，记录峰面积。结果盐酸异丙嗪和氯氮主峰峰面积的RSD分别为1.69%、1.09%（n＝5），表明供试品溶液在8 h内稳定。

2.6 有关物质检查方法与结果

取胶囊2粒，除去囊壳，细粉置于25 ml棕色量瓶中用盐酸溶解并稀释至刻度，微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。按“2.1”项色谱条件，进样10µl，记录色谱图，采用杂质与各自主成分面积归一化法计算杂质的量。

10个企业51批市售胶囊样品经上述方法测定，其结果显示，盐酸异丙嗪的杂质含量均在1%以下，且各厂家的产品中该杂质的量都相对比较稳定；而氯氮的杂质即化合物Ⅱ的量普遍偏高，在1%以下的约占22%、1%～3%约占33%、3%以上的约占45%，最高的一批次甚至接近8%，详见表1。

表1 51批市售胶囊样品杂质检查结果Tab 1 Results of impurity detection in 51 batches of commercially available capsule

续表1Contined tab 1

3 讨论

市售复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪所产生的杂质，未见有文献报道其归属，而且在《中国药典》[6]以及《美国药典》[8]的盐酸异丙嗪的质量标准中均采用薄层色谱自身对照法进行有关物质检查，同时也未指明杂质归属。因此，复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪所产生的杂质归属有待进一步研究。

根据初步原因排查，氯氮䓬的杂质量普遍偏高可能与原料药的质量有关，但具体原因有待进一步研究。另外，氯氮如何转化成其氧化物（化合物Ⅱ）也未见报道，需要进一步探讨。

综上，本方法可用于分析复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮产生的有关物质。

[1]邓富良，饶均明，周平，等.HPLC测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中五种成分的含量[J].中国药科大学学报，2004，35（5）：446.

[2]修虹.HPLC法测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中利血平的含量[J].海峡药学，2011，23（12）：63.

[3]陈秀琳.HPLC法测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中硫酸胍生、磷酸氯喹、维生素B1和维生素B6的含量[J].中国药品标准，2010，11（6）：453.

[4]田宝勇，刘英华，杨晓华，等.火焰原子吸收法测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中氯化钾含量[J].河北科技大学学报，2010，31（5）：406.

[5]高慧钦.复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊工艺改进和质量研究[D].天津：天津大学，2009：1-53.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典：二部[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：1 026.

[8]The United States Pharmacopeial Convention.USP32/NF27[S].Washington D.C.：The United States Pharmacopeial Convention，Inc.，2009：3 405.