妊娠期高血压患者血管内皮细胞功能和氧化应激水平的变化

张连英，傅珂，何英杰，杜静，黄广勇

临床研究

妊娠期高血压患者血管内皮细胞功能和氧化应激水平的变化

张连英，傅珂，何英杰，杜静，黄广勇

目的探讨妊娠期高血压(PIH)患者血管内皮细胞功能和氧化应激水平的变化。方法收集PIH患者48例为PIH组，分为妊娠期高血压期、子痫前期及子痫期3个亚组，另选择30例正常孕妇作为健康对照组。测定并比较血浆内皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺环素(PGI2)和氧化终产物丙二醛(MDA)含量。结果PIH患者ET、TXA2、MDA水平明显高于健康对照组(P<0.05)，PGI2水平明显低于健康对照组(P<0.01)，TXA2/ PGI2比值呈上升趋势；子痫亚组的ET水平明显高于妊娠高血压亚组(P<0.05)，PGI2明显低于妊娠高血压亚组(P<0.05)。ET、TXA2和MDA呈明显正相关(r=0.72，0.61；P<0.01)；PGI2与MDA呈负相关(r=0.48；P<0.05)。结论氧化应激和内皮功能紊乱在PIH发病中起了重要的作用，氧化应激与血管内皮功能紊乱密切相关。

妊娠期高血压；内皮功能；氧化应激

妊娠期高血压(pregnancy induced hypertension，PIH)是孕产妇和围产儿病死率升高的主要原因之一，严重影响母婴健康。目前该病的确切病因仍不清楚。关于其病因主要有以下几种学说：子宫螺旋小动脉重铸不足、炎性免疫过度激活、血管内皮细胞受损、遗传因素、营养缺乏以及胰岛素抵抗等[1]。

近年的研究发现血管内皮功能紊乱在PIH的发病机制中可能起重要作用，内皮素分泌增加可能是体内各种致病因子作用导致PIH的最终调节通路[2]。Heimrath等[3]研究发现，妊娠高血压孕妇血液循环中的内皮细胞及内皮祖细胞明显少于正常血压的孕妇，血液循环中的内皮细胞及内皮祖细胞的减少消弱了内皮的更新与恢复，与妊娠高血压疾病的发生有关。Henriques等[4]对30例PIH患者和30例健康孕妇进行了队列研究，以肱动脉血流介导的舒张功能评价内皮功能，发现PIH患者内皮功能异常的比例明显高于对照组，同时，PIH患者体质量指数、收缩压水平、低密度脂蛋白胆固醇水平及糖耐量异常的比例也明显高于对照组。另外，国外研究显示，子痫前期患者胎盘及母体血清中的总氧化剂水平明显升高，胎盘总抗氧化剂水平明显减低[5]。虽然目前在这些方面有一些研究，但这些研究一般例数较少，对于血管内皮功能和氧化应激在PIH发病中的确切作用以及氧化应激与内皮功能的关系仍未确定。

本研究对PIH患者测定了反映血管内皮功能的血浆内皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺环素(PGI2)和氧化终产物丙二醛(MDA)含量的变化，并与健康孕妇相比较，探讨PIH 患者血管内皮细胞功能和氧化应激水平的变化，为PIH的防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 随机选择2013年8月—2014年2月医院妇产科住院治疗的PIH患者共48 例(PIH组)，平均年龄(29.3±5.6)岁，平均孕周(34.1±1.8)周；诊断以《妇产科学》第8版为依据[1]，均无明显的内外科疾病，4周内无急、慢性感染等疾病，将患者分为妊娠期高血压期、子痫前期及子痫期3个亚组，分别为16例、20例和12例。另随机选择30例同期健康孕妇作为健康对照组，平均年龄(28.6±3.7)岁，平均孕周(35.5±2.2)周。PIH组和健康对照组患者年龄和孕周比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。入选者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 内皮功能指标测定 测定PGI2、TXA2和ET等3种能反映内皮功能的指标。由于PGI2和TXA2的不稳定性，目前难以直接测定，PGI2生物半衰期约3 min，迅速代谢为6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)，而TXA2生物半衰期约30 min，迅速代谢为活性的TXB2，故国内外均以测定6-keto-PGF1α和TXB2作为判断其浓度的指标。本研究应用放免法测定PGI2(实际测定6-keto-PGF1α)、TXA2(实际测定TXB2)和ET，血样放-70℃低温冰箱保存。试剂购自解放军总医院放免研究所。

1.3 氧化应激指标测定 血浆中MDA测定采用改良的荧光光度法，采集患者外周血3 ml，EDTA-K2抗凝。血液样品相对离心力(RCF)180×g离心5 min，分离血浆，24 h内检测。按试剂盒说书应用荧光光度法检测血浆MDA水平。

1.4 统计学方法 使用SPSS 13.0统计软件进行统计。计量资料用均数±标准差表示，采用t检验或F检验。ET、TXA2、PGI2和MDA相关性采用Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组内皮功能及氧化应激指标比较 PIH组患者ET、TXA2水平明显高于健康对照组(t=8.75,P<0.01；t=2.14,P<0.05)，PGI2水平明显低于健康对照组(t=3.76,P<0.01)，TXA2/PGI2比值呈上升趋势(t=2.36，P<0.05)；MDA水平明显高于健康对照组(t=4.75,P<0.05)。子痫亚组的ET水平明显高于妊娠高血压亚组(t=2.38,P<0.05)，PGI2明显低于妊娠高血压亚组(t=2.26,P<0.05)，MDA明显高于妊娠高血压亚组和子痫前期亚组(t=2.83、3.29，P<0.01)。见表1。

2.2 PIH患者ET、TXA2、PGI2和MDA相关分析 相关分析显示，ET、TXA2和MDA呈明显正相关(r=0.72、0.61；P<0.01)；PGI2与MDA呈负相关(r=-0.48；P<0.05)，显示氧化应激与血管内皮功能紊乱密切相关。

3 讨 论

妊娠期高血压直接影响孕妇及围生儿的健康，该病的确切病因仍不清楚, 早期预防及治疗手段仍很有限，国内外对该病一直进行研究[6]。Wang等[7]研究发现，PIH患者血清hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平明显高于健康孕妇，hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平与PIH的严重程度呈正相关。国内研究显示，妊娠期高血压综合征孕妇血清及胎盘滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9的表达明显减少，基质金属蛋白酶-9可能参与PIH的发生和发展[8]。国内研究显示，PIH患者血清胱抑素C、B型尿钠肽及尿微量白蛋白水平均明显高于正常妊娠组，轻度、中度及重度依次递增,监测血清胱抑素C、B型尿钠肽及尿微量白蛋白可以预测严重程度及预后,具有一定临床意义[6]。

近年来的研究发现血管内皮功能紊乱在PIH的发病机制中可能起重要作用，血管内皮细胞在调节血管舒缩、生长、血栓、炎性反应等多方面具有至关重要的作用，内皮细胞合成和释放具有舒张血管、抗血小板聚集的PGI2和一氧化氮(NO)，同时合成和释放具有强烈缩血管作用的ET等血管活性物质。TXA2主要是由激活的血小板合成释放的一种具有强烈促进血管收缩和血小板聚集的生物活性物质，内皮功能失调以内皮依赖的血管舒张功能障碍为主。由于某些病理因素引起TXA2和PGI2平衡失调，即TXA2/PGI2比值增加，是造成血小板聚集、血管痉挛收缩或血栓形成的重要原因。国内研究显示，妊娠期高血压患者组血浆NO水平明显低于正常妊娠组和健康对照组，重度妊娠期高血压患者血浆NO水平明显低于轻、中度妊娠期高血压综合征患者，妊娠期高血压组血浆ET-1水平明显高于正常妊娠组和正常对照组[9]。国内研究显示，妊娠高血压患者的血清血管内皮生长因子水平显著高于健康孕妇，认为血清血管内皮生长因子水平与妊娠高血压发病及病情发展有关[10]。国内对40 例PIH 患者和30例同期入院的正常孕妇测定了血浆ET-1、NO、超氧化物歧化酶(SOD)和MDA，结果显示PIH 患者血浆SOD/MDA 和NO/ET-1 比例失调，表明PIH 患者体内存在氧自由基代谢和血管内皮功能紊乱[11]。

本研究结果发现，PIH患者ET、TXA2和TXA2/PGI2明显上升，明显高于健康对照组，PGI2明显低于健康对照组，并且随着PIH病情加重，引起血管收缩和血小板聚集的ET、TXA2升高，PGI2降低。子痫亚组的ET水平明显高于妊娠高血压亚组，PGI2明显低于妊娠高血压组；子痫亚组的TXA2水平明显高于子痫前期亚组。说明PIH患者血管舒缩功能失调，血小板聚集、血管痉挛收缩增强，并且随着病情加重，血管舒缩功能失调及血小板聚集更加明显。

注：与健康对照组比较，aP<0.05,bP<0.01；与妊娠高血压亚组比较，cP<0.05；与子痫前期亚组比较，dP<0.05,eP<0.01

氧化应激是指机体内自由基的产生和抗氧化防御之间严重失衡的一种病理状态，在体内引发一系列脂质过氧化反应，最终产物为MDA，MDA为自由基作用于脂质发生过氧化反应的氧化终产物，为常用的氧化应激指标。机体内存在氧化应激损伤和抗氧化防御的过程，细胞通过几种途径减少氧化应激的损害，主要包括SOD、谷胱甘肽过氧化酶等。Watanabe等[12]研究发现，子痫前期孕妇血管舒张功能明显减低、血清活性氧代谢衍生物浓度明显升高，并于产后1个月左右逐渐恢复至与健康对照组相近水平；正常妊娠组则无此变化。陈朝霞[13]研究显示，氧化应激与妊娠高血压相关，PIH患者MDA水平明显高于健康孕妇，而妊娠高血压患者抗氧化物质包括维生素C和维生素E水平低于健康孕妇。

本研究显示，PIH患者与健康对照组相比，血浆MDA明显升高，子痫亚组的MDA水平明显高于子痫前期亚组，说明氧化应激较强。进一步对ET和MDA进行相关分析显示，ET和MDA呈明显正相关(r=0.71；P<0.01)，PIH患者血管舒张功能(PGI2)与氧化应激产物MDA呈负相关(r=-0.41；P<0.05)。可见，孕期氧化应激的增强与内皮功能紊乱密切相关，氧化应激可能是导致血管内皮功能紊乱的重要因素。

1 谢幸,苟文丽.妇产科学[M].8版.北京:人民卫生出版社,2013:64-73.

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3 Heimrath J,Paprocka M,Czekanski A,et al.Pregnancy-Induced hypertension is accompanied by decreased number of circulating endothelial cells and circulating endothelial progenitor cells[Z],2014:23.

4 Henriques AC,Carvalho FH,Feitosa HN,et al.Endothelial dysfunction after pregnancy-induced hypertension[J].Int J Gynaecol Obstet,2014,124(3):230-234.

5 Ozturk E,Balat O,Ac lms YG,et al.Measurement of the placental total antioxidant status in preeclamptic women using a novel automated method[J].J Obstet Gynaecol Res,2011,37(4):337-342.

6 乔如丽，刘志杰.血清胱抑素C、尿微量白蛋白、血浆BNP水平在妊娠高血压综合征中的变化[J].疑难病杂志，2010，9(4):292-293.

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10 张绍武,宁洁.妊娠高血压综合征患者血清血管内皮生长因子含量变化及意义[J].中国优生与遗传杂志,2010,18(11):70.

11 凌杰,罗利飞,韩子华.妊娠高血压治疗前后患者血管内皮细胞功能和氧自由基的变化[J].中国现代医生,2012,50(6):110-111.

12 Watanabe K,Mori T,Iwasaki A,et al.Increased Oxygen free radical production during pregnancy May impair vascular reactivity in preeclamptic women[J].Hypertens Res,2013,36(4):356-360.

13 陈朝霞.氧化应激与妊娠高血压的相关性[J].兰州大学学报:医学版,2013,39(3):50-52.

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252000 山东省聊城市第四人民医院妇产科(张连英、傅珂、何英杰)； 山东省聊城市人民医院妇产科(杜静)， 心内科(黄广勇)

黄广勇，E-mail:13346256309@163.com

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.08.028

2014-04-04)