塔黄的化学成分研究

施天一，廖志新*，叶 润，胥廉谦，孙洪发，纪兰菊(.东南大学化学化工学院，南京 0009；.中国科学院西北高原生物研究所，西宁 8000)

塔黄(RheumnobileHook. f. et Thoms)属蓼科大黄属多年生高大草本植物，生长于喜马拉雅山南麓4 000～4 800米高山石滩及湿草地[1]。《藏药志》[2]记载：塔黄根茎入药；用于泻黄水，治恶性腹水、肿病[3]。迄今为止，塔黄的化学成分，国内外尚未有研究报道。为了更好地开发和利用塔黄资源，利用硅胶、Sephadex LH-20、MCI等色谱技术从其乙醇提取物分离得到了8个化合物，通过各种波谱技术，例如：红外光谱、核磁共振谱、质谱等鉴定了它们的结构，分别为：大黄素(1)，大黄酚(2)，大黄素甲醚(3)，1，8-二羟基-2，3-甲氧基-6-甲基蒽醌(4)，大黄酚葡萄糖苷(5)，大黄素葡萄糖苷(6)，β-谷甾醇(7)，胡萝卜素(8)。所有化合物均为首次从该种植物中分离得到。

1 仪器与试药

1.1仪器 RE-85E旋转蒸发器(巩义市英峪予华公司)；AVANCE AV-500核磁共振波谱仪(Bruker)；NICOLET IR200 FT-IR型红外光谱仪；XT4型显微熔点仪(上海荆和分析仪器有限公司)；Q-Tof micro(ESI-MS)。

1.2试药 实验用塔黄于2011年8月采自西藏林芝县色季拉山，植物样品经中国科学院西北高原生物研究所孙洪发研究员鉴定；柱层析硅胶(200～300目，青岛海洋化工厂)；薄层层析硅胶(GF254，10～40 μm，青岛海洋化工厂)；Sephadex LH-20(20～100 μm，Pharmacia)；MCI：Mitsubishi Chemical(75～150 μm，Mitsubishi Kasei Corporation)；硫酸(分析纯，南京化学试剂有限公司)；磷钼酸(分析纯，上海展云化工有限公司)；丙酮，石油醚，乙酸乙酯，乙醇及甲醇等试剂(分析纯，南京晚晴试剂公司)。

2 提取与分离

称取塔黄干燥根茎3.0 kg，粉碎，用体积分数为90%乙醇10 L冷浸[4]，7 d萃取1次，共4 次，在50 ℃下减压浓缩得到浸膏500 g。以2 000 mL水溶解浸膏，先后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇1 500 mL多次萃取，减压浓缩，重复5次，得到不同极性部分萃取物。得到石油醚萃取物(78 g)、乙酸乙酯萃取物(146 g)、正丁醇萃取物(276 g)。经正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、MCI柱层析及重结晶等方法，通过使用石油醚-乙酸乙酯体系，从石油醚浸膏中分离得到化合物7(5 g)；从乙酸乙酯浸膏中分离得到化合物1(10 g)，2(5 g)，3(2 g)，4(1 g)；通过使用二氯甲烷-甲醇体系，从正丁醇浸膏中分离得到化合物5(10 g)，6(5 g)，8(1 g)。

3 结构鉴定

化合物1：红色针状结晶，易溶于乙酸乙酯，C15H10O5，mp：255～256 ℃，ESI-MSm/z：269[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：3 363，1 673，1 626，1 585，1 478，1 448，1 404，1 364，1 332，867，72。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.07(1H，s，α-OH)，12.00(1H，s，α-OH)，11.35(1H，s，β-OH)，7.48(1H，brs，H-4)，7.16(1H，brs，H-5)，7.11(1H，d，J=2.2 Hz，H-2)，6.59(1H，d，J=2.25 Hz，H-7)，2.41(3H，brs，6-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)：190.3(C-9)，181.0(C-10)，165.1(C-8)，164.8(C-1)，162.1(C-6)，148.3(C-3)，135.3(C-14)，133.1(C-11)，123.9(C-7)，119.6(C-5)，113.2(C-12)，108.9(C-13)，108.2(C-4)，107.4(C-2)，21.0(CH3)。以上数据与参考文献数据[5]一致，故确定为大黄素(1，3，8-trihydroxy-6-methylanthraquinone)。

化合物2：淡黄色粉末状，易溶于乙酸乙酯，C16H12O5，mp：197～198 ℃，ESI-MSm/z：283[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：3 402，1 674，1 622，1 562，1 487，1 460，1 223，1 034，926，870，847，763，720。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.18(1H，s，OH)，11.98(1H，s，OH)，7.55(1H，d，J=2.4 Hz，H-4)，7.22(2H，d，J=2.4 Hz，H-2，H-5)，6.89(1H，d，J=2.5 Hz，H-7)，3.94(3H，s，3-OCH3)，2.44(3H，s，6-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：190.3(C-9)，181.0(C-10)，165.4(C-1)，164.8(C-8)，161.5(C-3)，147.1(C-6)，134.8(C-14)，132.9(C-12)，123.8(C-13)，120.1(C-7)，112.8(C-5)，109.4(C-11)，107.3(C-2)，105.8(C-4)，55.7(3-OCH3)，21.9(6-CH3)。以上数据与参考文献数据[6]一致，故确定为大黄素甲醚(1，8-dihydroxy-3-methoxy-6-methyl-anthracene-9，10-dione)。

化合物3：黄色片状结晶，易溶于乙酸乙酯，C15H10O4，mp：186～188 ℃，ESI-MSm/z：253[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：1 672，1 620，1 601，1 563，1 452，1 203，895，868，838，747。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：11.91(2H，s，1，8-OH)，7.80(1H，t，J=6.5 Hz，H-6)，7.71(1H，t，J=6.5 Hz，H-5)，7.55(1H，brs，H-4)，7.38(1H，brd，J=8.0 Hz，H-7)，7.22(1H，brs，H-2)，2.44(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：191.463(C-9)，181.248(C-10)，161.489(C-1)，161.237(C-8)，149.063(C-3)，137.207(C-6)，133.156(C-14)，132.839(C-12)，124.272(C-13)，123.945(C-7)，120.427(C-5)，119.200(C-11)，115.679(C-2)，113.587(C-4)，21.522(CH3)。以上数据与参考文献数据[7]一致，故确定为大黄酚(1，8-dihydroxy-3-methyl-anthraquinone)。

化合物4：橙黄团状结晶，易溶于乙酸乙酯，C17H14O6，mp：198～199 ℃。ESI-MSm/z：313[M-H]-。IR(KBr)νmaxcm-1：1 660，1 622，1 600，1 561，1 240。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.29(1H，s，1-OH)，12.10(1H，s，8-OH)，7.65(1H，s，5-H)，7.11(1H，s，4-H)，6.69(1H，d，J=2.45，7H)，3.74(6H，dd，J=7，2-OCH3，3-OCH3)，2.47(3H，s，6-CH3)。以上数据与参考文献数据[8]一致，故确定为1，8-二羟基-2，3-甲氧基-6-甲基蒽醌(1，8-dihydroxy-2，3-dimethoxy-6-methylanthracene-9，10-dione)。

化合物5：黄色针状结晶，易溶于甲醇，C21H20O9，mp：258～261 ℃。ESI-MSm/z：415[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：12.82(1H，s，a-OH)，7.85(1H，m，H-6)，7.71(1H，brs，H-7)，7.70(1H，brd，J=7.8 Hz，H-5)，7.51(1H，brs，H-4)，7.20(1H，brs，H-2)，5.10(1H，d，J=7.5 Hz，H-1′)，4.62～3.22(6H，m，H-2′，3′，4′，5′，6a′，6b′)，2.43(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：187.4(C-9)，182.0(C-10)，161.7(C-8)，158.3(C-1)，147.7(C-3)，135.8(C-6)，134.6(C-4a)，132.2(C-10a)，124.1(C-7)，122.6(C-2)，120.5(C-4)，119.4(C-5)，114.6(C-8a，C-9a)，100.6(C-1′)，77.3(C-3′)，76.6(C-5′)，73.4(C-2′)，69.5(C-4′)，60.6(C-6′)，21.4(3-CH3)。以上数据与参考文献数据[9]一致，故确定为大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷(chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside)。

化合物6：黄色粉末，C21H20O10，易溶于甲醇，mp：237～238 ℃。ESI-MSm/z：431[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：13.17(1H，brs，a-OH)，11.25(1H，brs，β-OH )，7.46(1H，brs，H-4)，7.28(1H，d，J=2.5 Hz，H-5)，7.16(1H，brs，H-2)，7.00(1H，d，J=2.5 Hz，H-7)，5.10(1H，d，J=5.0 Hz，H-1′)，4.61～3.23(6H，m，H-2′，3′，4′，5′，6a′，6b′)，2.40(3H，s，3-CH3)。13C-NMR(125 Hz，DMSO-d6)δC：186.5(C-9)，182.0(C-10)，164.1(C-6)，161.6(C-8)，161.3(C-1)，146.9(C-3)，136.4(C-10a)，132.2(C-4a)，124.3(C-2)，119.1(C-4)，114.3(C-8a)，113.4(C-9a)，108.4(C-7，C-5)，100.8(C-1′)，77.3(C-3′)，76.5(C-5′)，73.3(C-2′)，69.3(C-4′)，60.5(C-6′)，21.4(3-CH3)。以上数据与参考文献数据[10]一致，故确定为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucoside)。

化合物7：C29H50O，无色针状结晶，易溶于氯仿，mp：137～138 ℃。ESI-MSm/z：415[M+H]+。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ：1.00(3H，s)，0.91(3H，s)，0.85(3H，d)，0.83(3H，d)，0.81(3H，s)，0.67(3H，s)，3.52(1H，s，H-3)，5.35(1H，d，H-6)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)δC：140.3(C-5)，120.7(C-6)，70.6(C-3)，55.9(C-14)，55.1(C-17)，50.2(C-9)，44.9(C-13)，41.3(C-4)，38.8(C-12)，36.3(C-1)，35.5(C-10)，27.9(C-27)，25.1(C-16)，24.4(C-15)，22.1(C-19)，19.7(C-18)，20.2(C-28)，20.1(C-28)，18.8(2-26)。以上数据与参考文献数据[11]一致，故确定为β-谷甾醇(β-sitosterol)。

化合物8：C35H60O6，白色粉末，可溶于氯仿-甲醇(1∶1)的混合溶液中。mp：284～285 ℃。ESI-MSm/z：575[M-H]-。1H-NMR(500 MHz，DMSO)δ：0.96(3H，s)，0.90(3H，d，J=6.45 Hz)，0.82(3H，s)，0.80(6H，m)，0.65(3H，s)，3.00-3.67(6H，m)， 4.39(1H，t，J=5.70 Hz，H-3)，4.21(1H，d，J=7.80 Hz，Glc-H-1)，5.35(1H，d，H-6)。13C-NMR(125 MHz，DMSO-d6)δC：38.8(C-1)，30.0(C-2)，77.2(C-3)，40.8(C-4)，141.1(C-5)，121.5(C-6)，33.7(C-7)，32.0(C-8)，50.2(C-9)，26.0(C-10)，21.3(C-11)，28.6(C-12)，42.2(C-13)，56.6(C-14)，24.5(C-15)，42.3(C-16)，56.0(C-17)，12.1(C-18)，19.2(C-19)，36.4(C-20)，19.1(C-21)，35.9(C-22)，37.4(C-23)，45.7(C-24)，29.4(C-25)，19.3(C-26)，19.5(C-27)，23.0(C-28)，12.3(C-29)，101.2(C-1″)，74.0(C-2″)，77.4(C-3″)，70.6(C-4″)，77.2(C-5″)，61.5(C-6″)。以上数据与参考文献数据[11]一致，故确定为胡萝卜苷(daucosterol)。

参考文献：

[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M]. 北京：科学出版社，1988，25(1): 166-167.

[2] 中国科学院西北高原生物研究所. 藏药志[M]. 西宁：青海人民出版社，1991，86-87.

[3] 曹亮，周建军. 蒽醌类化合物的研究进展[J]. 西北药学杂志， 2009，24(3): 237-238.

[4] 曾爱国，王云彩，赵桂兰. 大黄中游离蒽醌的提取工艺研究[J]. 西北药学杂志， 2004，19(5): 203-204.

[5] 敏德，徐丽萍. 天山大黄的化学成分研究[J]. 中国中药杂志， 1998，23(7): 416-418.

[6] 李军林，李家实. 河套大黄的蒽醌类成分研究[J]. 中草药， 2000，31(5): 321-324.

[7] 徐庆，覃永俊，苏小建，等. 掌叶大黄化学成分研究[J]. 中草药，2009，40(4): 533-536.

[8] Guy Roberge，Paul Brassard. Synthesis of contiguously trihydroxylated naphtho-and anthraquinones[J].J Org Chem，1981，46(21): 4161-4166.

[9] 向兰，康晖. 矮大黄化学成分研究[J]. 中草药，2002，33(5): 394-396.

[10]向兰，寇晋萍. 窄叶大黄蒽醌类化学成分研究[J]. 中草药，2001，32(5): 395-397.

[11]宋龙，张承忠，李冲，等. 单脉大黄化学成分研究[J]. 中药材，2003，26(4): 260-261.