不同生境灵芝对环境适应性差异研究

2014-03-01韩曦王佳巍汤伟权李滨胜

防护林科技 2014年7期

韩曦，王佳巍，汤伟权，李滨胜

（黑龙江省森林植物园，黑龙江哈尔滨150040）

灵芝（Ganoderma lucidum）隶属于真菌门层菌纲非褶菌目灵芝科灵芝属［1］，又称灵芝草、木灵芝和菌灵芝［2］，是中医药学宝库中的珍品。不仅能够治疗癌症、脑溢血和心脏病，还对胃肠、肝脏、肾脏、白血病、神经衰弱、慢性支气管炎、哮喘、过敏等疾病有显著疗效。近年来，国际药学界发现灵芝所含的“长寿元素”有机锗是人参的4～5倍，因此被誉为“健康食品之冠”，并享誉世界［3－5］。

随着经济的发展和社会的进步，人们的健康和保健意识不断增强，灵芝的需求日益增高，产业化发展也在不断深入。本文以大兴安岭地区2种灵芝品种为对象，多角度进行生物学特性研究，确定最佳的生长条件，以便更好地指导菌种的选择和栽培，促进灵芝产业健康、有序发展。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试菌株为大兴安岭北坡灵芝LZ01、南坡灵芝LZ02。

供试培养基：固体PDA培养基和不同成分的完全培养基。

1.2 试验方法

对在大兴安岭北坡、南坡采摘的2种灵芝菌种进行分离和纯化，在PDA培养基上扩大培养。进行不同温度、pH值、氮源、碳源及碳氮比的处理，每个处理重复5次，测定2菌种在不同条件下的生长速度，了解不同条件对两种灵芝生长的影响，进一步确定它们的菌丝最佳生长条件。

具体做法：（1）温度设16℃、20℃、24℃、28℃、32℃，共5个梯度；（2）pH值4～8设定5个梯度，全部放置在25℃的恒温培养箱中培养；（3）氮源培养按0.2%的氮含量分别加入酵母菌、黄豆粉、甘氨酸、硫氨酸、蛋白胨配成不同氮源完全培养基，置于25℃的恒温培养箱，无光条件下培养；（4）碳源培养按2%的碳含量分别加入葡萄糖、蔗糖、淀粉、麦芽糖、乳糖配成不同碳源，置于25℃的恒温培养箱，无光条件下培养；（5）碳氮比培养以葡萄糖和甘氨酸配成5∶1、10∶1、20∶1、30∶1、40∶1等5种碳氮比培养基，置于25℃的恒温培养箱，无光条件下培养。上述处理均待菌丝萌发后观察菌丝状态，接种后培养72h，测量菌丝半径。

2 结果与分析

2.1 温度对菌丝生长的影响

图1 不同温度2种菌丝生长速度

2种灵芝菌丝在16～32℃下均能生长，但表现不同。当温度为16℃时2种灵芝菌丝生长缓慢，随温度的升高2种菌丝生长速度逐渐加快；24℃为LZ02菌丝生长速度最快点，而LZ01菌丝生长速度最快点则为28℃；温度为32℃时2种菌丝生长速度变慢。差异显著性检测表明，当温度为24～28℃时，2种灵芝菌丝生长速度无显著差异，说明它们最适生长温度范围为24～28℃。见图1。

2.2 pH值对菌丝生长的影响

图2 不同pH值2种菌丝生长速度

2种灵芝菌丝在pH 4～8均可生长。当pH 4～6时，两种菌丝生长速度都较快，表现为菌落菌丝浓密，生长势旺盛。而当pH进一步上升时，菌丝生长速度明显减缓。LZ01菌丝最适pH为5，LZ02菌丝最适pH为6。差异显著性检测结果表明，当pH为4～6时，其生长速度无显著差异，偏酸性的环境更有益于LZ01和LZ02的生长。见图2。

2.3 氮源对菌丝生长的影响

图3 不同氮源2种菌丝的生长速度

2种灵芝菌丝在供试的5种氮源中均能生长，但影响不同。以蛋白胨为氮源的菌丝生长速度最快，菌落菌丝生长最为浓密，其后依次是酵母菌、黄豆粉、甘氨酸、硫氨酸。差异显著性检测表明，以蛋白胨、酵母菌、黄豆粉为氮源时，其菌丝生长速度无显著差异，并且生长速度快；而以甘氨酸、硫氨酸为氮源时，生长速度变慢：可见有机氮源对这2种灵芝品种生长较好。综合生长速度和生长势来看，蛋白胨为2菌种适宜生长的氮源。见图3。

2.4 碳源对菌丝生长的影响

图4 不同碳源2种菌丝的生长速度

2种灵芝菌丝在供试的5种碳源中均能生长，但对菌丝生长的影响不同。LZ01以可溶性淀粉为碳源时，菌丝生长速度最快，菌落菌丝最浓密、生长势旺盛，其后依次为麦芽糖、蔗糖、果糖、葡萄糖。LZ02则是以葡萄糖为碳源时，菌丝生长速度最快，菌落菌丝最浓密、生长势旺盛。其后依次为蔗糖、麦芽糖、果糖、可溶性淀粉。见图4。