不同剂量水蛭粉对高脂饮食兔血脂水平的影响

罗哲容，苏双良，任慧君，王 慧，赵志壮，冷雪冰，白秀娟，*（.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨5000；.东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江哈尔滨5000；．吉林农业大学中药材学院，吉林长春08）

不同剂量水蛭粉对高脂饮食兔血脂水平的影响

罗哲容1，苏双良2，任慧君1，王 慧2，赵志壮2，冷雪冰3，白秀娟2，*
（1.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨150030；2.东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江哈尔滨150030；3．吉林农业大学中药材学院，吉林长春130118）

目的：研究不同剂量水蛭粉对高脂饲料喂养兔血清血脂水平的影响。方法：选择体质健康伊拉肉兔150只，随机分成5组，即空白组、高脂组和三个不同剂量组（0.15、0.075、0.0375g/kg水蛭粉），在实验前、实验第20d和第40d空腹称重，并心脏采血，测定血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量。结果：各组体重随时间而增长，实验结束时，各组间体重差异不显著（p＞0.05）；高脂组TC、TG、LDL-C水平明显高于空白组（p＜0.01），HDL-C水平高于空白组，但差异不显著（p＞0.05）；高、中、低剂量组TC、TG、LDL-C水平明显低于高脂组（p＜0.01），高、中、低剂量组之间无显著差异（p＞0.05）；高、中、低剂量组HDL-C水平与高脂组差异不显著（p＞0.05）。结论：水蛭粉能调节高脂饲料喂养过程中兔的血脂水平，对高脂血症起到保健作用，且低剂量水蛭粉（0.0375g/kg）则可达到显著的降血脂效果。

水蛭，高脂饮食，血脂，兔

《中国药典》记载，中药水蛭来源为水蛭科动物蚂蟥（Whitmania pigra Whitman）、水蛭（Hirudo nipponica Whitman）或柳叶蚂蟥（Whitmania acranulata Whitman）的干燥全体[1]，具有抗凝血、抗癌、抗炎、抗纤维化等功效[2-5]，在治疗缺血性中风、动脉粥样硬化、恶性肿瘤、慢性肾病、心绞痛和脑损伤等临床疾病都有较好的疗效[6-10]。李汉平[11]用单味水蛭粉治疗高脂血症62例，取得较好疗效。如今，由于人们的生活质量在不断提高，饮食结构也比较复杂，大多数情况下易造成高脂饮食，体内血脂水平受高脂饮食的影响而不断升高，从而可能导致高脂血症、脂肪肝、动脉粥样硬化以及冠心病等相关疾病。因此，开发出更多更好的具有调节血脂水平并且对人体没有伤害的保健药品是势在必行的。长久以来，利用水蛭及其复方治疗高脂血症的相关报道较多，但对水蛭在日常饮食中添加是否可起到调节血脂水平、预防相关疾病、发挥营养保健作用及其适宜用量研究报道较少。本实验以兔为研究对象，探索在高脂饲料喂养过程中，添加不同剂量的水蛭粉对兔血脂水平变化的影响，为水蛭粉作为营养保健药品进行开发和利用奠定实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

基础饲料 黑龙江肇东希望饲料有限责任公司；高脂饲料 成分为0.5%胆固醇、8%蛋黄粉、10%猪油、81.5%基础饲料；水蛭（Hirudo nipponica） 哈尔滨中药材大市场，粉碎后与高脂饲料混匀制成含1%水蛭粉的高脂饲料（即100g高脂饲料中含水蛭粉1g）；实验动物 体质健康的伊拉兔150只，雄性，3月龄，体重为（2.045±0.031）kg，由东北农业大学特种经济动物实验室肉兔繁育基地提供。

飞鸽离心机 上海安亭科学仪器厂。

1.2 分组和给药

兔适应性饲养7d，观察记录采食量。适应期结束后，随机分为5组，每组30只。饲喂方案见表1。上述各组兔均单笼饲养，限食量，根据适应期采食情况规定每兔每日100g，自由饮水，连续喂养40d。高、中、低剂量组均按计算好的药量饲喂含1%水蛭粉的高脂饲料，待食完后给与高脂饲料补充至规定食量。每10d称体重1次调整含药高脂饲料的饲喂量。

1.3 体重及生化指标的测定

实验开始前、实验第20d和第40d进行体重的测定以及心脏采血。称重和采血前空腹12h，自由饮水。采集的血样室温静置至血清析出后，3000r/min离心10min，采集血清。将血清样本送至吉林省吉林市化工总医院进行含量检测，检测指标包括血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）。低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量由F公式[12]LDL-C=TC-（HDL-C）-TG/2.2计算得出。

1.4 数据处理

各组实验数据采用平均值±标准误表示，用SPSS 17.0软件对所有数据利用Oneway-ANOVA程序进行方差分析和Duncan多重比较。

表1 实验设计方案Table 1 Experiment design

表2 不同时期各组体重（kg）Table 2 Weight in different groups of different time（kg）

表3 不同时期各组TC水平（mmol/L）Table 3 Serum TC in different groups of different time（mmol/L）

2 结果与分析

2.1 各组动物体重水平

不同时期各组兔子的体重变化见表2。实验前，各组间体重差异不显著（p＞0.05）；第20d，高脂组显著低于其他组（p＜0.01），推测是由于初期兔对高脂饲料的采食量少，从而导致体重增长缓慢，高、中、低剂量组间差异不显著（p＞0.05）；第40d，各组间比较，差异不显著（p＞0.05），因此可以说明，兔对高脂饲料的适应性随着时间不断增强，采食逐渐恢复正常水平；实验结束时，各组兔体重均增加，可以推测出饲料中添加的水蛭粉对兔体重的增加无不良影响。

2.2 水蛭粉对血清中血脂水平的影响

2.2.1 血清总胆固醇（TC）水平变化 不同时期各组TC水平变化见表3。实验前，各组TC含量差异均不显著（p＞0.05）；第20d，各组间差异均不显著（p＞0.05），但高脂组和高、中、低剂量组均高于空白组，高、中、低剂量组均低于高脂组，可以说明高脂饲料的喂养使兔的TC含量逐步上升，添加水蛭粉的各组TC含量上升的速度与高脂组相比相对较慢；第40d，高脂组显著高于其他组（p＜0.01），空白组和高、中、低剂量组间差异不显著（p＞0.05），结果表明，实验结束时，饲喂高脂饲料可使兔血清TC含量明显升高，水蛭粉能明显抑制血清TC升高，其中低剂量组效果最明显。

2.2.2 血清甘油三酯（TG）水平变化 不同时期各组TG水平变化见表4。实验前，各组TG含量差异均不显著（p＞0.05）；第20d，高脂组和高、中、低剂量组均高于空白组，说明兔食用高脂饲料会使血清TG升高，各组间差异均不显著（p＞0.05），推测在此阶段，水蛭粉对TG的影响不明显；第40d，高脂组显著高于其他组（p＜0.01），说明高脂饲料的喂养使兔血清TG显著升高，空白组和高、中、低剂量组间差异不显著（p＞0.05），并且高、中、低剂量组TG趋于正常水平，推测40d的饲喂过程中，水蛭粉需经过一段时间的才发挥出抑制TG水平升高的效果，并且低剂量的水蛭粉抑制TG水平上升的效果最佳。

2.2.3 血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平变化 不同时期各组HDL-C水平变化见表5。实验前，各组HDL-C水平差异均不显著（p＞0.05）；第20d，高脂组高于空白组和高、低剂量组，低于中剂量组，组间差异均不显著（p＞0.05），说明水蛭粉对血清中HDL-C水平有一定的影响，但此阶段效果不明显；第40d，高剂量组高于其他各组，与空白组和低剂量组差异显著（p＜0.05），高脂组高于空白组，但差异不显著（p＞0.05）。结果表明，本实验高脂饲料的喂养对兔血清HDL-C水平的影响不显著，推测水蛭粉有升高血清HDL-C的功效。

2.2.4 血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平变化 不同时期各组LDL-C水平变化见表6。实验前，各组LDL-C水平差异均不显著（p＞0.05）；第20d，高脂组高于其他各组，但彼此之间差异均不显著（p＞0.05），高、中、低剂量组LDL-C升高趋势较高脂组缓慢，说明高脂饲料的饲喂能使兔血清LDL-C水平升高，水蛭粉能减缓其上升趋势；第40d，高脂组显著高于空白组和高、中、低剂量组（p＜0.01），高、中、低剂量组低于空白组，但组间差异不显著（p＞0.05），结果表明，高脂饲料的喂养使兔血清LDL-C水平明显升高，水蛭粉有抑制血清LDL-C升高且使其趋于正常水平的功效。

3 讨论

目前，人们生活水平的提高使得在日常生活中出现饮食结构不均衡的现象，其中高脂饮食最为常见。当人的饮食状况长期维持在高脂饮食，会使血液中TC、TG含量过高而形成高脂血症，多余的脂质附着在血管内壁上不断被氧化形成脂质过氧化物，进而在血管中堆积，从而极易导致动脉粥样硬化，冠心病、脑血栓等心脑血管疾病大都与动脉动脉粥样硬化有关[13]。

表4 不同时期各组TG水平（mmol/L）Table 4 Serum TG in different groups of different time（mmol/L）

表5 不同时期各组HDL-C水平（mmol/L）Table 5 Serum HDL-C in different groups of different time（mmol/L）

表6 不同时期各组LDL-C水平（mmol/L）Table 6 Serum LDL-C in different groups of different time（mmol/L）

倪鸿昌等[14]报道，高脂血症是导致脂肪肝的重要因素之一，同时脂肪肝患者血中TC和TG含量明显高于非脂肪肝患者，且以TG增高为主要特征。曹斌等[15]报道，高脂血症将导致动脉粥样硬化，是冠心病、脑卒中的危险因素，并且认为TG、LDL-C与其危险性有协同作用。王志辉等[16]报道，TC、TG的升高、HDL-C的降低都参与了动脉粥样硬化的发生发展，血脂异常（TC、TG、LDL-C的升高，HDL-C的降低）是其发病的始动性生物化学变化。李凤文等[17]报道，LDL-C易被氧化成为氧化修饰的低密度脂蛋白（OXLDL），OX-LDL的启动和放大过程，会引发单核细胞黏附在血管内皮细胞上，从而改变内皮细胞结构和功能，并诱导内皮细胞表达多种粘附分子，促进动脉粥样硬化的发生与发展，因此OX-LDL是促进动脉粥样硬化的重要危险因素。并且有研究指出HDL-C是动脉粥样硬化性心脑血管疾病的保护因子[18]。因此，本实验通过检测血清中TC、TG、HDL-C和LDL-C含量来反映兔的血脂状况，观察高脂饮食以及水蛭粉对兔血脂水平的影响。

李凤文[17]、范亚明等[19]的实验中，模型组TC、TG和LDL-C水平与空白组比较显著升高，与本实验高脂组结果一致，但其HDL-C水平降低（p＞0.05），本实验高脂组HDL-C水平升高（p＞0.05），推测原因可能是由于高脂饲料成分和实验时间不同造成。李凤文等[17]利用水蛭治疗动脉粥样硬化模型兔4周，治疗量为每日0.57g/kg，血清TC、TG、LDL-C水平降低，HDL-C水平升高；范亚明等[19]在研究水蛭及水蛭素对兔动脉粥样硬化的影响时，一组实验兔饲喂每日添加2g水蛭粉的胆固醇饲料，实验3个月时，血清TC、TG、LDL-C水平降低，HDL-C水平升高。两者的实验所添加的水蛭粉含量与本实验高、中、低剂量相比均较高，但血脂水平变化趋势一致，说明本实验在高脂饮食的同时添加较低剂量的水蛭粉同样可以改善体内血脂状况。对于抑制血脂升高的保健类药物的研究也有报道，王蕾等[20]用番茄红素调节动脉粥样硬化兔血脂，实验结果说明番茄红素可以明显降低TC和TG水平，对HDL-C和LDL-C水平影响甚微；马亚兵等[21]利用葡萄籽原花青素对兔高脂血状况进行调节，发现其可明显降低TC、TG和LDL-C水平，对HDL-C水平影响很小。本实验结果证明水蛭粉对TC、TG、HDL-C和LDL-C水平都具有明显的影响，并且水蛭粉可直接应用到药品中而不需要进一步的提取精化，从而可降低开发成本，因此水蛭作为保健药品开发利用与番茄红素和葡萄籽原花青素相比具有明显的优势。

本实验发现水蛭粉能显著降低高脂饮食兔血清中TC、TG、LDL-C的含量，升高HDL-C含量，减少脂类物质在血管内的沉积，增加脂质的逆转运，从而抑制血脂水平的升高，起到预防保健作用，并且水蛭粉低剂量组（0.0375g/kg·d）的降脂效果最佳。

4 结论

从本实验可以看出，高脂饮食可以使兔血脂水平发生紊乱，在高脂饮食中添加不同剂量水蛭粉均能够改善高脂饮食兔的血脂水平，且不同剂量水蛭粉降血脂水平有一定差异，综合考虑，最佳剂量为低剂量（0.0375g/kg）。水蛭粉作为保健品用来预防高脂血症的相关机理，尚需进行深入的研究与探索。

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Effect of adding different dosage Hirudo nipponica on the level of blood lipids in rabbits fed with high-fat diet

LUO Zhe-rong1，SU Shuang-liang2，REN Hui-jun1，WANG Hui2，ZHAO Zhi-zhuang2，LENG Xue-bing3，BAI Xiu-juan2，*
（1.College of Life Science，Northeast Agricultural University，Harbin 150030，China；2.College of Animal Science and Technology，Northeast Agricultural University，Harbin 150030，China；3.College of Chinese Medicinal Materials，Jilin Agricultural University，Changchun 130118，China）

Objective：To study the effects of different dosage Hirudo nipponica on the level of blood lipids in rabbits fed with high-fat diet.Methods：150 male meat rabbits were selected and randomly divided into five groups，control group，high serum lipid group and three different dosage Hirudo groups.Rabbits in Hirudo groups were daily fed with Hirudo（0.15，0.075，0.0375g/kg）for 40 days.The blood samples were drawn from heart just before the experiment and the 20th day，40th day of the experiment.The blood lipids level in serum included total cholesterol（TC），triglyceride（TG），high density lipoprotein（HDL-C），low density lipoprotein（LDL-C）.Results：The body weight of rabbits in each groups was increasing during the test period，but no significant was observed between each groups（p＞0.05）.The blood lipids in high serum lipid group was abnormal，compared with control group，the levels of TC，TG，LDL-C in high serum lipid group were significantly increased（p＜0.01），the level of HDL-C was higher（p＞0.05）.Compared with high serum lipid group，the level of TC，TG，LDL-C in three Hirudo groups were significant decreased（p＜0.01），while no significant differences（p＞0.05）were observed between the three Hirudo groups.Compared with high serum lipid group，the level of HDL-C in Hirudo group had no significant differences（p＞0.05）.Conclusion：Hirudo could regulate the blood lipid and prevent the formation of hyperlipidmia，and the lower level Hirudo（0.0375g/kg）could significantly decrease blood lipids.

Hirudo nipponica；high-fat diet；blood lipids；rabbit

TS201.1

A

1002-0306（2014）14-0359-04

10.13386/j.issn1002-0306.2014.14.071

2013－11－25 *通讯联系人

罗哲容（1988-），女，硕士研究生，研究方向：动物学经济动物方向。