夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪生精功能的影响

江和基 曾新斌 罗 刚 黄志坚

（福建农林大学动物科学学院 福建省动物药物工程实验室，福州 350002）

夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪生精功能的影响

江和基 曾新斌 罗 刚 黄志坚＊

（福建农林大学动物科学学院 福建省动物药物工程实验室，福州 350002）

夏季高温情况下，选择某猪场8头种公猪，随机分为2组，即牡蛎粗多糖试验组、对照组，对试验期间公猪的精液量、精子活力进行统计，并采集试验前后精液，检测精子密度、精子畸形率、精液抗氧化MDA、SOD、GSH-PX指标。结果：牡蛎粗多糖试验组公猪的射精量、精子活力比对照组都有一定水平提高，但差异不显著(P＞0.05)；牡蛎粗多糖试验组的精子密度增加0.32亿个/mL，差异不显著（P＞0.05），精子畸形率减少了4.26%，差异显著（P＜0.05）；试验组精液 SOD、GSH-PX显著提高（P＜0.05）；MDA含量极显著降低（P＜0.01）。结论：在夏季高温情况下，牡蛎粗多糖对精液抗氧化指标和种公猪的生精功能有较明显改善作用。

牡蛎粗多糖 猪 生精功能

母猪的繁殖性能与猪场的生产成绩息息相关，当代养猪业的发展已经朝着规模化、集约化方向发展，目前规模猪场普遍都采用人工授精方式进行母猪的配种，因此，种公猪的精液品质至关重要。在夏季高温应激情况下，种公猪的精液质量会不同程度受到影响。试验以牡蛎粗多糖为试验原料，以种公猪为试验动物，探讨牡蛎粗多糖对改善精液抗氧化指标和公猪生精功能的影响，为养猪生产服务。

1 材 料

1.1 试验试剂 丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽测定试剂盒，购置南京建成生物工程研究。

1.2 主要仪器 移液枪；恒温水浴锅；UV-3200紫外可见分光光度计；普通显微镜；倒置显微镜；载玻片；染色液等。

2 方 法

2.1 试验分组 选择福建南平某猪场8头公猪，随机分成2组，每组4头。对照组饲喂基础饲料，试验组在基础饲料中添加饲喂0.8%牡蛎粗多糖，试验期为60 d（2010年6月下旬到9月），数据的统计从饲喂15 d后开始进行。

2.2 日常管理方法 按照猪场生产程序，每2～3 d采集公猪精液1次，并于试验前后采集各组3头公猪的精液。

2.3 测定方法 丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽测定试剂盒按南京建成试剂盒说明书进行；其他指标的检测按以下方法进行。

2.3.1 精液量 统计试验组及对照组每头公猪每次的射精量。

2.3.2 精子活力 显微镜载物台、载玻片及盖玻片在检查前预热至37～39℃，用取样器取10 μL或15 μL精液，注在预热后的载玻片中间，并盖上盖玻片。用100倍或400倍显微镜检测精子活力。精子活力评分方法见表1。

表1 精子活力5级评分方法

2.3.3 精子密度 精子密度的测定采用血球计数板法，首先将计数板放在载物台上，用取样器吸取25 μL稀释后精液（稀释40倍），滴入到计数板上，再用盖玻片进行推片，最后置于显微镜下找到计算室，选择有代表性的五个方格，依下列已简化的公式计算原精子密度：精子密度（亿个/mL）＝五个方格总精子数×0.02。

2.3.4 精子畸形率统计 按常规方法染色，制作精液载玻片。将载玻片放在400倍显微镜下观察若干个视野的150个精子，计算出精子畸形率，计算公式：畸形率（%）＝畸形精子数/150×100%。

2.4 数据处理与分析 对试验数据结果采用Office 2003 Excell以及SPSS16.0单因子方差 （One-Way ANOVA）软件统计与分析，数据结果以±SE表示。

3 结果

3.1 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪射精量及精子活力的影响 对试验期内试验组与对照组射精量进行统计，评估精子活力，结果见表2。试验组与对照精液量及精子活力差异都不显著 （P＞0.05），但是试验组与对照组比较，可以看出试验组的射精量、精子活力比对照组都有一定水平的提高，说明牡蛎粗多糖对提高公猪的射精量及活力有一定的效果。

表2 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪射精量及精子活力的影响

3.2 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪精子密度、畸形率的影响 分别采集试验前后试验组与对照组精液，测定精子密度与畸形率，结果见表3、图1。试验前，试验组与对照组的精子密度和精子畸形率差异均不显著（P＞0.05）；试验结束后，试验组的精子密度比对照组增加了0.32亿个/mL，但差异不显著（P＞0.05），精子畸形率减少了4.26%，差异显著 （P＜0.05）。从图1可以看出，对照组（A、B）精子出现精子畸形（精子断尾）的概率比试验组（C、D）大。可见，公猪饲喂牡蛎粗多糖后，对提高精子密度和降低精子畸形率都有一定积极影响。

表3 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪精子密度、畸形率的影响

图1 试验组与对照组精子的比较

3.3 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对公猪精液抗氧化指标的影响 对试验前后试验组、对照组精子的抗氧化指标进行测定，结果见表4。试验前，试验组与对照组SOD、MDA、GSH-PX差异均不显著 （P＞0.05）；试验结束后，试验组SOD、GSH-PX显著提高（P＜0.05）；MDA含量较对照组极显著降低（P＜0.01）。结果表明，公猪饲喂牡蛎粗多糖后，精液的抗氧化能力有一定的改善。

4 讨 论

猪是体温为39℃的恒温动物，研究表明，公猪在18～24℃、相对湿度为60%～75%的情况下最适宜饲养。夏季高温（＞30℃）会使公猪血液中的ACTH含量升高，通过下丘脑-垂体-腺轴（肾上腺、甲状腺、性腺）使垂体前叶促性腺激素减少，甲状腺分泌减少，还可以抑制睾丸中类固醇的产生，导致公猪的交配欲减退，性欲降低；同时高温刺激睾丸组织，使睾丸生精机能发生障碍，精细胞发生变性、死亡，最终导致公猪的射精量、精子活力、精子密度降低，畸形精子数比例增加[1-3]。在福建地区，每年的6、7、8、9月都处于环境温度比较高的状态，有时温度高达40℃甚至以上。在临床上常常发现每年的下半年母猪返情率提高、产仔数降低，究其原因可能就是夏季高温导致种公猪的精液品质下降。韩有元[4]通过对不同温度下24头杜洛克公猪的生精功能统计，结果发现室温越高，采精量、精子密度、精子活力越低，精子畸形率则越高；其中 30.7℃组平均采精量为208.7 mL，精子密度为2.82亿个/mL，精子活力为80%，精子畸形率为15.4%；32.6℃组平均采精量为190.8 mL，精子密度为2.67亿个/mL，精子活力为76%，精子畸形率为18.4%；35.1℃组平均采精量为169.5 mL，精子密度为2.48亿个/mL，精子活力为69%，精子畸形率为27.6%，说明温度越高对精液品质的影响越大。

表4 夏季高温应激下牡蛎粗多糖对抗氧化指标的影响

研究认为，精子的氧化损伤是多不饱和脂肪酸在活性氧族产生和清除活动不平衡的结果，在正常情况下，射出精液中清除活性氧族作用的能力依赖于精浆的抗氧化物质[5]，因此，精液的抗氧化能力与精液的质量有一定的关系。Gadea J等[6-7]研究认为，在冷冻稀释液中添加1 mmol或5 mmol GSH，对解冻后的精子活力和成活率的提高及降低精子畸形数有一定的效果，其中以添加1 mmoL GSH对精子的保护效应更好。Roca J等[8]研究认为单独添加SOD或混合添加SOD和过氧化氢酶都能够提高解冻后的精子活率。Brezezinska等[9]对公猪连续7周给入1 000 IU/d水溶性维生素E类似物，精液中MDA含量显著下降（P＜0.05），精浆中SOD和氧化型谷胱甘肽浓度也有所升高，精子浓度显著提高（P＜0.05）。

目前人们已经普遍认识到夏季高温对种公猪的危害，周伟良等[3]认为在夏季高温下，应该从猪舍内部与外部环境控制、营养调控和饲养管理三个方面来减小热应激对公猪性能的影响。张晓霞等[10]认为减轻热应激对公猪的影响，重视夏季高温对种公猪环境温度的控制，对于提高猪场的整体效益有着巨大的作用。在夏季高温情况下，本试验通过在公猪饲料中添加牡蛎粗多糖，结果显示，试验组精液量及精子活力比对照组都有所提升，但差异不显著 （P＞0.05）；试验组的精子密度增加0.32亿个/mL，差异不显著 （P＞0.05），精子畸形率显著减少4.26%（P＜0.05）；试验组SOD、GSH-PX显著提高 （P＜0.05）；MDA含量较对照组极显著降低（P＜0.01），其抗氧化能力与Brezezinska等[9]对公猪给入1 000 IU/d水溶性维生素E类似物的结果基本一致。可以看出，公猪饲喂牡蛎粗多糖后，对公猪精液品质的改善有一定的作用。

5 小结

公猪质量对于提高猪场整体的繁殖成绩作用巨大，因此，热应激处理不当将会给养猪业造成巨大损失。本试验公猪饲喂牡蛎粗多糖后，对提高公猪精液量、精子活力、密度，降低精子畸形率有一定的作用，说明牡蛎粗多糖应用于种公猪，对提高种公猪精液品质、改善公猪的生精功能有积极的作用。

[1]赵德明,张仲秋,沈建忠,译.猪病学[M].9版.北京:中国农业大学出版社,2008:1176-1180.

[2]修金生.生态环保猪场设计与管理[M].福州:福建科学技术出版社,2010:18-24.

[3]周伟良,王志军,朱荣昌.高温热应激对公猪的影响及预防措施[J].猪业科学,2010(7):94-95.

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[5]杜立银,刘铁铮,鲁金波.抗氧化剂在猪精液冷冻保存技术中的应用[J].中国畜牧杂志,2008(1):47-50.

[6]Gadea J,Selles E,Marco M A,et a1.Decrease in glutathione content in boar sperm after cryopreservation Effect of the addition of reduced glutathione to the freezing and thawingextenders[J].Theriogenology,2004,62(3/4):690-701.

[7]Gadea J.Sperm factors related to in vitro and in vivo porcine fertility[J].Theriogenology,2005,63:431-444.

[8]Roca J,Maria J,Guez R,et a1.Survival and in vivo fertility of boar spermatozoa frozenin the presence of superoxide dismutase and/or catalase[J].J Androl,2005,26(1):15-24.

[9]Brzezińska-?lebodzińska E,?lebodziński A B,Pietras B,et al. Antioxidant effect of vitamin E and glutathione on lipid peroxidation in boar semen plasma[J].Biological trace element research,1995,47(1/3):69-74.

[10]张晓霞,王欣志,刘洪江.夏季饲养种公猪的防暑降温措施[J].当代畜禽养殖业,2010(7):44-45.

A

1003-4331（2014）03-0003-04

福建省科技厅农业科技重点项目（2011N0001）资助。

江和基（1963.10-），男，福州人，高级兽医师，从事临床兽医与实验室管理。E-mail:jhj5678@163. com。

＊通信作者：黄志坚（1963.9-），男，福建惠安人，教授，从事动物疾病控制与保健。E-mail:huangzj1999@sina. com。