微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测价值对比

2014-02-22宋惠英

中国卫生产业 2014年28期

关键词：微柱凝胶红细胞

宋惠英

复旦大学附属中山医院青浦分院输血管理科，上海201700

微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测价值对比

宋惠英

复旦大学附属中山医院青浦分院输血管理科，上海201700

目的探讨微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测价值差异。方法选取含有红细胞同种抗体血液样本163例，分别采用微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法检测；比较两种方法红细胞同种抗体总检出准确率，-D，-E，-C，-c，-e，-C+e，-E+c，-M，-N，-S，-s，-Dia，-Fya，-Fyb，-Jka，-Jkb，-K，-k，-Lua，-Lub，-Lea，-Leb，-P1及未知抗体特异性检出准确率等。结果常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率分别为82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05）；其中常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于MSN系统M抗体检测准确率分别为28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于未知抗体特异性抗体检测准确率分别为52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝胶抗球蛋白法用于MSN系统M抗体、未知抗体特异性抗体检测准确率均显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测总体价值优于试管抗球蛋白；但在临床配血时如微柱凝胶抗球蛋白法检测出现不匹配现象，应与常规试管抗球蛋白法联合应用以提高输血指导效果。

微柱凝胶抗球蛋白法；抗球蛋白法；红细胞；同种抗体；检测

作为输血安全检验重要组成部分之一，红细胞不规则抗体筛查对于预防输血反应和避免新生儿溶血症发生作用关键[1-2]；临床常规采用试管抗球蛋白法进行红细胞同种抗体检测，但操作较为繁琐[3]，而近年来微柱凝胶抗蛋白法以其操作简便，肉眼可行结果判定等优势开始在临床得到推广使用[4]，但两种方法红细胞同种抗体检测准确率优劣仍存在争议。本次研究选取含有红细胞同种抗体血液样本163例，分别采用微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法检测；比较两种方法红细胞同种抗体总检出准确率和各分型检出准确率，探讨两种方法用于红细胞同种抗体检测价值差异。

1 资料与方法

1.1 血液标本来源

选取我院检验科2012年1月—2013年10月收集因输血前相容性不符或发生输血不良反应血液标本163例，每份标本均包含抗凝和不抗凝血各10 mL。

1.2 检测仪器与试剂

检测仪器选择TXK4型血型血清学用离心机（长沙英泰离心机仪器有限公司生产），Diana免疫微柱孵育器(长春博研科学仪器有限公司生产)；检测试剂包括低离子/抗人球蛋白卡，抗球蛋白，谱试剂红细胞系及抗体筛查标准品，均由Diamed AG公司生产。

1.3 检测方法

1.3.1 抗球蛋白法以混合待检测液体（血清50 uL+3%～5%谱试剂红细胞系悬液25 uL）于37℃温箱内孵育40 min，足量盐水反复冲洗4～5次，倾倒上清后加入抗球蛋白50 uL，100r/min离心1 min后观察。

1.3.2 微柱凝胶抗球蛋白法以0.8%谱试剂红细胞系悬液50 uL注入低离子/抗人球蛋白卡中，再取待检测血清或血浆标本加入同一卡中，于37℃温箱内孵育20 min，依次以80r/min离心2 min，200r/min离心4 min后观察，参照试剂说明书进行结果判定[5]。

1.4 统计学处理

本次研究数据录入分析分别选择Epidata3.08和SPSS 18.0软件；统计学方法采用χ2检验；P＜0.05判定为差异有统计学意义。

2 结果

常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率分别为82.21%（134/163），98.77%（161/163）；微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05）；其中常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于MSN系统M抗体检测准确率分别为28.00%（7/25），100.00%（25/25）；而常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于未知抗体特异性抗体检测准确率分别为52.17%（12/23），100.00%（23/23）；微柱凝胶抗球蛋白法用于MSN系统M抗体、未知抗体特异性抗体检测准确率均显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05）；见表1。

表1 微柱凝胶抗球蛋白法与常规抗球蛋白法用于红细胞同种抗

3 讨论

常规试管抗球蛋白法和微柱凝胶蛋白凝胶法均以抗球蛋白为检测基础[6]；其中常规试管抗球蛋白试验是公认检测IgG抗体金标准，其通过将IgG抗体致敏红细胞与抗球蛋白混合后观察是否有凝集反应出现[7-8]；而微柱凝胶抗球蛋白法检测机制为综合生化、免疫学及物理等多种方法方法，利用游离红细胞和聚集红细胞直径不同，以一定孔径凝胶介质分离不同状态红细胞[9-10]。本次研究结果显示，常规抗球蛋白法与微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率分别为82.21%（134/163），98.77%（161/ 163）；微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05）；其中微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率与之前报道基本一致，但常规抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测准确率低于以往报道[11-12]，可能与研究血液样本，检测仪器及试剂差异有关。而微柱凝胶抗球蛋白法用于MSN系统M抗体、未知抗体特异性抗体检测准确率均显著高于常规抗球蛋白法，差异有统计学意义（P＜0.05），这与常规食管抗球蛋白法37℃孵育时间长于微柱凝胶抗球蛋白法有关，因延长孵育时间可降低对冷性抗体检测准确率[13-14]。

综上所述，微柱凝胶抗球蛋白法用于红细胞同种抗体检测总体价值优于试管抗球蛋白；但在临床配血时如微柱凝胶抗球蛋白法检测出现不匹配现象，应与常规试管抗球蛋白法联合应用以提高输血指导效果。

[1]于天华,遇红梅,梁海英,等.5050名患者Rh分型及不规则抗体鉴定结果分析[J].中国输血杂志,2012,25(8):756-758.

[2]王玲,陈晓曼,王倩,等.临床输血前常规检查RhE、C抗原必要性分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(16):2032-2034.

[3]朱莹,王婧.微柱凝胶技术检测521例O型血孕妇IgG A（B）抗体效价[J].检验医学与临床,2013,10(1):33-34.

[4]李娟,方代华,许琴,等.微柱凝胶技术在新生儿同种免疫性溶血病诊断中的临床应用[J].中国实用医刊,2013,40(15):56-57.

[5]张建武,邢志伟,孙志平,等.微柱凝胶抗人球蛋白法检测不规则抗体在输血中的应用[J].河北医药,2009,31(20):2826-2827.

[6]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:254.

[7]张志哲,黄青枝,吴会红,等.应用ROC曲线评价产前IgG抗A（B）效价检测对早期诊断ABO新生儿溶血病的价值[J].检验医学,2011,26(5): 338-339.

[8]苏宇清,喻琼,梁延连,等.微柱凝胶抗球蛋白技术检测红细胞同种抗体能力的研究[J].现代检验医学杂志,2011,26(6):73-75.

[9]李岚,董洪强,张琼丽.微柱凝胶技术在血小板抗体筛选中的应用[J].现代医学,2009,37(6):470-472.

[10]陈昌达,李就文,陈超群,等.微柱凝胶技术检测红细胞免疫性抗体的临床应用[J].分子诊断与治疗杂志,2010,2(5):342-343.

[11]刘峰,李归宁,王寒旭,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用研究[J].临床血液学杂志(输血与检验版),2013,26 (1):76-79.