透明质酸钠在白酒中的稳定性探讨

苑利，张敏爱，张丽娜，张建军*

（1.山西出入境检验检疫局技术中心，山西太原030024；2.吉林出入境检验检疫局技术中心，吉林长春130062）

透明质酸钠在白酒中的稳定性探讨

苑利1，张敏爱1，张丽娜2，张建军1*

（1.山西出入境检验检疫局技术中心，山西太原030024；2.吉林出入境检验检疫局技术中心，吉林长春130062）

通过对白酒中透明质酸钠含量的稳定性试验，为白酒中添加透明质酸钠的生产应用提供科学依据。根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）的稳定性试验规范要求，将试验酒样置于37～40℃和相对湿度75%的条件下，以透明质酸钠的含量为指标，对定量添加透明质酸钠的试验酒样进行连续跟踪检测，监测酒样中透明质酸钠的稳定程度。结果表明，试验酒样中透明质酸钠的终点值和初始值相比，其平均衰减值为7.73%≤10%，满足《保健食品检验与评价技术规范》的要求。

白酒；透明质酸钠；稳定性；分光光度法

透明质酸钠是近年来迅速发展起来的新型保健食品添加剂，是由葡糖醛酸-N-乙酰氨基葡糖为双糖单位重复连接而成的直链高分子黏多糖，是一种优良的天然保湿剂，广泛应用于化妆品、食品、药品和临床医学[1-8]。目前，对于透明质酸钠的各方面研究也已展开[9-21]。2008年，卫生部将透明质酸钠正式定为国家第一批新资源食品添加剂（见中华人民共和国卫生部公告[2008年第12号][22]），允许在各类保健食品中添加透明质酸钠。各大知名品牌白酒也在低度花香酒中加入透明质酸钠，期望打造女士适饮的保湿美容类白酒。目前，已有含透明质酸钠的白酒在市面上出售，但这类功效因子能否在白酒中稳定存在，尚未见相关文献报道。

本研究通过对白酒中透明质酸钠含量的稳定性试验，确定在白酒中添加透明质酸钠是否可以达到预期的保健效果，为酒类生产提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

试验酒样（玫瑰酒）：山西杏花村汾酒集团；硫酸（分析纯，体积分数95%～98%），咔唑（指示剂）：棕色瓶放置；四硼酸钠（分析纯）；无水乙醇（分析纯）：天津科密欧化学试剂有限公司；D-葡萄糖醛酸标准品（试剂级）：山东福瑞达生物医药有限公司。

硫酸硼砂溶液：称取4.77 g四硼酸钠，溶于500 mL浓硫酸（体积分数95%～98%）中，溶解完全摇匀备用，保存于密闭玻璃瓶中备用。

酒精咔唑溶液：称取0.125 g咔唑，溶于100 mL无水乙醇中，摇匀，置于棕色磨口瓶中，4～8℃条件下保存期为两个月。

标准葡萄糖醛酸溶液（200 mg/L）：准确称取葡萄糖醛酸20.0 mg，置于100 mL容量瓶中，加去离子水定容，摇匀备用。

1.2 仪器与设备

IKA Lab Dancer涡旋混合器：德国IKA公司；7230G可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；MLR-350H恒温恒湿培养箱：日本SANYO公司；XS204分析天平（感量0.1mg）：

瑞士METTLER公司；KQ-300E型超声波清洗器：昆山市超

声仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 标准曲线的绘制

准确移取葡萄糖醛酸标准溶液0、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0 mL、2.5 mL葡萄糖醛酸溶液分别置于10 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。得到0、10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL、40 μg/mL和50 μg/mL质量浓度的葡萄糖醛酸标准品溶液。

准确移取上述葡萄糖醛酸标准品溶液1.0 mL置于容量瓶中，分别加入5.0 mL硫酸硼砂溶液，置于冰水浴中冷却至4℃左右，轻轻摇振，用涡旋混合器混合均匀，然后置沸水浴中加热10 min，取出后冷却至室温。分别向各容量瓶中依次加入0.2 mL酒精咔唑溶液，再次用涡旋混合器充分混合均匀，置沸水浴中加热15 min，取出冷却至室温，定容至刻度，摇匀。用7230分光光度计于波长530 nm处测定其吸光度值A。以浓度C为纵坐标，吸光度值A为横坐标，绘制标准曲线或求出线性方程。

1.3.2 白酒中的透明质酸钠含量的测定

将样品酒置于（20±0.1）℃的水浴中保温30 min以上，准确移取1.0 mL保温后的酒样于10 mL容量瓶中，再准确加入2.0 mL去离子水，轻轻振摇，用涡旋混合器混合均匀。准确移取1.0mL该酒样于另一个10mL容量瓶中，查找标准曲线对应葡萄糖醛酸质量浓度或按线性方程计算结果。

1.3.3 稳定性试验方法

试验酒样加入了功能因子—透明质酸钠。酒体为带有玫瑰香味并含有透明质酸钠的无色配制酒，玫瑰香味为风味物质，透明质酸钠为功能因子。

将试验酒样置于温度37～40℃和相对湿度75%的条件下保存，对3组试验酒样中的透明质酸钠含量指标进行连续3个月的跟踪检测，检测方法依照1.3.2进行，每组酒样平行检测3次。首次检测值是样酒中透明质酸钠的初始含量，以后每隔一个周期检测一次，连续检测3个周期，共检测4次。

1.4 透明质酸钠含量计算公式

X=3×2.067×A

式中：X为透明质酸钠的含量，mg/L；A为标准曲线上查出的葡萄糖醛酸质量浓度，mg/L；2.067为换算系数；3为稀释倍数。

2 结果与分析

2.1 试验结果

2.1.1 标准曲线

标准工作曲线的原始数据及所得方程见表1。

2.1.2 稳定性检测结果

试验酒样中的透明质酸钠初始平均值为131.97 mg/L，终点平均值为121.78 mg/L；试验酒样在温度37～40℃和相对湿度75%的条件下，连续保存3个月，酒中透明质酸钠的终点值和初始值相比，其平均衰减值为7.73%，结果见表2。

表1 葡萄糖醛酸标准曲线的原始数据Table 1 Original data of the standard curve of glucuronic acid

表2 样品酒透明质酸钠检测结果Table 2 Testing results of sodium hyaluronate in liquor samples

2.2 结果分析

结果表明，试验酒样的透明质酸钠的初始含量平均值131.97mg/L≥120mg/L，最终含量（90d）平均值121.78mg/L≥100 mg/L，符合企业产品质量标准的要求；试验酒样中透明质酸钠的衰减值分别为7.06%、8.16%、7.96%，平均衰减值为7.73%≤10%，符合《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中对产品稳定性试验规范的要求。因此，酒样中所添加的透明质酸钠可以起到其保湿、润滑的保健功效。3结论

本试验根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）的稳定性试验规范要求，将试验酒样置于一定温度和相对湿度的条件下，以透明质酸钠的含量为检测指标，对3组定量添加透明质酸钠的试验酒样进行连续跟踪测试。检测方法采用硫酸酸解透明质酸钠，解离出的等量葡萄糖醛酸和咔唑生成紫红色有机配合物，在分光光度计波长530 nm处有吸收，与透明质酸钠含量成正比关系，以此确定透明质酸钠的含量[23-25]。

综上所述，按《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）的测试要求，透明质酸钠能在试样酒中较稳定存在。

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Stability of sodium hyaluronate in Chinese liquor

YUAN Li1,ZHANG Min'ai1,ZHANG Li'na2,ZHANG Jianjun1*

(1.Shanxi Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Taiyuan 030024,China; 2.Jilin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Changchun 130062,China)

The stability of sodium hyaluronate in Chinese liquor was studied by stable experiment at different conditions,which could provide scientific basis in the production.All manipulations of the stability experiments were carried out according to the Standards of Inspecting and Evaluating Health-Care Food(2003 version)issued by Ministry of Health.The liquor samples were placed at 37-40℃with relative humidity of 75%.Using sodium hyaluronate content as indexes,the liquor with quantitative addition of sodium hyaluronate were continuously tracked to investigate the stability of sodium hyaluronate by measuring the corresponding remained quantity.By comparing the endpoint and initial values of sodium hyaluronate content in liquor,it showed that the average attenuation values was 7.73%,less than 10%,conforming to the standards of Inspecting and Evaluating Health-Care Food.

Chinese liquor;sodium hyaluronate;stability;spectrophotometry

TS202.3

A

0254-5071（2014）07-0141-03

10.11882/j.issn.0254-5071.2014.07.032

2014-05-20

苑利（1972-），女，高级工程师，本科，研究方向为检验检疫检测。

*通讯作者：张建军（1978-），男，工程师，本科，研究方向为微生物检测。