AMI大鼠Ghrelin的变化及人Ghrelin对其影响

韩 峰，田国忠，李梅秀

(佳木斯大学,黑龙江 佳木斯 154007)

急性心力衰竭(acute heart failure，AHF)是一种严重、复杂而常见的临床综合征，然而其发病机制尚未阐明，更缺乏有效干预措施；AMI是近年来诱发AHF的主要心血管疾病以及死因[1]，特别是其发病率呈现年轻化的趋势。不仅严重危害人类健康，而且带来极大的社会负面影响，是医学界亟待攻克的难题[1]。 生长激素释放肽(growth hormone -releasing peptides，GHRPs)是70年代合成的一族可以强烈刺激生长激素(growth hormone，GH)释放的寡肽，同时，又通过其广泛分布的G-蛋白偶联受体发挥独立于生长素轴以外的多种生物活性，特别是其心血管保护效应倍受心力衰竭(heart failure, HF)生物学治疗时代的广泛关注，与合成的非肽类及人与哺乳动物体内具有的内源性28个氨基酸的同类物质被合称为生长激素促分泌素(GHSs)，而天然Ghrelin正是GHSR的内源性配基[2，3]。本实验通过研究导致AHF的AMI模型大鼠循环水平Ghrelin的变化及人Ghrelin对其影响，为揭示GHSR介导的心血管保护效应增添新资料。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

足3月龄清洁健康成年Wistar 雄性大鼠，60只，体重(300±50)g，购于哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心 (许可证号：黑动字第80050-9)。实验共分成5组：首先随机抽取6只作为正常对照组、7只用于假手术组、其余均用于AMI模型组制作，合格模型再分成AMI模型组、AMI模型+Ghrelin组及AMI模型+[D-Lys3]-GHRP-6(GHSR阻滞剂)组，每组保证6～8只大鼠。

1.2 主要试剂及药品

人Ghrelin购于PROSPEC -TANY生物技术有限公司(以色列)，GHSR阻滞剂D-Lys3-GHRP-6购于TOCRIS公司(美国)，大鼠Ghrelin ELISA 试剂盒购于上海朗顿生物科技有限公司，其余药品均为国产分析纯。

1.3 实验方法

采用结扎大鼠冠状动脉前降支方法制作AMI模型[4]，术前、术后以多道生理仪系统直接观测心电、超声复核AMI模型制作结果及AHF病程进展。AMI模型+人Ghrelin组及AMI模型+[D-Lys3]-GHRP-6组于术后15min内分别经大鼠尾静脉一次注射人Ghrelin 25μg/kg或[D-Lys3]-GHRP-6 65μg/kg；其余各组都给予等体积生理盐水尾静脉注射。术后24h取大鼠内眦静脉血离心后，用ELISA方法检测大鼠血浆Ghrelin水平。使用大鼠Ghrelin ELISA试剂盒，严格按照说明书操作，酶标仪Gene5系统测得各组分吸光度OD值，计算所测各组大鼠血浆中Ghrelin含量水平。

1.4 统计学处理

2 结果

ELISA检测大鼠血液组织Ghrelin水平结果，见表1。与正常组大鼠比较，其余4组大鼠血浆的Ghrelin水平均升高，但假手术组与正常组比较无统计学意义；以GHSR阻滞剂组最高(P<0.01)，人Ghrelin干预组比模型组低(P<0.05)。

表1 各组大鼠血浆所含Ghrelin ELISA检测OD值及含量水平

*与正常对照组比较P<0.01；**与模型组比较P<0.05。

3 讨论

随着社会经济生活的节奏日益加快，AHF发病率呈现急转之上的趋势，而AMI这一重要病因使得AHF的有效治疗措施明显匮乏，AMI乃至AHF这两个因果病理过程的发生发展机制亦有待于进一步明确。因此，近年来医学工作者正将AHF生物学治疗纳入攻关课题的中心，在这种形势下，具有心血管保护效应的GHRPs成为新的遴选药物Ghrelin的发现[3，5]使GHRPs发挥HF治疗作用更加具有可行性，外源性的GHRPs与内源性天然Ghrelin在AMI、AHF病理进程中的变化规律有待追踪。本研究结果显示，AMI术后24h大鼠Ghrelin明显升高，不能用其心脏保护效应解释，是源于应激性升高抑或是保护性代偿，此内在的机制有待于进一步研究数据阐明；人Ghrelin抑制其升高，此时给予的干预是起到了治疗作用还是有害效果尚不能定论；GHSR阻滞剂却增加这种升高趋势，这从相反方面给我们出了新的解释GHSR介导的GHRPs心血管效应提示[6，7]。

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