浅谈临床PCR实验室的建立和管理

杨永兰 林 云

云南省中医学院第一附属医院检验科，云南 昆明 650021

浅谈临床PCR实验室的建立和管理

杨永兰 林 云

云南省中医学院第一附属医院检验科，云南 昆明 650021

目的为了PCR实验室顺利建立和开展工作，少走弯路，确保PCR实验结果的准确可靠，得到简便有序的工作程序，总结出一些实验室建立和管理的经验，以便提供参考。

临床PCR实验；管理

聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国Kary Mullis于1983年发明的［1］。它是一种体外核酸扩增技术，该技术主要通过高温变性，低温退火以及中温延生等过程把样本中靶DNA在体外扩增数百万倍，从而获得极高的检测敏感性。随着PCR技术不断发展完善，它在医学中的应用越来越广泛，越来越受重视，越来越多的医疗机构陆续建立起PCR临床实验室，即以临床检验为目的的基因扩增实验室，并陆续开展关于PCR检验的新业务。笔者所在医院PCR相关业务也因需在近几年得到开展，笔者从实验室的建立到现在日常运行，一直参与其中，对于临床PCR实验室的管理和运行积累了一些经验和看法，现就这些经验总结如下，和广大同行一起浅谈一下临床PCR实验室的管理。

1 PCR实验室的建立

一个正规的PCR实验室要求是很严格的，不管是从实验室的环境要求到仪器设备和试剂耗材，还是从人员素质要求再到质量控制管理，每一个环节都是很重要的，国家也对临床PCR实验室的建立和运行也有着专门的要求，因此要顺利开展起实验室我们必须要有的放矢，理清思路，循序渐进的，有条不紊的一步一步来。

1.1 PCR实验室申办前准备

首先了解实验室必需具备哪些条件，然后针对每一个条件进行完善，最终完全满足这些条件的要求。

1.1.1 给出标准的实验室设计方案 设计上，建立单流向、一体化的临床定量PCR实验室是安全准确进行基因扩增检验和保障生物安全的重要措施［2］。具体的是合理分区问题（通常分为试剂准备区、标本制备区、扩增区三个区）以及标准风向等环境条件。

1.1.2 配备专业技术人员 挑选业务水平较好的有资质的人员［3］，均经过卫生部临检中心或区临检中心理论和操作培训并通过考试取得合格证［4］。

1.1.3 仪器设备以及试剂材料的准备 根据开展的项目，调研已经开展良好的实验室，并认真对比市场各类产品，严格的选取所需设备和试剂。

1.1.4 标准操作规程的制定以及质量管理文件等的编写。

根据自身实验室开展的具体项目要求，结合自身使用的设备试剂进行编写。

1.2 PCR实验室申办程序

进行实验室申办程序具体如下：首先填写调查表，由省临检中心审核；然后正式填写申请表，上报卫生部临检中心；评审由卫生部、省专家参加，并报省卫生厅备案；最后合格单位名单由卫生行政部门在媒体公示［3］。

1.3 持续性改进

针对评审专家指出的不足之处及合理性建议，进行持续性的改进。

2 PCR实验室日常工作的管理

污染问题是PCR实验室最常遇见的也是最重要的问题，它与我们检验结果的准确性密切相关。而污染可以出现在实验室的任何一个环节，因此日常工作的每一个环节都很重要。

2.1 仪器的管理

主要的仪器是扩增仪和离心机，每天日常工作我们都要对其擦拭清洁，仔细认真检查仪器工作状态是否良好，离心力是否合格，扩增仪孔间差是否有问题。

2.2 试剂的管理

试剂管理十分重要，直接影响着检验结果，我们尽量选取高质量的PCR试剂。排除试剂的选取问题，试剂的分类和储存也很重要，试剂储存严格按照储存条件，存放位置也要科学合理善于管理，以防止试剂大规模污染为原则，以先用效期短的试剂后用效期长的为原则，以不浪费不使用过期试剂为原则，以不同批号试剂不混放为原则，以不同项目试剂区别存放为原则，以新旧试剂不混放为原则。

2.3 环境的管理

单向气流，单向物品传送，生物安全，从这些环境要求可以看出实验室环境问题对于PCR实验室的重要性，因此确保环境参数也是保证实验准确的基础，我们应该每天对工作台面进行擦拭消毒，工作结束紫外灯进行照射，经常检查换气扇的工作状态是否正常，注意实验室的通风等。

2.4 人员的管理

人员是核心，他掌控着实验室的一切，一举一动都可能影响着不同的环节，因此对人员就有相当高的要求，对人员我们不仅要求工作认真仔细，以防止少加漏加等低级错误造成结果的错误，更要求灵活敏锐，善于发现问题总结问题，实验结果出现问题时能最快最好的解决，实验中要求严格按照操作规程进行。

3 PCR实验室质量控制管理

3.1 室内质量控制的管理

室内质量控制是为了控制实验室内某个检验项目日常工作中的精密度，保证实验室工作前后的一致性，进而保证检验结果的质量，PCR实验过程很多，包括标本采集，核酸提取等，每个环节都需要相应质控措施，因此PCR室内质量控制就需要我们严格按照室内质控要求长期坚持，并认真的做好记录，便于我们总结问题。

3.2 室间质评的管理

室间质评是检验质量体系中重要的环节，它确保了我们实验室检验结果的准确性。因此保证得到可靠的结果我们不但要坚持室内质量控制，更要积极参加室间质评，对我们检查结果做到胸中有数。对于不满意的结果及时分析原因进行改进，从而不断提高我们的检验水平。

4 结语

PCR技术的迅猛发展，PCR技术的迅猛发展，与其实用性密不可分。在不久的将来，PCR技术将有更高的突破，PCR临床实验室在医疗中也将发挥更大的作用。因为PCR技术的特殊性，对实验室各环节的高要求，这就要我们必须严格按照PCR实验室的要求进行每一步工作，只要确保对实验室进行标准的建立、标准的管理，就会获得可靠的研究结果，为临床提供最有价值的数据。

［1］朱忠勇．实用医学检验学［M］．2版．北京：人民军医出版社，1997：1041．

［2］江其生，金济民，李峰生，等．单流向一体化临床定量PCR实验室的优化设计与设备配置［J］．医疗卫生装备，2006，27（9）：34-36．

［3］宋秀军， 江其生．浅谈临床定量PCR实验室管理［J］．医疗卫生装备，2010，31（2）：84-87．

［4］梁志东．PCR实验室污染的排除［J］．实用医技杂志，2006，13（7）：1141-1142．

R446.1

A

1674-9316（2014）06-0119-02

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.06.068

方法笔者根据自身实验的建立到日常的运行，归纳总结出关于PCR实验室建立和管理的一些经验和看法。

结论PCR技术迅猛发展，跟他的实用性分不开，我们可以预见不久的将来，PCR技术将有更高的突破，PCR临床实验室在医疗中也将发挥更大的作用。我们严格按照实验室的要求做好实验室的建立和管理工作，我们必将少走弯路，少出错误。得到最为准确可靠的结果，从而更好的为临床服务。