思茅松化学成分研究

施贵荣，郭美仙，李冬梅，刘 熙，杨 静，刘光明

(1.大理学院药学与化学院，云南大理 671000;2.大理州食品药品检验所，云南大理 671000)

思茅松Pinus kesiya R.松塔为松科Pinaceae松属Pinus植物的球果，可入药。经体内、体外药理研究表明，松属植物的松塔提取物有抗肿瘤、抗HIV、抗氧化、抗菌等作用［1-5］。思茅松主产于云南思茅、德宏、临沧、西双版纳等地，现在已经引种栽培至大理、红河、文山、楚雄、昆明等地区，资源十分丰富;但对思茅松的研究利用较少，其松塔常被当作燃料烧掉。为了开发利用这一资源，前期实验对思茅松的化学成分进行了初步研究并进行了报道［6-7］;在前期的基础上本实验继续对思茅松松塔化学成分进行研究，从其乙醇提取物中分离得到7个二萜类化合物。

1 材料与仪器

Bruker AM-400MHz核磁仪 (Nicolet公司)，B686A型中压液相色谱仪 (瑞士Büchi公司)，柱色谱硅胶 (80～100目，100～200目，200～300目)及薄层色谱硅胶GF254(青岛海洋化工厂)，反相RP-18(50 μm)(日本 YMC公司)，Sephadex LH-20(Pharmacia公司)，其他试剂均为分析纯。

样品于2010年8月采自云南省思茅市，原植物由大理学院药学与化学学院周浓副教授鉴定为思茅松，样品标本保存在大理学院药学与化学学院生药学教研室。

2 提取与分离

思茅松松塔干燥，粉碎，取样8 kg用95%乙醇在室温条件下冷浸提取3次，每次48 h;合并3次提取液浓缩回收乙醇，加蒸馏水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂得石油醚组分 (40 g)、乙酸乙酯组分 (130 g)、正丁醇组分 (77 g)。取乙酸乙酯萃取组分100 g溶解于丙酮，用硅胶 (80～100目)拌样，经硅胶柱层析，用石油醚-丙酮梯度洗脱 (V/V，20∶1，10∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，0∶10)，得到7个流份FrA～G。流份FrB(26 g)经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱 (V/V，10∶1，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5)，得流份FrB1～B6;流份FrB3、FrB4、FrB5、FrB6经 Sephadex LH-20(三氯甲烷-甲醇，1∶1)柱层析，反复硅胶柱层析 (流动相分别为环己烷-乙酸乙酯、环己烷-异丙醇、三氯甲烷-丙酮等)得化合物 (1)(5 mg)、(2)(7 mg)、(3)(18 mg)、(4)(15 mg)。流份FrD(15 g)经中压液相色谱 (MPLC)处理，填充材料为反相RP-18，用甲醇-水梯度洗脱 (V/V，3∶7，4∶6，5∶5，6∶4，7∶3，10∶0)，得流份 FrD1～D6;其中FrD2和FrD3经Sephadex LH-20(甲醇)柱层析，反复硅胶柱层析 (流动相分别为环己烷-乙酸乙酯、环己烷-异丙醇、三氯甲烷-丙酮等)得化合物 (5)(70 mg)、(6)(50 mg)、(7)(14 mg)。

3 结构鉴定

化合物1:C21H30O3，白色粉末，易溶于三氯甲烷。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.21(1H，d，J=8.0 Hz，H-11)，7.10(1H，d，J=8.0 Hz，H-12)，7.01(1H，s，H-14)，2.81(2H，m，H-7)，2.36，1.52(2H，m，H-1)，2.14(1H，s，H-19)，1.73(2H，m，H-2)，1.45(3H，s，H-16)，1.45(3H，s，H-17)，1.22(3H，s，H-19)，1.19(3H，s，H-20)，3.05(3H，s，-OCH3)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:37.7(t，C-1)，18.4(t，C-2)，36.7(t，C-3)，47.4(s，C-4)，44.4(d，C-5)，21.7(t，C-6)，30.2(t，C-7)，134.6(s，C-8)，147.8(s，C-9)，36.8(s，C-10)，124.1(d，C-11)，123.1(d，C-12)，142.5(s，C-13)，126.4(d，C-14)，76.6(s，C-15)，27.9(q，C-16)，27.7(q，C-17)，185.1(s，C-18)，16.2(q，C-19)，25.2(q，C-20)，50.6(q，-OCH3)。以上数据与文献［8］报道基本一致，故鉴定化合物1为15-methoxydehydroabietic acid。

化合物2:C19H28O，无色油状物，易溶于三氯甲烷。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.20(1H，d，J=8.2 Hz，H-11)，7.02(1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-12)，6.81(1H，s，H-14)，2.91(2H，m，H-7)，2.81(1H，m，H-15)，2.26(1H，m，H-1a)，2.14(2H，m，H-6)，1.88(1H，m，H-3a)，1.67(2H，m，H-6)，1.61(1H，m，H-5)，1.44(1H，m，H-1b)，1.40(1H，m，H-3b)，1.25(3H，s，H-20)，1.23(3H，d，J=7.0 Hz，H-16)，1.23(3H，d，J=7.0 Hz，H-17)，1.16(3H，s，H-19)。13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ:37.9(t，C-1)，20.4(t，C-2)，42.5(t，C-3)，72.5(s，C-4)，52.2(d，C-5)，17.9(t，C-6)，30.2(t，C-7)，134.7(s，C-8)，146.2(s，C-9)，38.1(s，C-10)，124.5(d，C-11)，123.8(d，C-12)，145.4(d，C-13)，126.8(d，C-14)，33.4(s，C-15)，23.8(q，C-16)，23.9(q，C-17)，22.8(q，C-19)，24.4(q，C-20).以上数据与文献［9］报道基本一致，故鉴定化合物 2 为 18-nor-abieta-8，11，13-trien-4-ol。

化合物3:C20H28O3，白色粉末，易溶于三氯甲烷。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.29(1H，s，H-14)，7.22(1H，m，H-12)，7.14(1H，m，H-11)，4.83(1H，d，J=3.2 Hz，H-7)，2.89(1H，m，H-15)，2.48(2H，d，J=12.8 Hz，H-5)，2.33(1H，t，J=10.0 Hz，H-1a)，2.25(1H，m，H-6a)，1.85(1H，m，H-3a)，1.83(2H，m，H-2)，1.67～1.79(2H，m，H-3b，6b)，1.54(1H，m，H-1b)，1.28(3H，s，H-20)，1.24(3H，s，H-16)，1.28(3H，s，H-17)，1.18(3H，s，H-19)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ:37.7(t，C-1)，18.6(t，C-2)，36.2(t，C-3)，47.0(s，C-4)，39.8(d，C-5)，30.8(t，C-6)，68.3(d，C-7)，135.5(s，C-8)，146.7(s，C-9)，37.4(s，C-10)，124.3(d，C-11)，126.7(d，C-12)，146.6(s，C-13)，128.3(d，C-14)，33.6(d，C-15)，23.9(q，C-16)，24.1(q，C-17)，182.5(s，C-18)，16.3(q，C-19)，24.2(q，C-20)。以上数据与文献［10］报道基本一致，故鉴定化合物3为7α-hydroxydehydroabietic acid。

化合物4:C20H28O3，白色粉末，易溶于三氯甲烷。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.40(1H，s，H-14)，7.18(1H，m，H-12)，7.12(1H，m，H-11)，4.93(1H，dd，J=7.4，9.8 Hz，H-7)，2.90(1H，m，H-15)，2.49(2H，d，J=6.9 Hz，H-5)，2.37(1H，t，J=12 Hz，H-1 a)，2.29(1H，m，H-6a)，1.90(1H，m，H-3a)，1.81(2H，m，H-2)，1.72～1.75(2H，m，H-3b，6b)，1.48(1H，m，H-1b)，1.31(3H，s，H-20)，1.27(3H，s，H-16)，1.27(3H，s，H-17)，1.25(3H，s，H-19)。13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ:37.5(t，C-1)，18.4(t，C-2)，36.2(t，C-3)，47.1(s，C-4)，43.3(d，C-5)，32.8(t，C-6)，70.7(d，C-7)，137.4(s，C-8)，146.6(s，C-9)，37.9(s，C-10)，125.2(d，C-11)，124.2(d，C-12)，146.6(s，C-13)，125.9(d，C-14)，33.7(d，C-15)，23.9(q，C-16)，24.1(q，C-17)，184.0(s，C-18)，16.2(q，C-19)，25.5(q，C-20)。以上数据与文献［10］报道基本一致，故鉴定化合物4为7β-hydroxy dehydroabietic acid。

化合物5:C20H28O4，白色粉末，易溶于丙酮。1H-NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:7.50(1H，s，H-14)，7.38(1H，dd，J=8.1 Hz，H-12)，7.24(1H，dd，J=8.1 Hz，H-11)，4.74(1H，d，J=4.0 Hz，H-7)，2.56(1H，d，J=12.8 Hz，H-5)，2.38(1H，d，J=12.8 Hz，H-1a)，2.10(1H，m，H-6a)，1.90(1H，m，H-3a)，1.84(2H，m，H-2)，1.65～1.75(2H，m，H-3b，6b)，1.46(1H，m，H-1b)，1.50(3 H，s，H-16)，1.50(3H，s，H-17)，1.27(3H，s，H-19)，1.17(3H，s，H-20)。13C-NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:37.8(t，C-1)，18.6(t，C-2)，36.2(t，C-3)，46.6(s，C-4)，39.7(d，C-5)，31.1(t，C-6)，66.9(d，C-7)，136.6(s，C-8)，147.5(s，C-9)，37.2(s，C-10)，123.2(d，C-11)，124.1(d，C-12)，146.8(s，C-13)，126.4(d，C-14)，70.9(s，C-15)，31.5(q，C-16)，31.5(q，C-17)，178.7(s，C-18)，16.2(q，C-19)，23.7(q，C-20)。以上数据与文献［11］报道基本一致，故鉴定化合物5为7α，15-dihydroxydehydroabietic acid。

化合物6:C20H28O4，白色粉末，易溶于丙酮。1H-NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:7.50(1H，s，H-14)，7.38(1H，dd，J=1.6，8.1 Hz，H-12)，7.24(1H，dd，J=8.1 Hz，H-11)，4.76(1H，t，J=8.4Hz，H-7)，2.56(1H，d，J=12.8 Hz，H-5)，2.25(1H，d，J=12.8 Hz，H-1a)，2.07(1H，m，H-6a)，1.91(1H，m，H-3a)，1.82～1.87(2H，m，H-2)，1.65～1.73(2H，m，H-3b，6b)，1.46(1H，m，H-1b)，1.49(3H，s，H-16)，1.49(3H，s，H-17)，1.30(3H，s，H-19)，1.28(3H，s，H-20)。13C-NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:38.1(t，C-1)，18.3(t，C-2)，36.4(t，C-3)，46.6(s，C-4)，43.7(d，C-5)，32.5(t，C-6)，70.2(d，C-7)，138.4(s，C-8)，147.5(s，C-9)，37.5(s，C-10)，123.4(d，C-11)，123.5(d，C-12)，146.8(s，C-13)，123.8(d，C-14)，71.0(s，C-15)，31.5(q，C-16)，31.5(q，C-17)，178.7(s，C-18)，16.1(q，C-19)，24.9(q，C-20)。以上数据与文献［12］报道基本一致，故鉴定化合物6为7β，15-dihydroxydehydroabietic acid。

化合物7:C19H28O3，白色粉末 (甲醇);1HNMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.45(1H，d，J=2.0 Hz，H-14)，7.37(1H，dd，J=2.0，8.4 Hz，H-12)，7.27(1H，d，J=8.4 Hz，H-11)，4.82(1H，s，H-7)，2.32(1H，m，H-6a)，2.24(1H，m，H-1a)，1.96(1H，d，J=4.4 Hz，H-5)，1.87(1H，m，H-6b)，1.77(1 H，m，H-3a)，1.61(2H，m，H-2)，1.42(1H，m，H-1b)，1.10(1H，m，H-3b)，1.53(6H，s，H-16，17)，1.22(3H，s，H-19)，1.11(3H，s，H-20)。13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ:37.6(t，C-1)，20.1(t，C-2)，42.0(t，C-3)，71.3(s，C-4)，45.8(d，C-5)，27.2(t，C-6)，67.3(d，C-7)，135.5(s，C-8)，147.1(s，C-9)，38.3(s，C-10)，124.2(d，C-11)，123.9(d，C-12)，146.8(s，C-13)，126.4(d，C-14)，71.4(s，C-15)，30.5(q，C-16)，30.5(q，C-17)，21.4(q，C-19)，22.6(q，C-20)。以上数据与文献［13］报道基本一致，故鉴定化合物7为18-norabieta-8，11，13-teiene-4α，7α，15-triol。

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