中药治疗药物性肝损伤实验研究进展

陈苓丽王 鹏羊 波黄 萍

1正大青春宝药业有限公司 杭州 310023 2浙江中医药大学 3浙江省立同德医院

中药治疗药物性肝损伤实验研究进展

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1正大青春宝药业有限公司 杭州 310023 2浙江中医药大学 3浙江省立同德医院

药物性肝损伤；中药治疗；实验研究；综述

药物性肝损伤（drug-induced liver injury，DILI）是指在药物使用过程中，因药物或其代谢产物引起的肝组织的生理功能变化或免疫应答所引起的肝损伤[1]。大量新药的出现以及联合用药的增多，使药物性肝损伤已经成为临床上常见的肝脏疾病之一。在我国，结核药、中草药、抗生素和非甾体抗炎药是引起药物性肝损伤的主要药物种类[2]，其作用机制仍不够明确。某些中药具有减轻肝损伤的病理程度，改善临床症状和某些实验室指标的作用。本文就近年来中药治疗药物性肝损伤的实验研究现状进行了综述。

1 动物模型的研究

复制DILI模型的动物主要是大鼠和小鼠。建模方法主要以药物诱导为主，常用的药物有异烟肼和利福平、雷公藤多苷和对乙酰氨基酚[3]。异烟肼和利福平是临床治疗结核病一线药物，单独使用都具有肝毒性作用，联合使用可增大肝损伤的几率。Pal等[4]采用异烟肼和利福平联合用药的方式建立大鼠DILI模型，给Wistar大鼠每天空腹灌胃50mg/（kg·d）的异烟肼和利福平，28天后造模成功。杨慧媛等[5]采用异烟肼和利福平成功复制DILI模型，设立正常对照组、异烟肼+利福平组（RH）及异烟肼组（H组），1天1次定时空腹灌胃，剂量50mg/（kg·d），第4周造模成功，研究发现异烟肼与利福平致肝损伤作用机制可能与脂质过氧化增加有关。

对乙酰氨基酚是常用的非甾体抗炎药，也是引起DILI的主要药物，采用对乙酰氨基酚建立的肝损伤模型常被用来检验天然产物是否有潜在的肝毒性[6]。Liu等[7]通过给小鼠一次性腹腔注射300～500mg/kg的对乙酰氨基酚溶液（加热溶于磷酸盐缓冲液），4h后造模成功。Cover等[8]采用对乙酰氨基酚建立DILI模型，通过灌胃方式给小鼠质量浓度为2.5%的对乙酰氨基酚混悬液（300mg/kg），24h后造模完成。

雷公藤具有抗炎和免疫抑制作用，多用于治疗自身免疫性疾病，具有较好的疗效，但该药具有明显的肝毒性。从雷公藤中提取的雷公藤多苷可用于诱导DILI的产生。禄保平等[9]对雷公藤多苷致小鼠急性肝损伤的剂量、时间及可能机理进行了研究，研究发现给小鼠灌胃相当于成人20倍剂量的雷公藤多苷（270mg/kg），18h后即可以引起小鼠急性肝损伤。

2 单味药及有效成分的研究

近年来，中医治疗DILI的单味药多以含有机酸类、生物碱类、环烯醚萜类、黄酮苷、多糖等活性成分的中药为主[10]。

2.1 淫羊藿总黄酮 淫羊藿为我国传统中药，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，其主要成分为黄酮类化合物。淫羊藿总黄酮是从小檗科淫羊藿属植物茎叶中提取的总黄酮类成分，研究发现其具有广泛的药理作用。蔡大伟等[11]采用异烟肼和利福平建立小鼠DILI模型，以0.2%和0.1%的淫羊藿总黄酮进行干预，10天后淫羊藿总黄酮高剂量组小鼠血清和肝组织中的谷丙转氨酶（GPT）明显降低，血甘油三酯（TG）含量也明显降低，SOD活性有所提高。

2.2 黄芩苷 薛洪源等[12]通过异烟肼和利福平诱导制造小鼠药物性肝损伤模型，结果显示，黄芩苷能显著降低模型小鼠血清ALT水平、肝组织中MDA含量及细胞色素P450 2E1活性，增加GSH含量。病理组织学检查显示，黄芩苷能明显减轻肝细胞的变性和坏死。认为黄芩苷对异烟肼和利福平引起的肝损伤的保护作用不仅与清除自由基、抑制肝细胞膜的脂质过氧化反应有关，还与抑制细胞色素P450 2E1的活性有关。

2.3 慈 菇 又称剪刀草、燕尾草、蔬卵，具清热止血、解毒消肿、散结的功效。廖艳等[13]研究发现，不同剂量的慈菇均能明显降低异烟肼和利福平诱导的DILI大鼠肝组织中的MDA含量，减轻肝组织变性和坏死程度。其中高剂量组慈菇能显著降低肝损伤大鼠的肝脏指数、提高肝匀浆中SOD和谷胱甘肽转硫酶GST的活性。中剂量组慈菇亦能显著提高GST的活性。并由此推测慈菇对异烟肼和利福平诱导的大鼠肝损伤具有保护作用，可能与其抗脂质过氧化、减少过氧化脂质的生成、增强机体对自由基的清除有关。

2.4 当归多糖 当归多糖是当归主要成分之一。刘娟[14]在地塞米松诱导肝损伤的动物模型中，以100mg/ kg和200mg/kg剂量的当归多糖口服干预10天后发现，两组剂量的当归多糖均能降低血清ALT、AST，减轻肝组织损伤。当归多糖还能提高SOD活性，增加GSH含量，但对P450 2E1酶活性没有影响。研究认为当归多糖能有效干预地塞米松所致肝损伤可能与抑制脂质过氧化、调节糖代谢紊乱有关。

2.5 尾穗苋甲醇提取物 Ashok Kumar等[15]采用扑热息痛致大鼠肝损伤模型，以200mg/kg和400mg/kg的尾穗苋甲醇提取物进行干预16天，结果显示，尾穗苋甲醇提取物能抑制扑热息痛导致的ALT、AST、总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）水平的升高及血清白蛋白（ALB）水平的降低，同时还能显著降低MDA及总蛋白水平，显著升高GSH、过氧化氢酶（CAT）及总硫醇（TT）水平。

2.6 相思藤总黄酮 相思藤又名土甘草，系豆科相思子属，实验研究证明其对肝炎有一定的治疗作用。陈红霞等[16]采用对乙酰氨基酚致药物性肝损伤小鼠模型，以相思藤总黄酮治疗5天，结果显示相思藤总黄酮能显著降低小鼠的AST、ALT活性，提高肝组织中SOD、GSH和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）含量，降低MDA含量。

2.7 大黄 王秀明等[17]采用对乙酰氨基酚建立药物性肝损伤小鼠模型，以4g/kg和8g/kg的大黄水煎剂进行干预16h后发现：大黄水煎剂组小鼠肝脏TNF-α基因的表达较模型组明显降低，肝脏脂肪变性和坏死情况有所改善。推测大黄抑制TNF-α基因的表达可能是其治疗的机制之一。

2.8 万年青总皂苷 宛莹等[18]用万年青总皂苷对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤模型治疗3天后发现：万年青总皂苷能抑制血清AST和ALT的活性，减少脂质过氧化物的生成，提高过氧化氢酶、SOD和GSH-PX的活性，抑制细胞凋亡蛋白酶caspase-3和缺氧诱导因子1α的表达。同时体外实验发现万年青总皂苷能显著减少细胞色素P4502E1的活性及环氧化酶-2的表达。认为其作用机制可能与抗氧化、抑制细胞色素P4502E1的活性和减少缺氧诱导因子1α的生成有关。

2.9 番茄红素 番茄红素是一种不含氧的类胡萝卜素，同时也是一种很强的抗氧化剂。何军等[19]用番茄红素对雷公藤多苷诱导的药物性肝损伤小鼠干预6天，发现番茄红素能显著降低血清中ALT、AST含量，提高小鼠肝组织中SOD活性，降低MDA含量。

3 中药复方研究

褚春薇等[20]采用异烟肼和利福平建立药物性肝损伤大鼠模型，以加味一贯煎治疗，结果显示加味一贯煎能抑制大鼠血ALT、AST含量的增加，降低肝组织中MDA水平。同时发现加味一贯煎对肝组织损伤程度与剂量不存在量效关系。蔡大伟等[21]同样采用异烟肼和利福平致小鼠药物性肝损伤模型，以丹芪益肝颗粒干预10天，发现丹芪益肝颗粒组较模型组小鼠血清和肝脏ALT活性下降（P＜0.01），同时能明显降低TG含量（P＜0.05）。同时，丹芪益肝颗粒能明显降低MDA的含量（P＜0.05），提高SOD的活性（P＜0.05），并能减轻肝细胞的损伤。

柴智等[22]采用雷公藤多苷建立小鼠DILI模型，应用逍遥散进行干预5天结果显示，与模型组比较，逍遥散组小鼠血清中的ALT、AST含量显著降低（P＜0.05），谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活力明显提高（P＜0.05），血清MDA含量显著降低（P＜0.05），同时中、高剂量组还可提高SOD水平（P＜0.05）。逍遥散对雷公藤引起的急性肝损伤具有保护作用，其作用机制与抑制脂质过氧化反应有关。柴智等[23]采用雷公藤多苷建立小鼠DILI模型，应用四逆散进行干预7天后发现，与模型组比较，四逆散组小鼠肝组织中Bcl-2表达显著升高、Bax表达显著下降，Caspase-3活性明显下降，TNF-α的mRNA显著下降。四逆散具有对抗雷公藤多苷引起的急性肝细胞凋亡的作用。

周文静等[24]采用雷公藤醇提取物建立小鼠DILI模型，以归脾汤干预5天，与模型组相比，归脾汤能显著降低血清ALT、AST、MDA水平，提高GSH-Px水平，中、高剂量还可提高SOD水平，同时归脾汤各组均能减轻肝脏病理损伤程度。从实验中得出结论：归脾汤能保护雷公藤所致的肝损伤，并认为急性肝损伤的发生机制与脂质过氧化有关。

4 小结

中医药治疗药物性肝损伤疗效肯定，能减轻动物模型的肝组织变性和坏死程度，改善实验指标。初步研究提示中药抗肝损伤的作用是多途径的，多环节的，主要与抗氧化、调节免疫功能、改善肝脏微循环等有关。目前中医药治疗DILI存在以下问题：①药物性肝损伤的模型建立方法研究较少，动物模型公认度低，与临床实际尚有一定的差距。②单味中药及有效成分的实验研究较多，但对其作用机制研究不够深入，其作用靶点、作用过程和作用结果还有待进一步研究。③药物性肝损伤是用药物引起的肝损伤，通过中药进行防治是否会加重肝功能的负担还需要进一步研究。④造模过程中对中药的干预时间、中药造模的剂量无明确标准，需要建立中医治疗DILI的规范标准，以有效评价中医治疗DILI的疗效。

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2013-07-10